肺癌患者中HE4等六项肿瘤标志物的联合诊断价值探讨

刘 婧 江中林 曹 阳

肺癌相关的血清肿瘤标志物检测在近年来发展很快，它们的异常改变往往早于影像学表现[1]，因此在肿瘤筛查、诊断、判断预后和转归方面发挥越来越重要的作用。合理选择和组合使用血清肿瘤标志物，在临床上可以大大提高其诊断价值。目前，神经原特异性烯醇化酶（NSE）、细胞角蛋白－19片段（CYFRA21-1）和鳞状细胞癌相关抗原（SCC）是临床诊断肺癌重要的肿瘤标志物[2]。Nagy J等发现，作为一种比较新的肿瘤标志物，血清HE4的检测在肺癌的诊断中具有重要的价值，尤其联合检测糖类抗原125（CA125）、癌胚抗原（CEA）等血清肿瘤标志物效果更佳[3]。本研究旨在探讨人附睾分泌蛋白4（HE4）、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1这六项肿瘤标志物的联合检测在肺癌的诊断及淋巴结转移监测中的意义。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选自2018年10月-2019年10月在本医院呼吸内科、胸泌科、化疗科、急诊科住院患者85例，并且所有患者均已病理学确诊。85例肺部癌症患者病理分型：小细胞癌15例，鳞癌24例，腺癌46例；根据2017年国际抗癌联盟（UICC）肺癌TNM分期标准第八版，所选85例肺癌其临床TNM分期：Ⅰ期1例，Ⅱ期15例，Ⅲ期31例，Ⅳ期38例。其中，男60例，女25例，年龄31～80岁，平均年龄（47.9±10.4）岁。85例肺癌患者中49例无淋巴结转移，36例有淋巴结转移。所有病例均由病理或细胞学确诊。肺部良性病变病例标本45例，年龄21～78岁，平均年龄（53.3±15.6）岁，良性病变对照组经病理或临床诊断为良性病变，其中肺炎22例，慢性阻塞性肺病11例，肺良性肿瘤12例。两组患者年龄差异无统计学意义（P＞0.05）。确定的排除标准为：不合作的患者；年龄＞80岁的患者；肝、肾、心脏等器官严重疾病的患者；标本无脂血无溶血。选取的肺部良性病变患者采血前均未接受抗肿瘤药物治疗。

1.2 检测方法 本研究所选检测者均要求于清晨空腹抽取静脉血3 mL，送实验室后立即分离血清，于-70℃冷藏冰柜保存待检。SCC检测项目采用深圳新产业生物医学工程股份有限公司生产的 Maglumi 4000 Plus全自动化学发光分析仪及其配套试剂盒。HE4、NSE、CEA、CA125、CYFRA21-1等检测项目采用罗氏电化学发光全自动分析仪e-602，检测试剂由罗氏公司提供相应的配套试剂。质控品采用美国伯乐公司提供的肿瘤类高、中值质控品，质控判断标准为Westgard多规则分析。以上各项目检测均严格按仪器和试剂说明书由专人进行操作。各项检测指标按德国进口罗氏诊断公司电化学发光试剂说明书及深圳新产业化学发光试剂说明书确定实验室参考区间如下：NSE≤16.3 ng/mL、CEA≤ 6.5 ng/mL、CYFRA21-1≤3.3 ng/mL、SCC 相关抗原＜2.5 ng/mL、CA125≤35 U/mL、HE4＜121 pmol/L。诊断结果阳性判定标准：各项检测指标的检测值水平超过正常参考值上限范围。

1.3 统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件处理数据，计量资料采用均数±标准差的方法表示，采用t检验；行多因素采用Logistic回归分析，并绘制受试者工作特征曲线（ROC曲线），计算曲线下面积（AUC）。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 两组患者HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比较 肺癌组与良性病变对照组比较，HE4、NSE、CYFRA21-1的水平显著升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；两组CEA、CA125、SCC水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 两组患者HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1检测结果比较（x±s）

2.2 肺癌淋巴结转移与否两组中HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比较 经临床手术和病理学证实，85例肺癌患者中49例无淋巴结转移，36例有淋巴结转移。两组进行比较，在HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1等四个项目检测水平中，有淋巴结转移组明显高于无淋巴结转移组，其差异具有统计学意义（P＜0.05）；CA125、SCC水平比较，差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 肺癌淋巴结转移与否两组中HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平比较（x±s）

2.3 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1水平变化在肺淋巴结转移中的价值评价 将HE4、CEA、CA125、SCC、NSE、CYFRA21-1六 项指标在有肺癌淋巴结转移和无淋巴结转移两组中的水平变化绘制ROC曲线（图1）。HE4的AUC为0.780，95%CL：0.695～0.866，当HE4的 截断值为109.6 pmol/L时敏感性为71.8%，特异性为82.5%，临床诊断的符合率为72.6%，其预测价值最 佳；NSE的AUC为0.755，95%CL：0.662～0.847，当NSE的截断值为51.3 ng/mL时特异性为89.5%，敏感性为50.2%，临床诊断的符合率达到73.8%，其预测价值最佳；CYFRA21-1的AUC为0.794，95%CL:0.713～0.878，当 CYFRA21-1的截断值为23.75 ng/mL时敏感性为70.6%，特异性为93.2%，诊断符合率为83.2%，其预测价值最佳。CEA、CA125、SCC三项由于在0.5＜ AUC ＜0.7，所以在肺癌淋巴结转移预测诊断价值不高。

图1 ROC曲线

2.4 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六项联合检测及单项检测对肺癌的诊断价值 结果表明，进行六项联合检测，无论是在其准确性、敏感性还是阴性预测值方面，与单项检测相比较都有显著提高，其差异具有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1关于肺癌诊断价值的评价(%)

3 讨 论

肺癌的局部复发和远处转移导致肺癌患者预后差，总体5年生存率约为16%，对肺癌患者进行早期诊断、早期治疗，从而提高其生存率，是广大医学研究者共同的目标。

3.1 肺癌相关的血清肿瘤标志物的类型 ①HE4：1991年，Kirchhoff等人在人附睾上皮细胞中发现的一种糖蛋白，该糖蛋白隐匿于乳清酸性4-二硫化中心（WFDC），这就是HE4。HE4在卵巢肿瘤组织中高度表达，可作为卵巢癌的血清肿瘤标志物。进一步研究发现，HE4在肺部肿瘤、乳腺肿瘤、盆腔肿瘤、肾癌和移行细胞癌等恶性肿瘤疾病患者的血清中也具有一定表达，提示其可作为血清学肿瘤标志物，提供重要辅助诊断价值[4]。另外，Yamashita S等[5]发现原发性肺腺癌患者组血清中HE4含量明显高于健康对照组，且术后复发患者血清中的HE4含量将进一步升高，提示HE4的高表达与肺癌患者手术后复发也存在一定相关性。②CYFRA21-1：CYFRA21-1是一种酸性蛋白质，广泛存在于单层上皮细胞的细胞质中。当上皮细胞起源的肿瘤细胞（如肺癌、食管癌）发生坏死或者溶解时，CYFRA21-1会以片段的形式释放到血液中，致使其血清水平急剧上升[6]。目前，CYFRA21-1主要用于监测非小细胞型肺癌（NSCLC）。③NSE：NSE是一种糖酵解酶，在哺乳动物的大脑神经元中大量存在，另外在肺癌组织中也发现有大量NSE存在，其中，小细胞肺癌中含量最高，其组织中的含量可达到正常肺细胞的3～35倍[7]。NSE是目前公认的小细胞肺癌高特异性和高灵敏性的肿瘤标志物。④SCC：SCC是一种鳞状上皮抗原，存于鳞状细胞（如宫颈、肺等）的胞浆内，可作为非小细胞肺癌（NSCLC）的血清学肿瘤标志物。在排除肾功能衰竭和皮肤病的情况下，SCC血清水平升高临床上可提示有NSCLC的发生。SCC的检测对于肺癌预后诊断有一定价值，可提示其复发、治疗后残余和治疗反应。⑤CEA：CEA是由消化道细胞分泌的一种广谱性血清肿瘤标志物。有研究表明，肺癌中的CEA阳性率为40%～80%。由于其广谱性，临床上常用CEA与其他肿瘤标志物联合检测来提高肺癌的诊断率。⑥CA125：CA125是上皮卵巢癌和子宫内膜癌的良好肿瘤标志物，在肺癌患者中也有一定的阳性率，并可随肺癌分期进展而明显升高。

3.2 肺癌血清肿瘤标志物联合检测的临床价值分析 ①在本组资料中发现，肺癌组血清检测的标志物中HE4、NSE、CYFRA21-1三项检测值与良性病变对照组相比有显著差异，具有统计学意义（P＜0.05），表明其对肺癌的诊断有一定意义。另外三个检测项CEA、CA125、SCC的水平与良性病变对照组相比，有所升高，但无统计学意义。这三项没有达到本研究的预期，这可能跟所选取的病例样本不太理想以及所选取的样本数量不足有关。②在肺癌患者淋巴结转移与否的分组观察中，本研究结果发现：有淋巴结转移组其HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1水平高于无淋巴结转移组，差异有统计学意义（P＜0.05），而CA125、SCC两项检测结果在两组比较中无显著差异（P＞0.05）。结果提示肺癌患者血清HE4、NSE、CEA、CYFRA21-1的进一步升高可能预示预后不良。③通过ROC曲线以及AUC分析：当 HE4的AUC为0.780、NSE的AUC为0.755、CYFRA21-1的AUC为0.795，并且当HE4的截断值为109.6 pmol/L、NSE的截断值为51.3 pmol/L、CYFRA2l-1的截断值为23.75 ng/mL时提示有肺癌淋巴结转移，具有最佳预测价值。而CEA、CA125、SCC三项由于在0.5＜AUC＜0.7，所以在淋巴结转移预测诊断中价值不高。④本研究发现，采用HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六个项目联合检测观察肺癌诊断的敏感性、准确性和阴性预测值，与各单项检测相比，其差异有统计学意义（P＜0.05），但在特异性和阳性预测值的观察中，与单项检测进行比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。由此可见，采用HE4与NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六个肿瘤标志物联合检测，在临床上可以提高肺癌的诊断率，有一定的推广应用价值。

综上所述，采用HE4、NSE、CEA、CA125、SCC、CYFRA21-1六项联合检测对肺癌诊断具有重要意义，同时在判定是否有淋巴结转移时也具有一定的评估和应用价值。由于本研究收集病例数有限，在今后的研究中，将继续扩大临床病例数，进一步做相关问题的分析。