新生儿溶血病患儿的实验结果及相关因素分析

蔡大凤，荣成智，秦 雪△，谭彬宾，刘 云，欧贵勇

1.广西医科大学第一附属医院，广西南宁 530021；2.广西壮族自治区妇幼保健院，广西南宁 530003

新生儿溶血病(HDN)临床主要表现为不同程度的黄疸、水肿、肝脾大，严重时可造成核黄疸并损害中枢神经系统，甚至导致死亡[1]，“二孩”发生HDN的风险会相应增高[2]，但是目前还没有令人满意的方法来预测HDN的发病。因此，本研究回顾性分析了HDN的疑似临床实验室检测结果及其相关危险因素，旨在为HDN的早期诊断和治疗提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2017年1月至2019年8月广西医科大学第一附属医院收治的369例疑似HDN的患儿纳入研究。患儿血型为A型或B型，其母亲血型为O型；患儿日龄(4.99±2.60)d，平均体重(3 000.75±545.84)g。

1.2仪器与试剂 包括ABO/RhD正反定型血型定型试剂卡(强生医疗器材有限公司)、抗人球蛋白(IgG,C3b/C3d)微柱凝胶检测卡(强生医疗器材有限公司)，A1、B、O标准细胞(长春博德生物技术有限责任公司)、BioVue孵育器和离心机、ORTHO AutoVue Innova全自动血型及配血分析系统(美国强生公司)、数显恒温水浴锅、日立7600全自动生化分析仪。

1.3方法 分别对上述患儿的溶血3项(包括直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验、红细胞释放试验)、总胆红素及心肌酶等进行检测；记录患儿日龄、体重，母亲的孕周及怀孕次数等相关临床资料。采用微柱凝胶卡式法对患儿及其母亲进行ABO血型和Rh(D)血型鉴定以及新生儿溶血3项的检测，严格按《临床输血检验实验操作规程》操作。所有试剂均在有效期内使用。

1.3结果判读 红细胞释放试验阳性则确诊为HDN；溶血3项试验中3项均为阴性则不能确诊HDN；红细胞释放试验阴性，但其他两项中有一项或两项是阳性则判断为可疑[3]。

2 结 果

2.1HDN检出率情况 确诊为ABO血型不合的新生儿溶血病(ABO-HDN)的病例占48.24%(178/369)，ABO-HDN可疑病例占10.57%(39/369)，阴性占41.19%(152/369)。确诊ABO-HDN病例的溶血三项试验阳性率：直接抗人球蛋白试验24.16%、血清游离抗体试验76.40%、红细胞释放试验100.00%。

2.2ABO-HDN检出率在性别和血型分布上的比较 在性别分布上，男性阳性率为48.00%，女性阳性率为48.52%，两者比较差异无统计学意义(P>0.05)；血型分布上，A型血阳性率为48.00%，B型血阳性率为48.40%，两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 HDN检出率在性别和血型上的比较(n)

2.3ABO-HDN检出率与患儿年龄、体重以及母亲孕周、怀孕次数的关系 按新生儿日龄、体重以及母亲孕周、怀孕次数分组并比较ABO-HDN检出率的差异，见表2。

表2 HDN检出率与患儿年龄、体重、母亲孕周及其怀孕次数的关系

2.4ABO-HDN确诊组、可疑组、阴性组血清检测项目的比较 将ABO-HDN组的血清检测项目[总胆红素、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LD)和α-羟丁酸脱氢酶(α-HBD)]与可疑组、阴性组进行比较，结果显示：ABO-HDN组的CK和α-HBD水平均高于阴性组，差异均有统计学意义(P<0.05)；ABO-HDN组的总胆红素和LD水平与阴性组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)；ABO-HDN组的总胆红素、CK、LD和α-HBD水平与可疑组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 阳性组与可疑组和阴性组间血清检测结果比较

3 讨 论

HDN是由于母婴血型不合引起的同种免疫反应，HDN主要发生于ABO血型系统，其次为Rh血型系统，同时近年来也有相关研究报道MNS系统、Kidd血型系统等也可引起HDN[4]。ABO-HDN主要发生于O型血母亲所生的非O型血小孩。O型母亲体内的抗-A、抗-B主要为IgG类抗体，可以通过胎盘结合胎儿的A抗原或者B抗原从而导致溶血的发生。在本研究纳入的369例疑似患儿中，确诊ABO-HDN的占48.24%，检出率较高，与相关研究一致[5-6]。目前，临床上常用新生儿溶血三项试验来诊断ABO-HDN。直接抗人球蛋白试验用来检测新生儿体内红细胞是否被其母亲的IgG类抗体致敏；血清游离抗体试验主要是用于检测新生儿血浆中是否有IgG类抗体的存在；但是直接抗人球蛋白试验和血清游离抗体试验均易受到红细胞水平和红细胞上抗原的结构和数量的影响，这也是其在ABO-HDN确诊者中阳性率低的原因之一[7]；因此，直接抗人球蛋白试验和血清游离抗体试验单独阳性不能用来诊断ABO-HDN[8]。红细胞释放试验由于采用了间接检测方法，使其具有很高的灵敏度和特异度，作为新生儿溶血三项中最重要的试验，其阳性即可确诊ABO-HDN[9]。本研究纳入的疑似患儿中，直接抗人球蛋白试验阳性率为24.16%，血清游离抗体试验阳性率为76.40%，红细胞释放试验阳性率为100%。

在纳入研究的男性和女性疑似患儿中，ABO-HDN的检出率分别为48.00%、48.52%，两者比较差异无统计学意义(P>0.05)，说明HDN在男女中均有相同的发病概率。在血型分析中，有学者发现A型血的患儿相对于B型血更加容易发生ABO-HDN，认为新生儿红细胞上的A型抗原决定簇多，更加容易结合IgG抗体[10]；但是也有研究认为ABO-HDN的发病率与血型不相关[11]。本次分析中A型血疑似患儿的确诊率为48.00%，B型血疑似患儿为48.40%，两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。所以，文献[10]报道的现象可能并不具备普遍的指导意义，可能是纳入研究人群的选择性偏倚有关。

在新生儿日龄、体重、孕周及母亲怀孕次数与ABO-HDN检出率的关系研究中，日龄≤4 d新生儿中ABO-HDN的检出率高于日龄>4 d的新生儿。这说明，新生儿早期行溶血三项检查对HDN的灵敏度更高；因为，随着时间的延长致敏红细胞的水平会不断地降低，早期检测才能降低漏检率[7]。在出生体重与ABO-HDN检出率的关系研究中，体重>3 000 g的新生儿检出率高于体重≤3 000 g的患儿。根据张伟等[12]的研究，新生儿出生体重过高过低均会对新生儿发育造成一定的影响。笔者分析，可能体重>3 000 g的患儿由于血型抗原发育比体重≤3 000 g的患儿要完善，来自母亲的同种抗体更易结合到胎儿的红细胞上而致敏，更易被检测出来，从而有较高的检出率，但是具体的机制仍需进一步研究。早产儿(孕周<37周)与足月儿(孕周≥37周)的ABO-HDN检出率相当；早产儿各个系统的发育相比较于足月儿落后，但并没有更易并发ABO-HDN的表现[13]。有报道显示，孕妇为第二次或者多次怀孕时，ABO-HDN的发生风险就会升高[14]。本研究中，母亲怀孕次数≥2次的疑似患儿中，ABO-HDN检出率略高于母亲怀孕次数为1次的疑似患儿，但是两者差异无统计学意义(P>0.05)。考虑可能受到了其他因素如日龄不统一的影响，导致部分患儿未能检出。

ABO-HDN是新生儿高胆红素血症主要危险因素之一，约占10.2%[15]。研究认为，胆红素可作为ABO-HDN的辅助诊断指标，因为HDN患儿与同期正常出生婴儿胆红素水平比较是有差异的[16]。本研究中，ABO-HDN组与可疑组、阴性组的胆红素水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，主要是因为本研究纳入的人群均为因胆红素水平过高和母婴血型不合而疑似ABO-HDN的患儿。新生儿肝脏中分解胆红素的代谢途径发育不成熟，高胆红素血症容易在新生儿时期诱发胆红素脑病，同时高水平的胆红素还可以可以造成心、脑、肝等器官受损[17]，所以临床表现为高胆红素血症的患儿应立即进行治疗并尽早进行排除ABO-HDN的相关检测，以免错过最佳治疗时期。在心肌酶的各项指标中，ABO-HDN组的CK和α-HBD水平均高于阴性组，提示ABO-HDN患儿更易发生心肌受损。

综上所述，HDN检出率与患儿日龄和体重密切相关；尽早对可疑患儿进行新生儿溶血检测，可以有效地提高ABO-HDN患儿的检出率；对于母亲怀孕次数≥2次及O型血母亲所生的非O型血的新生儿，应做好ABO-HDN早期预防，减少ABO-HDN造成的影响，提高新生儿的生存质量。最后，ABO-HDN患儿存在心肌酶谱(CK和α-HBD)改变，提示ABO-HDN患儿可能存在心肌受损，应密切监测，建议临床将其与新生儿溶血三项同时进行检测。