核酸检测法应用于血液标本内乙肝病毒检测结果分析

马巧琴

【摘  要】目的：研究分析核酸检测法对血液标本内乙肝病毒的检测效果。方法：对210777份无偿献血的样本给予核酸检测、酶联免疫吸附试验，分析两种方法筛查乙肝的效果。结果：比较窗口期，结果核酸检测法短于酶联免疫吸附法（p<0.05）;核酸检测法灵敏性、特异性更优，且不合格率更低，与酶联免疫吸附法检测结果具有显著差异（p<0.05）。结论：相比于酶联免疫吸附法而言，核酸检测法具有更好的灵敏性、特异性，且窗口期比较短，不合格率低，值得临床将其作为篩查血液标本内乙肝病毒的首选。

【关键词】核酸检测法;血液标本;乙肝病毒

【中图分类号】R446.11      【文献标识码】A      【文章编号】672-3783（2020）08-0269-01

酶联免疫吸附法是临床检测乙肝病毒的常用方法，主要通过检测血清对乙肝感染情况进行筛查[1]。而核酸检测法操作更加简单，检测结果更加可靠，近些年来，在临床血液筛查过程中得到了广泛的应用[2]。鉴于此，本文特此以210777份血液标本为例，着重对比探讨了核酸检测法与酶联免疫吸附法的检测效果，以供临床参考。

1.一般资料与方法

1.1一般资料

本次研究之中的观察主体为无偿献血血液标本，总共210777份，均为本市中心血站于2017年01月--2019年12月接收。通过HBs-Ag快速试纸法以及ALT化学法检测，均为初筛合格的样本。每份血液样本留取2管，利用核酸检测法、酶联免疫吸附法进行乙肝感染筛查。各试管贴上条形码，要求与血袋标签一致，便于读取每份血液样本的具体信息。通过离心机对血液样本进行离心操作，然后放置于4℃环境下，并在48h完成血液检查。

1.2方法

仪器与试剂：酶联免疫吸附法需要抗凝真空管、全自动酶联免疫分析仪器、全自动加样仪器，试剂盒由上海科华提供，为HBV血清学标志物试剂盒;核酸检测法需要分离胶抗凝真空管理、全自动混样提取仪器、核酸检测系统、核酸扩增检测仪器、离心机;试剂盒由上海科华提供，包括丙型肝炎病毒表面抗原试剂盒、乙肝病毒试剂盒、I型免疫缺陷病毒核酸检验试剂盒（实时荧光定量PCR系统）。所有试剂盒均在有效期内。利用酶免试剂检测乙肝两对半。

根据卫计委提出的要求，结合《献血者健康要求》，对所有的血液样本进行初检以及复检。酶联免疫吸附法：不同检验人员应用不同试剂、仪器分别检测HBs-Ag项目。本市中心血站关于HBs-Ag项目设置，以0.7作为灰区值，既是指S/CO值低于0.7，则视为无反应，若是S/CO值超过0.7，则视为有反应。双试剂都无反应，则视为合格，双试剂均有反应，则视为不合格，单试剂若是有反应，则待定备查。待定备查的血液标本，利用反应性试剂实施双孔复试操作，如果复试发现两孔都没有反应，则视为合格，若是复试发现有一孔存在反应，则视为不合格。核酸检测法：针对酶免测定合格的血液样本，利用核酸检测系统进行混样检测。单检不合格的血样。结果判定取决于Ct值（各管内荧光信号到达预定阈值之时的循环数），无反应为Ct值>45，反之则为有反应。混样检测结果无反应，视为合格，若是混样检测结果有反应，需予以单检，单检无反应视为合格。

1.3统计学分析

汇总并分析观察主体的研究数据，并利用SPSS22.0软件对研究数据进行统计。百分比资料以[例（%）]描述，行卡方检验;计量资料以（均数±标准差）描述，行t检验。当P值低于0.05时，说明存在较高的检验价值。

2.结果

2.1窗口期对比

核酸检测法窗口期（20.5±4.5）d短于酶联免疫吸附法窗口期（35.3±6.9）d（t=17.028，p<0.05）。

2.2两种不同检测方法的灵敏性、特异性、不合格率对比

核酸检测法法灵敏性98.89%（208435/210777）、特异性99.57%（20986/210777）高于酶联免疫吸附试验94.89%（20001/210777）、95.56%（201409/210777），而不合格率0.08%（163/210777）低于酶联免疫吸附试验1.30%（2744/210777）（X2=77.524/68.530/12.047，p<0.05）。

3.讨论

乙肝传播主要以血液为载体[3]。在我国，乙肝发病率极高，对无偿献血者进行乙肝筛查，确保临床输液治疗安全，具有十分重大的意义，而且检测无偿献血血液样本内乙肝病毒，还有利于临床降低乙肝感染风险，抑制乙肝传播。酶联免疫吸附法是临床中一种比较常用的检测方法，在乙肝病毒检测过程中比较多见，是临床进行血液样本筛查的重要手段[4]。随着现代医学技术快速发展，核酸检测法近些年来在临床血液筛查过程中不断得到了广泛的应用，此种检测方法操作简单，检测结果可靠，同时还可以对酶联免疫吸附检测法进行有效补充[5]。

本文对照发现，核酸检测法灵敏性、特异性更高，而窗口期以及不合格例数更少，与酶联免疫吸附检测法差异显著（p<0.05）。核酸检验法所获得的窗口期，只有酶联免疫吸附检验法的1/2。经过酶联免疫吸附检验法进行测定之后，表现为阳性结果的血液样本，核酸检测结果却成为阴性，这有可能是因为乙型肝炎患者血液中残留HBs-Ag所致;而经过酶联免疫吸附检验法进行测定之后，表现为阴性结果的血液样本，核酸检测结果却成为阳性，有可能是与患者处于乙肝病毒感染初期有关。

总而言之，核酸检测结果灵敏性、特异性更高，漏诊少、检测结果可靠，值得引起临床重视。

参考文献

[1] 谢月娜，潘彤，刘军.天津市HBV-DNA单独反应性献血者标本检测结果分析[J].中国输血杂志，2019，32（11）：1159-1162.

[2] 黄永梅.核酸检测法检测血液标本内乙肝病毒的价值分析[J].中国现代药物应用，2019，13（13）：33-35.

[3] 朱丽敏.核酸检测法和酶联免疫吸附法在检测血液标本内乙肝病毒的价值对比[J].齐齐哈尔医学院学报，2019，40（04）：454-455.

[4] 裴宝芹，夏兵.核酸检测HBV-DNA在乙肝检测中的作用分析[J].中国冶金工业医学杂志，2019，36（01）：109-110.

[5] 苏俊，骆冬云.核酸检测与酶联免疫吸附检测在无偿献血血液标本乙肝病毒筛查中的应用价值比较[J].中国乡村医药，2015，22（16）：58-59.