复方玉芩胶囊中橙皮苷薄层色谱方法改进

张金花 刘洪奕

摘 要 目的：改进复方玉芩胶囊中橙皮苷的薄层层析鉴别方法。方法：对橙皮苷鉴别中供试品溶液的制备、展开剂及展开条件进行了改进。结果：改进后的方法能清晰地检测到样品中的橙皮苷特征斑点，分离度好，无干扰。结论：改进的薄层层析鉴别方法操作简便、安全、专属性强，符合质量控制要求，可用于复方玉芩胶囊的薄层层析鉴别。

关键词 复方玉芩胶囊 橙皮苷 薄层层析

中图分类号：R286； R927.11 文献标志码：A 文章编号：1006-1533（2020）15-0094-03

Study on TLC identification of hesperidin in Fufangyuqin capsule

ZHANG Jinhua*， LIU Hongyi**

（Department of Pharmacy， Ruijin Hospital affiliated to School of Medicine， Shanghai Jiao Tong University， Shanghai 200001， China）

ABSTRACT Objective： To improve a method for the identification of hesperidin in Fufangyuqin capsule by thin layer chromatography. Methods： The preparation of test solution and the developing agent and conditions were improved. Results： The characteristic spots of hesperidin in the sample could be clearly detected by the improved method with good resolution and no interference. Conclusion： This method is simple and safe， has strong specificity， can meet the quality control requirements and be used as a new method for the thin-layer identification of hesperidin in Fufangyuqin capsule.

KEY WORDS Fufangyuqin capsule； hesperidin； thin-layer chromatography

復方玉芩胶囊由柴胡、青皮（麸炒）、三七、苍术（麸炒）、明帆、女贞子（制）、败酱草、淡豆豉以上八味药材组成，主要用于疏肝消脂，清热化积，行气活血以及用于非酒精性脂肪肝患者的肝内脂肪浸润、血脂升高等。其中橙皮苷为青皮的主要成分之一，现行复方玉芩胶囊质量标准中（《中国药典》2015年版四部通则0502）橙皮苷的薄层鉴别中的展开剂使用了有毒化学品甲苯，对检测人员的身体以及环境会造成危害，需要改进。为了有效准确地对复方玉芩胶囊进行质量控制的同时减少对检测人员的伤害以及环境的污染，本研究对复方玉芩胶囊中橙皮苷鉴别的展开剂进行了改进，不使用甲苯，最后得到斑点清晰，分离度好的薄层色谱图，且对阴性样品无干扰，为有效控制该制剂的质量提供了依据[1-4]。

1 材料和方法

1.1 仪器与试药

5510E-MTH超声波清洗仪（必能倍有限公司）；N-1001S-WD旋转蒸发仪（贝朗医疗有限公司）；BSA3202S-CW电子天平（赛多利斯科学仪器有限公司）；双槽展开缸（上海信宜仪器厂有限公司）；硅胶G薄层板（福山生化试剂厂）；ZF-2型三用紫外仪（上海市安亭电子仪器厂）。

橙皮苷对照品（批号110721-201115，纯度95.30%，中国药品生物制品检定所）；其他试剂均为分析纯，水为纯化水。

复方玉芩胶囊（批号20150102、20160402、20170501，规格为0.3 g/粒，上海方心制药科技有限公司）。

1.2 方法

1.2.1 供试品溶液的制备

取本品（批号20150102）的内容物1 g，加甲醇20 ml溶解。将原方法加热回流20 min改为超声提取20min，然后滤过，滤液浓缩至2 ml，作为供试品溶液。

1.2.2 对照品溶液的制备

另取橙皮苷对照品，加甲醇制成饱和溶液，作为对照品溶液。

1.2.3 薄层层析

按照《中国药典》2015年版四部通则0502薄层色谱法操作[5]，改进的方法将展开剂改为醋酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1.5）。

2 结果

2.1 两种方法薄层层析结果比较

两种方法在与对照品色谱相应的位置上，供试品均能显示相同颜色的荧光斑点（图1）。

2.2 方法学考察

2.2.1 专属性考察

供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显示相同颜色的荧光斑点，而阴性样品在与对照品色谱相应的位置上不显示相同颜色的荧光斑点，说明该方法专属性好，且对阴性样品无干扰（图2）。

2.2.2 耐用性考察

1）不同湿度考察 取点样后的薄层板，分别放置于湿度32%和72%的展开缸中展开，结果显示，改进后的方法能使供试品在不同相对湿度环境下有较好的分离度，说明该方法对湿度的改变有较好的适应性（图3）。

2）不同溫度考察 将点样后的薄层板分别放置于冰箱（0～4 ℃）和室温（25 ℃）下展开，结果显示，改进后的方法能使供试品在不同温度下有较好的分离度，说明该方法对温度的改变有较好的适用性（图4）。

3）不同点样量考察 分别取相同批号供试品5、10、15 ml点样，置于展开缸中展开，结果显示，改进后的方法能使不同点样量的供试品有较好的分离度，说明该方法适用于点样量的变化（图5）。

2.2.3 重复性考察

取三批不同批次复方玉芩胶囊，制备供试品溶液，进行薄层层析。结果显示，在与对照品色谱相应的位置上，均显示橙皮苷的特征斑点，且对阴性样品无干扰。表明此方法的重复性良好（图6）。

上述结果表明，改进的新方法能够用于复方玉芩胶囊中橙皮苷薄层色谱的鉴别，分离度好，斑点清晰，且经过了方法学验证。

3 讨论

本制剂为医院复方制剂，通过多次试验筛选出了供试品溶液制备方法和薄层色谱展开条件；原标准供试品溶液的制备需要甲醇加热回流，得到的供试品溶液点样薄层层析后得到的图谱分离度较差，斑点不清晰；而本研究建立的方法通过超声提取制备供试品溶液，比加热回流简单方便，易于操作。

本研究考察了五种展开剂，分别为氯仿-丙酮-甲醇（5∶1∶1）、醋酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1.5）、醋酸乙酯-丁酮-甲酸-水（10∶6∶2∶1）、氯仿-甲醇-水（7∶2∶1）、环己烷-醋酸乙酯-冰醋酸（4∶1∶0.1）[6-8]，发现其中以醋酸乙酯-甲醇-水（10∶2∶1.5）为展开剂时展开效果最好，分离度好且斑点清晰。相比于原标准方法中的展开剂，改进后的展开剂无甲苯，减少了对操作人员的伤害及对环境无污染，展开条件简单，易于操作[9-10]，有一定的实用性，可为复方玉芩胶囊的质量控制提供参考。

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