MP-DNA 检测对儿童EB 病毒相关传染性单核细胞增多症患者是否合并肺炎支原体感染的诊断价值分析

王丽琼

（杭州市儿童医院 浙江 杭州 310014）

传染性单核细胞增多症（Infectious Mononucleosis,IM）是常见于儿童的主要由EB 病毒（EBV）病毒感染诱导的淋巴细胞增生性的急性感染性疾病，是以侵犯淋巴系统为主的急性感染性疾病，血液中可出现大量异常形态淋巴细胞。典型临床表现有发热、咽峡炎、淋巴结肿大、肝脾肿大及皮疹，部分不典型患儿可仅表现其中几项，部分患儿有肝功能损伤[1]。肺炎支原体（Mycoplasma pneumoniae，MP）是儿童呼吸道感染最常见的病原之一[2]。近年来有文献报道，两种病原体的感染率有逐渐增加的趋势，常存在混合性感染[3-4]。因EBV 和MP 感染后可导致多脏器损伤，临床表现多样，目前实验室检测是诊断两者混合感染及鉴别的重要参考。既往报道中对判断IM 患儿是否合并MP 混合感染多以MP 抗体检测为依据，但笔者在工作中发现近年来IM 患儿中MP 抗体阳性检出率较高，单纯以MP 抗体检测结果作为参考依据可能导致混合感染误诊及过度治疗。本研究旨在探讨MP-PCR 检测在儿童EB 病毒相关IM 患儿中的临床应用，比较IM 患儿的MP抗体检测与MP-DNA 检测结果，以期为IM 患儿的混合感染状态的判断及为抗感染方案的合理制定提供一定的参考。

1.资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析我院2019 年1—12 月收治的112 例EB 病毒相关IM 的患儿临床资料。其中男67 例，女57 例；年龄1 ～11 岁（中位数5.5 岁）。

1.2 纳入标准

符合EB 相关性IM 的诊断标准：（1）具备下列临床表现中的3 项以上：①发热，②咽扁桃体炎，③颈淋巴结肿大，④肝脏肿大，⑤脾脏肿大，眼睑水肿。（2）外周血异型淋巴细胞比例＞0.10 和（或）淋巴细胞增多≥5.0×109/L。（3）下列实验室指标中的任意1 项：①抗EBV-VCA-IgM 和抗EBV—VCAIgG 抗体阳性，且抗EBV-NA—IgG 阴性；②抗EBV-VCA-IgM 阴性，但抗EBV-VCA-IgG 抗体阳性，且为低亲和力抗体；③双份血清抗EBV-VCA-IgG 抗体滴度4 倍以上升高[5]。

1.3 实验室方法

用灭菌棉签采集受试者咽部样本行MP-DNA 检测，采用MPPCR 法，试剂盒选自达安基因检测公司。同时采集患儿静脉全血，常规分离血清后进行肺炎支原体抗体（MP-IgM）测定，采用酶联免疫吸附法，试剂盒为EUROIMMUN，操作方法均严格按照试剂盒说明书进行。

1.4 观察指标

记录MP 抗体、MP-DNA 的检测结果，并对其进行统计学分析。

1.5 统计学方法

数据采用SPSS22.0统计学软件分析处理，计数资料采用率（%）表示，行χ2检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2.结果

EB 病毒相关IM 患儿的MP 抗体检出率较高，为48.21%，MP-DNA 检出率2.68%,两种方法在IM 患者中检出率有显著统计学差异（P＜0.05），见表1。

表1 两种MP 检测方式在IM 患儿中的检出率比较

3.讨论

儿童传染性单核细胞增多症（IM）的临床表现多样，3 ～6 岁年龄儿童是高发人群[6]，临床过程也不尽相同，部分患儿可呈自限性疾病过程，仅需要对症支持治疗，部分患儿可呈进展性疾病过程，甚至进展为嗜血细胞增多症危及生命[7]。EB 病毒是引起IM 的重要病原，但巨细胞病毒、腺病毒、细小病毒及MP 感染亦可诱发IM 样表现。临床治疗的抗感染方案需根据不同病原个体化合理制定，故准确判断病原及是否存在混合感染意义重大。近年来关于EBV 与MP 混合感染的文献报道不断增多，提示混合感染对病情进展的影响[8]。肺炎支原体是儿童呼吸道常见的感染病原体之一，其侵入人体呼吸道后黏附于上皮细胞而造成黏膜上皮细胞破坏，除肺部感染表现外，可出现多器官损害。儿童MP 感染及IM 临床表现多样，因此实验室病原学诊断对于临床治疗起着重要作用。

痰液或咽拭洗液进行MP 培养被认为是MP 感染诊断的“金标准”，但常需要2 ～3 周对临床帮助不大[9]。随着检测手段进步，MP 抗体血清学检测、MP-PCR 检测等方法被广泛应用。现有报道中关于E B V 与M P 混合感染的实验室指标多以M P 抗体检测结果为依据，但由于M P 与人体多种组织细胞膜及某些细菌、其他支原体有相同的糖脂成分,易引起非特异性交叉反应,加上抗体出现的时机易受机体免疫条件、年龄和反复感染等因素的影响不易掌握,可导致M P 感染的过度诊断或漏诊,因此不能仅靠单份血清阳性即确诊M P 感染[10]。在临床工作中观察到I M 患儿常检测到多种病原抗体阳性，可能与患儿免疫状态被激活，产生多种非特异性抗体甚至自身抗体，影响血清学检测有关。本结果显示，在112 例E B 病毒相关I M 的患儿中，54 例M P 抗体阳性，检测阳性率较高。但M PPCR 感染检出率仅2.68%，二者具有统计学差异。同时参照李少丽等[10]对M P 检测方法的对比研究，I M 患儿中M P 抗体阳性率明显升高。除上述机体免疫状态、抗体交叉反应等原因外，分析其可能与近年来M P 感染率升高，M P 感染后抗体在体内持续存在有一定关系。另结合临床治疗转归，对于MP-IgM 阳性但MP-DNA 阴性IM 患儿，予单纯抗病毒或者对症治疗临床症状亦好转，提示对I M 患儿如将M P 抗体检测作为单一标准来判断是否存在混合感染，可能导致阳性率过高造成过度治疗。M P-P C R 检测方法特异性、灵敏度较高，可作为判断I M患儿是否混合MP 感染的参考依据。

综上所述，临床上对于传染性细胞增多症是否存在混合肺炎支原体感染可根据支原体抗体检测联合肺炎支原体PCR 检测结果，同时结合临床表现综合判断，以合理制定抗感染治疗方案。