气相色谱法测定樟木中樟脑的含量△

刘娜郝美玲（.呼和浩特市食品药品检验所呼和浩特00020；2.内蒙古自治区药品检验研究院呼和浩特00020）

樟木为樟科植物樟的木材。［原植物］樟Cinnamomum camphora（L.）Presl［Laurus camphora L.］又名乌樟（陶弘景）、香樟（南方各省份通称）、小叶樟（湖南）、傜人柴（广西）。常绿大乔木，高可达30 m。树皮灰黄褐色，纵裂。枝、叶及木材均有樟脑气味。蒙医传统以其木材入药。目前该药材的樟脑含量标准尚未建立，因此，采用气相色谱法对樟木的成分樟脑含量进行测定，为建立樟木的质量标准奠定基础。

1 仪器与试药

1.1 仪器：岛津GC-2014C气相色谱仪（日本）；柱子：聚乙二醇20000（PEC-20M）为固定相、涂布浓度为10%的毛细管柱。AL204型、MSE3.6P-CE型电子天平，挥发油测定器。

1.2 试剂试药：樟脑对照品（中国食品药品检定研究院，批号：110747-201008），乙酸乙酯为分析纯。樟木[（四川成都荷花池，批号：150501、150502、150503、150504）；越南（150901、150906、150914）]。

2 方法与结果

2.1 色谱条件的选择：进样口温度：190℃；载气（氮气）流量：1 mL/min；分流比为 20∶1；检测器温度：220 ℃；柱温：起始温度 80 ℃，停留9 min，升温速率40℃/min，最终温度180℃，停留3 min；理论板数：按樟脑峰计算应不低于2 000。

2.2 溶液的制备

2.2.1 对照品溶液的制备：精密称取樟脑对照品3.028 mg，置10 mL量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，即得。

2.2.2 供试品溶液的制备：精密称取樟木（已粉碎过二号筛）31.2501 g，照挥发油测定法（《中国药典》2015年版四部通则2204）测定。挥发油过无水硫酸钠置5 mL量瓶中（挥发油为0.2 mL以下时溶解到2 mL量瓶中），再用乙酸乙酯洗涤并定容至刻度，即得。

2.2.3 阴性溶液的制备：取乙酸乙酯分析纯。

2.3 专属性考察：分别精密吸取上述樟脑对照品溶液、供试品溶液、空白溶剂各1 μL注入气相色谱仪测定（色谱图见图1、图2、图3），结果显示，相同的保留时间处，供试品溶液与对照品溶液具有相同的色谱峰，而阴性溶液此处无色谱峰出现，表明阴性对照品无干扰，专属性良好。

2.4 线性关系考察：精密吸取3.625 mg樟脑置25 mL的量瓶中，加乙酸乙酯溶解并稀释至刻度，作为对照品溶液。精密吸取对照品溶液 0.2、0.5、1、1.5、2.0、2.5、3、4.0、5.0 μL 注入气相色谱仪，记录峰面积，与进样量做线性回归。以浓度为横坐标X，峰面积为纵坐标Y，建立标准曲线方程。线性回归方程为y=536598x－810.81（r=0.9994），结果表明樟脑在0.029～0.725 mg/mL范围内呈良好的线性关系。

2.5 精密度试验：分别精密吸取“2.2.2”项下的供试品溶液1 μL，注入气相色谱仪测定峰面积，测得的平均面积值为96708.3，RSD=1.77%，结果显示精密度试验良好。

2.6 稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，分别在放置0 h、2 h、4 h、6 h、8 h、10 h、12 h、14 h 进样 1 μL 记录峰面积，RSD=0.75%。结果显示，该成分在供试品溶液中24 h稳定。

2.7 重复性试验：取同一批样品按供试品溶液制备方法制备6份样品溶液，进样1 μL测定峰面积，计算含量。结果显示，该供试品中樟脑平均含量为0.0276%，RSD为0.32%，表明重复性良好。

2.8 回收率试验：取同一批已知含量的样品6份，每份取16 g，精密称定，分别精密加入樟脑对照品适量，按供试品溶液制备方法制备样品溶液，分别注入气相色谱仪测定含量。结果显示平均加样回收率98.48%，RSD为0.82%，表明准确度良好。见表1。

表1 回收率试验结果

3 样品含量测定

取7个批次的樟木按“2.2.2供试品溶液的制备”方法制备溶液，按“2.1”项下方法测定，记录色谱图，计算樟脑的含量，结果见表2。

4 讨论

4.1 前处理条件的考察：在提取溶剂的选择上主要考虑了乙酸乙酯和环己烷，提取方法首先用了超声提取，提取溶液经过浓缩，进入气相色谱仪测定，有效成分含量很低。考虑到本实验的所测成分主要存在于挥发油中，在浓缩环节会损失挥发油，后改为用挥发油测定器提取，乙酸乙酯的极性大于环己烷且微溶于水，所以采用环己烷作为提取溶剂。

4.2 色谱条件的考察：本实验在其他色谱条件不变的情况下，分别改变进样口温度（190℃改为200℃）、柱温（初始温度80℃改为100 ℃）、分流比（20∶1改为 25∶1），测得RSD 为 1.24%。由此可见小的色谱因素变化对含量测定影响较小，方法可行有效。

4.3 样品性状的考察：通过对7个样品的含量测定结果和性状对比分析发现，药材粗壮、生长年限较长的含量较高。

表2 样品含量测定结果