酿酒酵母对制取杜梨种子的影响

何子顺，张虎平

（1 湖北省老河口市农业技术推广中心，湖北 老河口441800；2 南京农业大学园艺学院，南京210095）

杜梨（Pyrus betulifolia Bunge）为蔷薇科梨属落叶乔木，通常作栽培品种梨的砧木。杜梨育苗主要采用种子繁殖，目前制取杜梨种子的主要方法是堆沤水选法[1]。但这种方法存在多项缺点：所需时间长，一般需7～10 d；堆积期间因发酵温度升高，如翻动不及时，温度可达到50 ℃以上，造成种子失去生活力，严重影响杜梨种子的质量； 由于杜梨果实中含有较多的糖类和果胶物质，不易清除干净而常混入种子中，影响种子纯度。有关利用酵母对杜梨果肉进行酵解的研究较少，本试验利用酿酒酵母对杜梨果肉进行发酵，同时加入适量的水，以期缩短杜梨制种时间，降低高温对种子伤害的风险，得到较纯净的优质杜梨种子。

1 材料与方法

1.1 试验材料

2016年11月至2017年2月开展本试验，试验用杜梨果实采自新疆库尔勒市哈拉玉宫乡巴格吉格代村的杜梨防风林，树龄10年生，果实充分成熟。发酵材料为酿酒酵母（安琪酵母股份有限公司生产）及生活用白糖，试验用器械包括透明塑料桶（5 L）、烧杯、电子天平、温度计、20 目筛子、水桶、冰箱等。

1.2 试验方法

酿酒酵母的活化和接种 用电子天平准确称取酿酒酵母4.0 g，倒入烧杯中，再向烧杯内加入8%白砂糖溶液80.0 mL，搅拌均匀，放置30 min 后即得酿酒酵母活化液[2]。称取杜梨果实4 kg，装入5 L 塑料桶内，向塑料桶内加入自来水0.67 kg，再将酵母活化液倒入桶内，充分搅拌后相对密封，要求外面空气不能进入桶中，但桶内的气压高于外界气压时桶内气体能够缓慢逸出。设2个对照：一是用等量的杜梨和水混合后装入5 L塑料桶内，不加酿酒酵母；二是用等量的杜梨堆放沤制，堆放在瓷盘内，厚度10 cm，不加酿酒酵母和水。酿酒酵母处理和对照均放在30 ℃的环境下。以1 桶（盘）为小区，3 次重复。

制取杜梨种子 处理和对照的杜梨果肉失去粘性后，倒入水桶充分搅拌，用自来水冲洗，用20 目筛子将杜梨种子过滤出来，再用清水冲洗3 次，清除漂浮的秕种子和杂质。杜梨种子经3 d 晾干后称重，计算出种率。从酵母处理和对照中随机选取饱满种子各100 粒，按沙藏层积技术[3]在冰箱内4 ℃条件下进行沙藏层积处理，有10 粒种子的芽长到1 cm 时结束，统计发芽率。以100 粒为小区，3 次重复。

1.3 数据处理

利用Excel 和DPS 数据处理系统（v7.05 版）对试验数据进行处理和分析。

2 结果与分析

2.1 酿酒酵母对发酵进程的影响

酿酒酵母处理和对照1 桶内的杜梨果实没有升温的现象，对照2 有升温现象。酿酒酵母处理的桶内冒气泡剧烈，对照1 的桶内冒气泡缓慢，对照2 未观察到冒气泡现象。酿酒酵母处理的经3 d 时间停止冒气泡，果肉已失去粘性；而对照1 达到上述特征需8 d（表1）；对照2 的果肉失去粘性同样需8 d。酿酒酵母处理能使杜梨果肉发酵时间缩短5 d。杜梨果肉发酵的过程是产生气体的有机化学反应，产生气体的速度能够反映发酵的速度。靠杜梨果实自身携带的菌进行发酵较缓慢，加入酿酒酵母能加速杜梨果实发酵。

表1 不同处理对制取杜梨种子的影响

2.2 酿酒酵母对出种率及种子发芽率的影响

由表1可知，酿酒酵母处理的出种率虽略高于对照，但差异不显著。直观认为，酿酒酵母处理制取的杜梨种子比对照的纯度高； 酿酒酵母处理制取杜梨种子的发芽率也略高于对照，但差异不显著。

3 讨论

当前生产上制取杜梨种子常用的方法是堆沤水洗法，是利用杜梨果实自身携带的菌和空气中的菌进行发酵，发酵过程缓慢，整个过程中还要多次翻堆，以防止发酵产生高温伤害杜梨种子。酿酒酵母对杜梨果肉的发酵有加速的作用，这种加速作用直接表现在产生气体迅速。适量水有介质作用，使酿酒酵母和杜梨果肉充分接触，还能够阻止发酵过程中温度升高。用水量的标准是刚好将杜梨果实浸没，杜梨果实和水的重量比6∶1。适量水作介质，酿酒酵母对杜梨果肉发酵制取种子有多项优点：时间短、不升温、省去翻堆的劳动、提高种子的纯度，且不影响出种率和发芽率，有望能在生产中应用。利用酵母发酵制取杜梨种子，在酵母菌株的筛选、用量、用法、气温等方面，还需进一步研究。