浸润性膀胱癌患者血清高尔基体磷酸化蛋白3和内皮生长因子水平与临床病理特征和术后生存率的关系研究

李 蓉，姜 新，金玉明，王敏捷，陈颖虹

(南部战区海军第一医院泌尿外科，广东 湛江 524005)

膀胱癌为高发病率恶性肿瘤[1]。男性发病率在所有恶性肿瘤中位列第4，女性则位列第7[2]。近年来，膀胱癌的发病率不断升高，越来越受到社会各界的重视。肌层浸润性膀胱癌(MIBC)为膀胱癌的重要类型，具有高复发、易转移的特点[3]。目前，诊断MIBC的指标大多只能对当前肿瘤情况进行判断，并不能有效评估膀胱癌的预后。血管内皮生长因子(VEGF)、高尔基体磷酸化蛋白3(GOLPH3)与肿瘤密切相关[4～6]，但这两种因子的血清水平与MIBC预后的关系的报道较少。本研究对MIBC患者血清中GOLPH3、VEGF进行检测，观察这两种指标水平在不同临床病理特征的差异，并探讨血清GOLPH3、VEGF水平与患者术后生存率的关系，为临床评估MIBC的术后生存率提供依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料2010年4月至2016年9月我院治疗的MIBC患者110例(MIBC组)，纳入标准：移行细胞癌；无其他恶性肿瘤；患者知情同意；膀胱部分切除术+氨甲喋呤、长春新碱、阿霉素和顺铂方案(MVAC)及吉西他滨、顺铂(GC)化疗方案。排除标准：心肺功能不全，多器官衰竭或妊娠。选择同期健康体检者90例为对照组，两组性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 两组一般资料比较

1.2 检测方法MIBC患者于术前采集空腹时的外周静脉血5 ml，健康体检者于体检当日采集空腹时的外周静脉血5 ml，静止放置40 min，然后以1500

rpm，4 ℃，10 min的条件离心，将上层血清转移至新的EP管中，放于-80 ℃冰箱保存。GOLPH3、VEGF以ELISA检测。

1.3 随访MIBC患者出院后随访，每两个月进行一次随访，在随访过程中记录患者是否存活，随访时间为36个月。在随访过程中未出现失访病例。

1.4 统计学方法采用SPSS 22.0软件处理数据。计量资料比较采用t检验；计数资料比较采用χ2检验。血清指标评估术后生存率的准确性采用ROC曲线判断；相关性分析采用Spearman相关分析或Pearson相关分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组GOLPH3、VEGF水平比较MIBC组GOLPH3、VEGF水平高于对照组(P<0.05)，见表2。

表2 两组GOLPH3、VEGF水平比较

2.2 不同临床病理特征的MIBC患者GOLPH3、VEGF水平比较血清GOLPH3、VEGF水平比较，复发者高于初发者，中、高度分化者高于低度分化者，淋巴结转移者高于淋巴结无转移者，肿瘤数量多发者高于单发者，肿瘤直径>3 cm者高于直径≤3 cm者，血管淋巴浸润者高于无血管淋巴浸润者(P<0.05)。见表3。

表3 不同临床病理特征MIBC患者血清GOLPH3、VEGF水平比较

2.3 不同生存情况患者血清GOLPH3、VEGF的ROC曲线随访期间，38例死亡(死亡组)，生存者72例(生存组)，以ROC曲线分析两组术前血清GOLPH3、VEGF水平。术后随访36个月，不同预后患者血VEGF、GOLPH3 ROC曲线下面积分别为0.831、0.806，预测膀胱癌患者预后的最佳临界值为403.67 pg/ml、412.45 ng/L，VEGF预测不同生存情况患者的灵敏度、特异度分别为72.5%、75.0%，GOLPH3预测不同生存情况患者的灵敏度、特异度分别为82.5%、65.0%。见图1、表4。

图1 不同生存情况患者血清GOLPH3、VEGF的ROC曲线 a.VEGF ROC曲线；b.GOLPH3 ROC曲线

表4 不同生存情况患者血清GOLPH3、VEGF的ROC曲线特征

2.4 不同血清GOLPH3、VEGF水平MIBC患者生存率比较以血清VEGF>403.67 pg/ml为临界值，将MIBC患者分成VEGF高水平组(68例)和VEGF低水平组(42例)，VEGF高水平组术后36个月的生存率低于VEGF低水平组(P<0.05)；以血清GOLPH3>412.45 ng/L为临界值，将MIBC患者分成GOLPH3高水平组(57例)和GOLPH3低水平组(53例)，GOLPH3高水平组术后36个月生存率低于GOLPH3低水平组(P<0.05)，见表5。

表5 不同血清GOLPH3、VEGF水平MIBC患者生存率比较

2.5 GOLPH3、VEGF与不同临床病理特征的相关性GOLPH3、VEGF与组织分化程度、初发和复发、淋巴结转移、血管淋巴浸润、肿瘤数量和大小呈正相关(P<0.05)，与性别、年龄和是否存在原位癌无相关性(P>0.05)。见表6。

表6 GOLPH3、VEGF与不同临床病理特征的相关性

3 讨论

膀胱癌的致病机制至今仍未阐明，MIBC易复发、预后差，因此积极探索病因，寻找有效的生物标志物评估预后情况可以促进不良预后膀胱癌患者的个体化治疗[8]。VEGF为糖蛋白，能促进内皮细胞加速增殖，诱导血管新生[9]。在人肿瘤组织中发现VEGF是一种主要的转移因子，与肿瘤淋巴管的形成密切相关，Zhang 等发现膀胱癌中VEGF高表达，且其水平与膀胱癌侵袭、转移正相关[10，11]，故认为VEGF能诱导生成病灶淋巴管，增强其转移能力。人外周血的VEGF主要来源于肿瘤组织，本研究中，MIBC组VEGF高于对照组，淋巴结转移、血管淋巴浸润患者VEGF较无淋巴结转移和无血管淋巴浸润患者，肿瘤数量多及直径大的患者VEGF水平升高，说明膀胱癌肿瘤组织分泌和释放VEGF，可促进病灶血管生成，促进其生长直径，还可促进其浸润、转移。本研究中，复发患者VEGF高于初发患者，在中高度分化的患者中显著高于低度分化的患者，该结果与郑元振[12]的结论一致，提示VEGF可作为诊断膀胱癌并判断其严重程度的辅助指标。术后随访36个月发现，VEGF较最佳临界值低的患者生存率高，且VEGF水平与组织分化程度、初发和复发、淋巴结转移、血管淋巴浸润、肿瘤数量和大小正相关，说明血清VEGF水平可以用来辅助评估膀胱癌患者的术后生存率。

GOLPH3是一种高尔基体基质蛋白，最初是在小鼠的高尔基体中发现，主要与蛋白质加工和转运有关[13]。近年来的研究显示，GOLPH3在多种恶性肿瘤组织(如卵巢癌、乳腺癌和黑色素瘤等)中高表达，并且与肿瘤的生物学行为密切相关[14]。GOLPH3基因过表达可以使肿瘤细胞体积增加，缩短细胞周期，GOLPH3基因敲除以后可以减小肿瘤细胞体积，加快细胞周期，提示肿瘤细胞增殖分化与GOLPH3关系密切[15]，分析其机制可能和受体酪氨酸蛋白激酶信号通路激活有关[16]。GOLPH3与肿瘤的化疗耐药有关，Zhang等[6]使用小鼠模型发现耐药的MIBC组织中GOLPH3表达显著增加，GOLPH3是miR34a的靶基因，miR34a/ GOLPH3轴的表达水平与膀胱癌的预后和复发明显相关。最新的一项临床研究表明膀胱癌患者血清中的GOLPH3明显升高，并且肿瘤组织中GOLPH3水平与病理分级、肿瘤TNM分期和淋巴结转移密切相关，GOLPH3可作为膀胱癌诊断的标志物[5]。本研究中，GOLPH3与组织分化程度、初发和复发、淋巴结转移、血管淋巴浸润、肿瘤数量和大小正相关，提示血清GOLPH3能够辅助诊断膀胱癌并评价其严重程度。术后随访36个月发现，不同预后患者血GOLPH3 ROC曲线下面积为0.806，预测膀胱癌患者预后的最佳临界值为412.45 ng/L，低于临界值水平的患者生存率明显高于高GOLPH3血清水平患者，说明血清GOLPH3水平也可以用来辅助评估膀胱癌患者的术后生存率。

综上所述，血清膀胱癌患者的组织分化程度、初发和复发、淋巴结转移、血管淋巴浸润、肿瘤数量和大小等临床病理特征与GOLPH3、VEGF水平关系密切，通过检测这两种指标的血清水平有助于评估患者的病情状况和术后生存率。本研究的样本量较少，后续研究还应该扩大样本量、延长随访时间再进行验证。