不同激素对双牌虎爪姜快速繁殖的影响

莫志军， 莫凯迪， 邓 洁

(永州职业技术学院， 湖南 永州 425000)

生姜(ZingiberofficinaleRosc.)是姜科(Zingiberaceae)姜属(ZingiberBoehmer)多年生宿根草本植物，是药食两用经济作物，集调味、食品加工和药用为一体的多用蔬菜[1-2]。由于利用地下块茎无性繁殖，每667 m2需要种姜200～300 kg，用种量大，繁殖系数低[3-4]。连年留种造成病毒、病菌累集严重，造成产量降低，一般造成减产30%～50%[5]。为了提高生姜的繁殖系数，弄清激素对双牌虎爪姜快速繁殖的影响，进行了不同激素配方的试验[6-7]。

1 材料与方法

1.1 材 料

材料来自双牌虎爪姜原产地湖南省永州市双牌县上梧江乡。

1.2 试 剂

N 6培养基大量元素为：硝酸钾2 830 mg·L-1，硫酸铵463 mg·L-1，硫酸镁185 mg·L-1，磷酸二氢钾400 mg·L-1，氯化钙166 mg·L-1。N 6培养基微量元素为：硫酸锰4.4 mg·L-1，硫酸锌1.5 mg·L-1，碘化钾0.8 mg·L-1，硼酸1.6 mg·L-1。

N 6培养基有机物为：肌醇100 mg·L-1，甘氨酸2.0 mg·L-1，烟酸0.5 mg·L-1，盐酸吡哆醇0.5 mg·L-1，盐酸硫胺素0.1 mg·L-1。

铁盐：硫酸亚铁27.8 mg·L-1，乙二胺四乙酸钠37.3 mg·L-1。

激素：6-BA(6-苄基氨基嘌呤)、NAA(萘乙酸)、KT(激动素)和氯化胆碱。

其他：70%乙醇，新洁尔灭，0.1%升汞(HgCl2)，无菌水，琼脂，蔗糖。

1.3 方 法

1.3.1生姜催芽

取生姜洗净，沥干，然后在培养箱内进行暗培养。保持培养箱内湿度75%，温度25 ℃，直至催出芽达到1～2 cm时取用。

1.3.2接种方法

取长1～2 cm的虎爪姜芽在自来水下冲洗2～3 h，然后用0.2%新洁尔灭浸泡10 mim，无菌水冲洗2～3次，在无菌环境中用70%酒精处理30 s，无菌水冲洗2～3次，然后再用0.1%升汞浸泡8 min，用无菌水冲洗5次。剥去生姜芽外叶，留取0.5～1 cm芽尖，移入相应的培养瓶中，每瓶移入3个芽点。每个处理接种21瓶，3次重复。每个处理放到(25±2)℃的培养架上，每天用2 500 lx光照12 h。

1.3.3统计方法

分别在接种后14 d、28 d和42 d统计发芽数，以芽长0.5 cm为芽数计数。不足0.5 cm长的不计数，凡有分化的芽点数除接种点数为分化率，各处理分别分阶段统计总分化芽数。增殖倍数为某阶段的分化芽数减前阶段的芽数(点数)除接种基数(点数)。增殖率为某阶段的增加芽数除接种基数的百分率。

1.3.4不同激素处理

采用N 6培养基，激素分别为6-BA、NAA、氯化胆碱和KT，其配比详见表1。

表1 不同激素处理

2 结果与分析

2.1 不同激素配比对姜芽分化率的影响

从表2看出，接种14 d，A 3处理的双牌虎爪姜每个芽点都有分化，芽分化率最高，达100%。其他几组激素配比姜芽分化都有未分化的芽点，分化率在80%左右。随6-BA浓度的提高，分化率有所提高。培养28 d后观察统计，所有芽点都有分化，分化率都达到100%。随着幼芽的分化，幼根也同步发生。

表2 不同激素配方对姜芽分化率的影响

表3 不同激素配方对姜芽的增殖影响

由于6-BA和NAA均能促进幼芽产生，随着6-BA浓度增加分化更快，氯化胆碱可能促使6-BA的作用发挥得更佳。这与黄菊辉等[8]研究认为6-BA和NAA可促进生姜幼芽发生，且具有相互增益效应是相一致。

2.2 不同激素配方对姜芽增殖的影响

不同的激素配方对双牌虎爪姜芽增殖影响不同，培养14 d以A 3处理配方为最佳，增殖倍数达3.06，比A 1处理增长率高53.97%；比A 2处理增长率高47.62%。比A 4处理增长率高49.21%。

培养28 d后显示A 3处理的配方为最佳，增殖倍数达3.95。但是A 4处理的配方后期增殖很快，增殖倍数达3.41，均超过了A 1和A 2处理配方。培养42 d后A 3处理的总芽数268，增殖倍数4.25，与其他几个处理相比，增殖倍数不明显。比A 2处理只增加10个芽，增殖倍数只增加0.15；比A 1处理配方只增加24个芽，增殖倍数增加0.38；比A 4处理增殖倍数增加0.36。

不管培养多少天，双牌虎爪姜芽的增殖均以A 3处理配方的增殖倍数最多。

这些激素的用量效果与杭玲等[9]用广西靖西县大肉姜试验，李芳等[10]用山东生姜研究，李晓波等[11]的姜芽研究，吴家丽等[12]对白水生姜研究，赵卓等[13]对湖北来凤县的凤头姜研究基本相同，他们使用6-BA浓度在1.5～3.0 mg·L-1之间，NAA浓度在0.1～0.2 mg·L-1之间。本实验添加了氯化胆碱，比只用6-BA和NAA效果更佳。

2.3 不同时段不同激素配方对姜芽分化影响

从表4看出，前14 d姜芽的增殖速度最快，增殖率都超过150%，其中A 3处理的增殖率最高，达206.35%。但是28 d和42 d，所有激素配方的增殖率都低于100%。28 d仍以A 3处理的增殖率最高(88.89%)。42 d A 3处理的增殖率只有30.16%，最低。A 1、A 2处理28 d比14 d也下降了，但42 d又比28 d的增殖率有所提高。A 3、A 4处理增殖率连续下降，28 d比14 d低，42 d又比28 d低。因此，认为培养14 d幼芽增殖率最快，随着培养时间的推移，姜芽分化慢，增殖率降低，但A 3配方的6-BA和NAA的作用越来越小，可能是氯化胆碱使其作用迅速发挥了。A 1、A 2配方由于没有氯化胆碱的诱导，虽然姜芽的增殖率降低了，但培养28 d后再培养14 d又有所增加。NAA和KT的相互作用也是起初很大，后逐渐减弱。

增殖培养可以在培养14 d后转到无激素培养基上培养，利于分蔸种植。为了使姜芽健壮，培养28 d左右为佳。

2.4 不同激素之间的差异比较

培养14 d，A 3处理比A 1、A 2、A 4处理姜芽的增长分别多53.97%、47.62%、49.21%。A 1、A 2、A 4处理之间差异很小。培养28 d后，A 3、A 4处理间的差异变小(仅4.76%)，A 3比A 1、A 2的增长率仍然多30.16%和28.57%。但到了42 d后，A 3比A 1、A 2、A 4姜芽增加缓慢，其他几个处理增长反而比A 3快。这也说明了培养时间以28 d为佳，继续培养虽有所增多，但速度缓慢。这既延长繁殖时间，又不见很好效果。特别是A 3处理配方不要培养太久，以14 d为佳，最多不超过28 d。

从表5看出，在培养14 d，A 1、A 2、A 4三种处理配方差异不大，培养28 d后，A 4分化加快，A 3减慢，两者之间的差异也不大，但与A 1、A 2的差异较大。

表5 不同激素之间的比较

3 小结与讨论

试验结果表明，双牌虎爪姜的姜芽分化以A 3处理(N 6+6-BA 2.5 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1+氯化胆碱200 mg·L-1)配方为增殖最佳培养基配方，双牌虎爪姜芽分化最快，增殖最快，增殖倍数最高。增殖培养时间以14 d为最佳，最多不超过28 d。该试验结果与白水生姜，凤头姜，山东大姜的激素研究基本一致，但其他研究者用的是MS培养基。

6-BA随浓度增加，姜芽分化增多。KT的使用量较大，效果没有6-BA好。6-BA加了氯化胆碱效果更好，更快，但没加氯化胆碱的6-BA的作用慢且持久，这可能是氯化胆碱促进了6-BA和NAA的相互作用，使其诱导双牌虎爪姜芽的分化。至于氯化胆碱的作用机理和浓度有待进一步研究。