规模猪场伪狂犬病gB 与gE 抗体检测综合对比分析

吴双燕 韦玉庆 韦玉姣 苏益琼 余波 秦雪培 施佳露 经孝红

(1，广西鹿寨县动物疫病预防控制中心 545600；2，广西鹿寨县农业执法大队 545600；3，广西鹿寨县寨沙镇水产畜牧兽医站 545603；4，广西鹿寨县畜牧工作站 545600)

猪伪狂犬病（Porcine pseudorabies,PPR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus,PRV）引起的一种急性传染病[1]，我国将其列为二类动物传染性疾病。猪感染该病后临床症状因感染日龄不同而表现各异：妊娠母猪表现为流产，产死胎、木乃伊胎；初生仔猪具有明显的神经症状，并呈现急性致死性经过；育肥猪出现呼吸道症状，生长不良，并长期带毒和排毒；公猪精液质量下降[2]，本病给养殖业造成严重的经济损失。

为了了解鹿寨县规模猪场猪伪狂犬病病毒（PRV）免疫抗体水平及野毒感染情况，有效控制规模猪场的伪狂犬病，2019年笔者对采自鹿寨县平山镇、中渡镇、鹿寨镇、寨沙镇、导江乡5 个乡镇的21 个规模化养殖场共计992 份血清样品进行了PRV gB、PRV gE 抗体检测综合对比分析，以期为鹿寨县制定猪伪狂病的防控计划和措施提供数据支持。对农民持续稳定增收、现代农业发展、社会主义新农村建设和全面小康目标的实现具有极其重要的战略意义。

1 材料与方法

1.1 血清样品

将流行病学问卷调查结果中免疫过猪伪狂犬病基因缺失苗的规模场群作为采样群体。根据采样策略，随机采集鹿寨县5个乡镇（平山镇、中渡镇、鹿寨镇、寨沙镇、导江乡）、不同生长阶段（母猪、保育猪、仔猪）的21 个规模化猪场的血清样本，共计采集到猪血清样本992 份。

1.2 检测方法

检测过程严格按照猪伪狂犬病gB 抗体检测试剂盒及猪伪狂犬病毒gE 糖蛋白阻断ELISA 抗体检测试剂盒的说明书进行，检测猪伪狂犬病的gB 及gE 抗体。

1.3 检测试剂

西班牙海博莱生物大药厂gB/gE 抗体ELISA 检测试剂盒。

2 检测结果与分析

2.1 鹿寨县南北地区不同猪场猪伪狂犬病gB、gE 抗体检测结果

根据地理位置分布，对鹿寨县南部跟北部地区的血清进行统计检测分析，结果如下表1 所示，经检测，南北地区血清样品PRV gB 抗体阳性率为47.7%，PRV gE 抗体阳性率为9.4%。平山镇无伪狂犬野毒感染的猪场共计2 家，占采样比25% （2/8）；中渡镇无伪狂犬野毒感染的猪场共计3 家，占采样比75%（3/4）；导江乡无伪狂犬野毒感染的猪场共计5 家，占采样比71.43% （5/7）。平山镇有伪狂犬野毒感染的猪场共计6 家，占采样比75% （6/8）；中渡镇有伪狂犬野毒感染的猪场共计1 家，占采样比25% （1/4）；导江乡有伪狂犬野毒感染的猪场共计2家，占采样比28.57% （2/7）。猪伪狂犬病病毒在鹿寨县南北地区都有所流行，在北部地区平山镇流行范围广，流行率高。

2.2 鹿寨县不同规模猪场猪伪狂犬病gB、gE 抗体检测结果

根据养殖规模大小，对鹿寨县不同规模养殖场的血清进行统计检测分析，结果如下表2 所示，PRV gB 抗体阳性率最高的为大型猪场86.46%，其次到中型猪场37.72%，最低的为小型猪场36%；PRV gE 抗体阳性率最高的为小型猪场14.84%，其次到中型猪场6.38%，最低为大型猪场3.13%。不同规模猪场PRV gB 抗体阳性率与PRV gE 抗体阳性率呈负相关。

2.3 鹿寨县不同生长阶段猪伪狂犬病gB、gE 抗体检测结果

根据生长阶段不同，对送检的血清结果按照母猪、育肥猪、仔猪分别进行统计分析，结果如下表3 所示，PRV gB 抗体阳性率最高的为母猪96.2%，其次为育肥猪33.33%，最低的为仔猪32.3%；PRV gE 抗体阳性率最高的为母猪24.57%，其次为仔猪6.15%，最低的为育肥猪0.35%。育肥猪、仔猪PRV gB、PRV gE 抗体阳性率的相关性与不同规模猪场PRVgB、PRVgE 抗体阳性率的相关性相似。

表1 南北地区不同猪场PRV gB、gE 抗体检测结果

表3 不同生长阶段猪伪狂犬病gB、gE 抗体检测结果

3 分析与讨论

本次调查分析所用的猪血清样品采自鹿寨县21 个猪场，各猪场均进行了PRV 基因缺失苗的免疫。当猪接种了缺失gE糖蛋白的基因缺失苗后，将产生缺少gE 糖蛋白的抗体；由于PRV 野毒携带gE 基因，且无论活疫苗接种还是野毒感染都有机会刺激机体产生gB 抗体。因此，采用猪伪狂犬病毒gEELISA 抗体检测试剂盒可以鉴别猪群的野毒感染情况。在PRV gE 抗体水平为阴性的基础上，通过PRV gB 抗体水平能知道该场的疫苗免疫效果。

PRV gB、PRV gE 抗体血清学检测结果综合对比表明，鹿寨县南北地区存在伪狂犬野毒感染情况，尤以平山镇规模猪场伪狂犬病野毒感染比例较高，防控形势严峻。这可能与平山镇的养殖密度、养殖模式、生猪流通情况息息相关。而导江乡的对比检测结果显示，导江乡规模猪场的PRV 阴性场较多，PRV gB 抗体水平较高，疫苗免疫效果普遍要高于其他乡镇。分析其原因有以下两点：一是得益于导江乡的天然地理位置，导江乡境内有柳江河阻隔，各猪场间隔较远，山川河流的天然屏障等有利外界环境对整个导江乡PRV 的整体流行起到一定的阻隔作用。二是猪伪狂犬疫苗的免疫毒株、免疫程序、免疫剂量、采样时机、生猪流通等因素也会影响当地PRV 的流行态势。

大型猪场gB 抗体阳性率最高为86.46%，gE 抗体阳性率最低为3.13%；而小型猪场gB 抗体阳性率最低为36%，gE 抗体阳性率最高为14.84%。这与规模猪场的环境管理、养殖模式、养殖理念、人养设备息息相关。大型猪场通常都是规模化生产，在场地建设、生产设备、技术人才引进等方面要远远优于中小型猪场。良好的“人养设备”，对猪群的免疫效果大有不同，猪群抗体水平参差不齐，对疾病流行产生较大影响。而小型猪场由于技术水平，生产条件，养殖观念落后等因素造成PRV 的严重流行态势。

母猪群的gB 抗体阳性率为96.2%、gE 抗体阳性率为24.57%，其两种抗体阳性率都明显高于育肥猪和仔猪。出现这种结果说明母猪群是鹿寨县规模猪场PR 野毒株感染的主要来源，与韩刚猪伪狂犬病流行病学调查[3]、汤海平调查与分析[4]的结果一致。二是说明各个规模猪场都非常重视母猪群的伪狂犬病免疫工作，疫苗免疫效果好。而育肥猪的gB 抗体阳性率稍微高于仔猪gB 抗体阳性率，但随着日龄的增大，育肥猪gE抗体阳性率明显低于仔猪gE 抗体阳性率，这可能与仔猪受母猪母源抗体影响较大有关[5-7]。由此可以看出，母猪群及后备猪群的野毒清除情况是决定该场PR 净化的首要关键点；母猪群的伪狂犬病免疫工作也是整个猪场伪狂犬病免疫的重中之重。

4 建议

猪伪狂犬病仍是危害目前规模化猪场的重要传染病。虽然目前养殖户的免疫意识较高，但通过此次研究明显可以看出，鹿寨县各乡镇规模猪场的免疫水平参差不齐，该病在鹿寨县一定范围内流行，根除的压力偏大。因此，提出以下建议。

（1）良好的生物安全是前提，做好猪场和外界的隔离，出入场人员、车辆的消毒、场内灭鼠工作、慎重定点引入种猪等工作。

（2）合理制定种猪高效免疫计划，每半年进行一次疫苗抗体水平检测，对疫苗抗体水平低下的个体或滴度参差不齐的群体予以加强免疫或普免。在免疫前后给猪群饮水或饲料中添加免疫促进剂，以促进猪群的免疫应答；添加适量的电解多维等营养性药物，以提高猪群抗应激能力。

（3）果断淘汰病猪。对有繁殖障碍的母猪全部进行检测，留作种用的仔猪在100 日龄左右检测，育肥猪不定期进行抽检。通过检测掌握猪群野毒感染状况，坚决淘汰野毒感染阳性猪。