结核性腹膜炎腹水LDH、ADA和T-SPOT检测及其诊断价值

梁小朋，胡锦兴，林兆源，蔡智群，吴碧彤，冯永忠，韩建芳

广州市胸科医院结核内科、呼吸疾病国家重点实验室，广东 广州 510095

结核性腹膜炎是一种由结核杆菌引起的腹膜慢性、弥漫性炎症，患者的感染可能是由腹腔内的结核杆菌直接蔓延而来，也可能是由于血行散播而来，前者较为常见，如肠结核、输卵管结核等均可能是本病的直接原发病灶[1-2]。目前，结核性腹膜炎多以中青年较为常见，并且女性患者略多于男性[3]。结核性腹膜炎患者常伴有腹痛、腹水以及盆腔包块等，因此结核性腹膜炎的早期诊断对提高患者生存质量有着重要意义[4]。本研究旨在探讨乳酸脱氢酶(LDH)、腺苷脱氢酶(ADA)以及T细胞斑点试验(T-SPOT)联合检测在结核性腹膜炎患者早期诊断中的临床价值，现将结果报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析广州市胸科医院2013年6月至2018年6月间收治的66 例结核性腹膜炎患者的实验室检测结果和临床治疗情况，所有患者均行腹水LDH、ADA 以及T-SPOT 检测。纳入标准：(1)均经获取腹膜组织并经病理学诊断确诊为结核性腹膜炎；(2)入院时伴有乏力、纳差、腹痛、腹胀等症状；(3)X 射线显示全腹密度增高，肠黏连、钙化淋巴结或肠梗阻等；(4)排除合并其他免疫系统疾病以及血液系统疾病。66 例患者中男性32 例，女性34 例；年龄18～71 岁，平均(48.3±6.9)岁。本研究经医院医学伦理委员会批准。

1.2 观察指标与检测方法 (1)观察所有患者LDH、ADA 水平变化及T 细胞斑点试验(T-SPOT)结果，采用受试者工作特征曲线(ROC)对各指标单独检测和联合检测的预测结局进行评价；(2)比较各检测指标单独及联合检测的诊断结果。腹水T-SPOT阳性评定采用英国结核感染T细胞检测试剂盒(免疫斑点法)进行检测，首先FicollPaque法采用水平温控离心机分离单个核细胞，通过洗涤与计数、孵育过夜、洗板与显色，最后斑点计数及结果判读；腹水ADA 评定采用德国乳酸脱氢酶检测试剂盒，应用cobas 8000 e 801全自动化学分析仪，以腹水为标本进行ADA 定量检测；腹水LDH 测定采用迈克生物股份有限公司腺苷脱氨酶测定试剂盒(过氧化物酶法)，应用cobas 8000 e 801全自动化学分析仪，以腹水为标本进行LDH 定量检测。

1.3 评价标准 (1)腹水T-SPOT 结果判定[5]：根据抗原A或/和抗原B孔的反应判断结果：阴性对照孔点数为0～5。阳性样本=抗原A或抗原B斑点数-阴性对照孔斑点数大于或等于6。当阴性对照孔斑点数大于等于6，阳性样本=抗原A或抗原B斑点数大于或等于2倍的阴性对照孔斑点数。如果上述标准不符合且阳性质控对照孔正常时检测结果为阴性。(2)腹水ADA 评定[6]：以腹水ADA＞40 U/L 为阳性。(3)腹水LDH评定[7]：以腹水LDH＞200 U/L为阳性。

1.4 统计学方法 应用SPSS18.0 统计软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验，采用ROC 曲线评价各指标对结核性腹膜炎的诊断价值，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 腹水LDH、ADA及T-SPOT诊断结核性腹膜炎的ROC曲线 采用ROC曲线对各指标单独检测和联合检测预测结局进行评价，结果显示，LDH+ADA+T-SPOT的预测曲线下面积最大，达0.944，见图1。

图1 腹水LDH、腹水ADA及T-SPOT诊断结核性腹膜炎的ROC曲线

2.2 各检测指标单独及联合检测对结核性腹膜炎的诊断效能比较 LDH+ADA+T-SPOT联合检测诊断结核性腹膜炎的灵敏度、特异度、准确度、阳性预测值及阴性预测值明显高于三项指标单一检测，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表1。

表1 各检测指标单独及联合检测的诊断效能比较(%)

3 讨论

结核性腹膜炎是由结核菌引起的一种慢性弥漫性腹膜感染，可由肠结核、肠系膜淋巴结结核、输卵管结核直接蔓延或其他原发结核感染灶内的结核菌随淋巴、血行播散而来[8]。目前，结核性腹膜炎发病率约占全身结核病的5%，且患者可发病于任何年龄，发病隐匿，缺乏特异性临床表现是导致诊断困难的重要原因[9]。目前，临床仍采用细胞学检测和病理检测相结合对结核性腹膜炎进行诊断。但由于操作复杂、诊断时间长、费用高，临床中常达不到预期效果[10-12]。

结核病作为T 淋巴细胞介导的疾病，T 淋巴细胞介导产生的ADA 不断进入腹腔，因此，在患者腹水中ADA含量较高。本研究结果显示，单独腹水ROC曲线临界值明显低于设定的临界值，这与国内研究显示结核性腹膜炎患者腹水中ADA 值明显高于恶性水肿患者腹水中ADA值结果一致[13-14]。本研究以40 U/L为临界值，因此结核性腹膜炎诊断的敏感性为88.48%，特异性为86.38%，造成了临床诊断中具有一定的局限性。LDH作为一种鉴定腹水渗出液或漏出液的酶，若患者腹水LDH值大于200 U/L，腹水值与血液LDH比值高于0.6，则为渗出液[15]。

T-SPOT即结合感染干扰素释放试验，是在结合分歧杆菌感染后形成了具有独特“记忆”的T淋巴细胞，将具有“记忆”的T淋巴细胞分离培养后获得新的T淋巴细胞，然后采用相应的特异性抗原进行刺激，使该T淋巴细胞的“记忆”被激活，分泌干扰素。检测干扰素含量判断是否有具有“记忆”的T淋巴细胞形成，从而推断出是否具有结核感染[16]。由于T-SPOT 检测不能区分活动性、陈旧性结核以及结核潜伏感染，因此对患者单独行T-SPOT 检测临床意义不大，而联合检测有助于提高单一T-SPOT检测的敏感性和特异性。本研究显示，腹水LDH、ADA 联合T-SPOT 检测灵敏度、特异度及准确度均明显高于单一腹水ADA、LDH 及T-SPOT检测。

综上所述，腹水ADA、LDH 及T-SPOT 联合检测对结核性腹膜炎的诊断价值较高，值得在临床诊断中推广应用。