食管鳞癌患者外周血T淋巴细胞亚群及红细胞免疫状态的变化研究

祝春燕 许起荣

【摘要】 目的：探討食管鳞癌患者外周血T淋巴细胞亚群以及红细胞免疫状态的变化，以期为临床诊疗和决策提供参考。方法：以本院2015年4月-2019年12月收治的100例食管鳞癌患者作为观察组，并选取同期在本院体检科体检的100例健康人作为对照组。检测并比较观察组和对照组、观察组术前和术后14 d、观察组术前不同病理分期患者的T淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+）和红细胞免疫相关指标[红细胞膜C3b受体花环形成率（RBC-C3bRR）、红细胞膜吸附免疫复合物花环形成率（RBC-ICR）、体循环免疫复合物花环形成率（CIC）]水平。结果：观察组患者术前CD3+、CD4+均低于对照组，而CD8+水平高于对照组（P<0.05）;与术前相比，观察组患者术后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明显升高，CD8+水平明显降低（P<0.05）。观察组患者术前RBC-C3bRR低于对照组，而RBC-ICR和CIC水平均高于对照组（P<0.05）;与术前相比，观察组患者术后14 d的RBC-C3bRR水平明显升高，RBC-ICR和CIC水平均明显降低（P<0.05）。食管鳞癌Ⅲ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鳞癌Ⅱ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期（P<0.05）。食管鳞癌Ⅲ期患者RBC-C3bRR低于Ⅱ期和Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鳞癌患者Ⅱ期RBC-C3bRR低于Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅰ期（P<0.05）。结论：食管鳞癌患者免疫功能下降，且下降趋势与病情严重程度相关，红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群检测可作为临床辅助诊断的一项重要免疫学参考依据。

【关键词】 食管鳞癌 T淋巴细胞亚群 红细胞免疫

[Abstract] Objective： To investigate the changes of T lymphocyte subsets and erythrocyte immune status in peripheral blood of patients with esophageal squamous cell carcinoma， so as to provide reference for clinical diagnosis， treatment and decision-making. Method： A total of 100 patients with esophageal squamous cell carcinoma admitted to our hospital from April 2015 to December 2019 were taken as the observation group， and 100 healthy people who underwent physical examination in the physical examination department of our hospital during the same period were selected as the control group. T lymphocyte subsets （CD3+， CD4+， CD8+） and erythrocyte immune related indexes （RBC-C3bRR， RBC-ICR， CIC） were detected and compared between the observation group and the control group， the observation group before and 14 d after operation， and the observation group with different pathological stages before operation. Result： The levels of CD3+， CD4+ in the observation group were lower than those in the control group， while the levels of CD8+ in the observation group was higher than that in the control group （P<0.05）; compared with before operation， the levels of CD3+ and CD4+ in peripheral blood of the observation group were significantly increased， while the level of CD8+ was significantly decreased 14 d after operation （P<0.05）. The preoperative RBC-C3bRR of the observation group was lower than that of the control group， while the levels of RBC-ICR and CIC of the observation group were higher than those of the control group （P<0.05）; compared with before operation， the level of RBC-C3bRR in the observation group was significantly higher， and the levels of RBC-ICR and CIC were significantly lower 14 d after operation （P<0.05）. The levels of CD3+ and CD4+ in stage Ⅲ were lower than those in stage Ⅱ and Ⅰ， and the level of CD8+ was higher than those in stage Ⅱ and Ⅰ （P<0.05）; the levels of CD3+ and CD4+ in stage Ⅱ were lower than those in stage Ⅰ， and the level of CD8+ was higher than that in stage Ⅰ （P<0.05）. RBC-C3bRR in stage Ⅲ was lower than those in stage Ⅱ and Ⅰ， while RBC-ICR and CIC were higher than those in stage Ⅱ and Ⅰ （P<0.05）; RBC-C3bRR in stage Ⅱ was lower than that in stage Ⅰ， while RBC-ICR and CIC were higher than those in stage Ⅰ （P<0.05）. Conclusion： Immune function decreased in patients with esophageal squamous cell carcinoma， and the decrease trend was related to the severity of the disease， the detection of erythrocyte immune function and T lymphocyte subsets can be used as an important immunological reference for clinical auxiliary diagnosis in patients with esophageal squamous cell carcinoma.

[Key words] Esophageal squamous cell carcinoma T lymphocyte subsets Erythrocyte immunity

First-author’s address： The First Affiliated Hospital of Nanchang University， Nanchang 330006， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2021.26.012

食管癌的发生与环境、饮食以及遗传等因素密切相关，尽管随着医疗技术的不断进步，临床上对食管癌的治疗在手术、化疗、放疗以及靶向药物使用方面等均有较大的突破，但食管癌的预后仍然相对较差[1]。有研究表明，食管癌已经成为恶性肿瘤中致死率最高的疾病之一，且在世界各地，食管癌的发病率呈不断上升趋势[2-3]。既往有研究证实，细胞免疫与肿瘤的发生发展密切相关，以T淋巴细胞亚群为主要代表的细胞免疫功能的异常不仅仅是肿瘤发生的基础，而且对患者的预后也存在重要的影响意义[4]。随着现代免疫学说的不断深入研究，红细胞免疫被多位学者提出并证实了其在肿瘤免疫中的重要地位。为了进一步探讨食管鳞癌患者的发病机制，为临床治疗和研究提供参考依据，笔者对来本院就诊的食管鳞癌患者的T淋巴细胞水平和红细胞免疫状态进行了检测和对比。现将结果总结报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2015年4月-2019年12月本院收治的100例食管鳞癌患者作为观察组，并选取同期在本院体检科体检的100例健康人作为对照组。观察组纳入标准：首次经病理学检测确诊为食管鳞癌患者;无认知障碍。观察组排除标准：合并其他恶性肿瘤或免疫性疾病;合并感染;正在接受激素类药物或其他影响免疫功能药物。对照组纳入标准：体检无异常状况;无认知障碍。对照组排除标准：近两个月服用过激素类药物或其他免疫调节剂。所有研究对象均自愿参与本研究且签署知情同意书，且该研究经本院医学伦理委员会审核通过。

1.2 方法

1.2.1 手术方法 所有观察组患者均行常规开胸开腹手术方案。患者取左侧卧位后行全身麻醉，于第6肋间作为手术切口，打开胸腔后游离食管，切除肿瘤并对相关淋巴结清扫，清扫结束后将患者转为平卧位，以剑突至脐间为第二切口，行腹部手术。最后以患者的胸骨上做一弧形切口，行颈部吻合术并清扫相关淋巴结。

1.2.2 T淋巴细胞亚群测定 于晨起抽取对照组的空腹静脉血5 mL和观察组术前、术后14 d的空腹静脉血5 mL，离心得上清后用流式细胞仪检测CD3+、CD4+和CD8+。

1.2.3 红细胞免疫功能测定 参照郭峰[5]设计的红细胞免疫功能测定方法以及PEG沉淀法，分别测定对照组和观察组术前、术后14 d的红细胞膜C3b受体花环形成率（RBC-C3bRR）、红细胞膜吸附免疫复合物花环形成率（RBC-ICR）、体循环免疫复合物花环形成率（CIC）水平。

1.3 观察指标 比较对照组和观察组术前的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平;比较观察组术前和术后14 d的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平;比较观察组术前不同分期患者的CD3+、CD4+、CD8+和RBC-C3bRR、RBC-ICR、CIC水平。

1.4 统计学处理 采用SPSS 22.0软件对所得数据进行统计分析，计量资料用（x±s）表示，组间比较采用独立样本t检验，组内比较采用配对t检验;计数资料以率（%）表示，比较采用字2检验。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 观察组，男61例，女39例;年齡39～66岁，平均（47.95±3.97）岁;食管鳞癌病理分期（UICC2009版）：Ⅰ期44例[男28例，女16例，年龄39～66岁，平均（48.32±2.73）岁]，Ⅱ期27例[男16例，女11例，年龄40～66岁，平均（47.82±3.15）岁]，Ⅲ期29例[男17例，女12例，年龄39～66岁，平均（47.57±3.36）岁]。对照组，男58例，女42例，年龄40～66岁，平均（48.03±3.57）岁。对照组与观察组、观察组患者不同分期的年龄、性别比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 对照组和观察组患者术前、术后14 d外周血T淋巴细胞亚群比较 观察组患者术前CD3+、CD4+均低于对照组，而CD8+水平高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;与术前相比，观察组患者术后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明显升高，CD8+水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.3 对照组和观察组患者术前、术后14 d红细胞免疫功能测定比较 观察组患者术前RBC-C3bRR低于对照组，而RBC-ICR和CIC水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;与术前相比，观察组患者术后14 d的RBC-C3bRR水平明显升高，RBC-ICR和CIC水平均明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 食管鳞癌患者术前不同分期T淋巴细胞亚群比较 食管鳞癌Ⅲ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期，差异均有统计学意义（P<0.05）;食管鳞癌Ⅱ期患者CD3+和CD4+水平均低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表3。

3 讨论

食管癌的发病机制尚不十分清楚，但学者们倾向于认为该疾病的发生发展与机体的免疫状态有关，由各种原因导致的患者免疫功能下降或免疫原性被削弱是该疾病发生、恶化的主要原因之一[6-8]。T淋巴细胞是参与机体细胞免疫的重要细胞群，通过各亚群间相互协调、相互制约维持机体正常的免疫功能，当T淋巴细胞亚群的数量、功能发生异常改变时，机体的免疫功能紊乱，进而引发一系列病理变化，导致疾病的发生，比如恶性肿瘤[9-10]。CD3+和CD4+细胞是T淋巴细胞中的重要辅助细胞，它们通过分泌细胞因子来激活CD8+细胞，进而诱导后者产生抗体，杀死靶细胞[11-13]。在本研究中，观察组患者术前CD3+、CD4+均低于对照组，而CD8+水平高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）。说明食管癌患者的免疫功能低于正常人群，在不同病理分期的食管癌患者中，Ⅲ期的CD3+和CD4+水平均低于Ⅱ期和Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05），Ⅱ期的CD3+和CD4+水平低于Ⅰ期，CD8+水平高于Ⅰ期（P<0.05）。可见，随着食管鳞癌的不断加重，患者的CD3+和CD4+水平均呈递减趋势，而CD8+水平呈递增趋势，也就是随着患者病情的加重，其细胞免疫功能进一步受到抑制，机体的抗肿瘤免疫功能也进一步下降。除此之外，笔者同时对食管癌患者术前、术后T淋巴细胞相关亚群进行检测发现，与术前相比，观察组患者术后14 d外周血CD3+、CD4+水平均明显升高，CD8+水平明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。

以往研究认为只有白细胞才参与机体的抗肿瘤免疫功能，80年代以来，有学者提出了红细胞免疫说法[14]。近年来，有关红细胞免疫的研究越来越多，其免疫功能也逐渐得到进一步证实。红细胞免疫机制是通过其免疫黏附功能调控淋巴细胞的活性，同时红细胞也可以促进中性粒细胞的吞噬功能[15-17]。在机体中，红细胞是数量最多的细胞，故其也是不容忽视的免疫细胞。本研究中，笔者对红细胞免疫相关指标研究发现，观察组患者术前RBC-C3bRR低于对照组，而RBC-ICR和CIC水平均高于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;与术前相比，观察组患者术后14 d的RBC-C3bRR水平明显升高，RBC-ICR和CIC水平均明显降低，差异均有统计学意义（P<0.05）。食管鳞癌Ⅲ期患者RBC-C3bRR低于Ⅱ期和Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅱ期和Ⅰ期（P<0.05）;食管鳞癌Ⅱ期患者RBC-C3bRR低于Ⅰ期，而RBC-ICR和CIC水平均高于Ⅰ期（P<0.05）。说明随着食管鳞癌的不断发展，肿瘤细胞释放的抗原物质在进入机体后发生免疫应答，进而产生抗体形成循环免疫复合物。过多的循环免疫复合物与红细胞表面的C3b受体结合，进而导致红细胞的免疫功能受到抑制，丧失清除肿瘤细胞的能力[18-20]。

综上所述，食管鳞癌患者免疫功能下降，且下降趋势与病情严重程度相关，红细胞免疫功能和T淋巴细胞亚群检测可作为临床辅助诊断的一项重要免疫学参考依据。

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（收稿日期：2021-07-19） （本文编辑：张爽）