宜春市茶油几种成分测定

＊王紫薇 孙晓维 吴澎昊 涂明峰 叶文峰*

（1.宜春学院化学与生物工程学院 江西 336000 2.江西百神药业股份有限公司 江西 336000）

油茶系山茶科山茶属，是中国特有的一种优良的多年生木本油料植物。中国已有2000多年的栽培经验，种植面积达5000多亩地。茶油富含不饱和脂肪酸具有抑制肿瘤、降低胆固醇、预防心血管疾病等多种生理功能。山茶油具有特别丰富的营养价值，色泽金黄或浅黄，品质纯净，澄清透明，气味清香，味道纯正，是良好的食用油脂，有“东方橄榄油”“油王”及“长寿油”等美称。茶油还含有维生素E、黄酮类物质、角鲨烯以及其他抗氧化物质，其中黄酮类物质能够有效帮助延缓身体衰老，增强身体免疫力[1-3]。江西宜春市气候和土壤条件都非常适合油茶林基地建设，油茶林地面积居江西省第一，其袁州区具有“中国名特优经济林-油茶之乡”之称[4]，对袁州区茶油进行脂肪酸、黄酮进行测定分析，为宜春市油茶种植提供科学依据，具有重要意义。

1.材料与方法

(1)材料与试剂

不同级别的茶油：精炼油和毛油（宜春市星火提供）三氟化硼甲醇溶液（上海泰坦）；芦丁对照品（上海源叶）；甲醇、氢氧化钾、正己烷、无水乙醇、亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠（均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司）。

(2)仪器与设备

安捷伦5975C+7890气质联用仪（GC-MS）（Agilent公司）；电子天平（AL-104，海梅特勒-托利多仪器公司）；紫外可见分光光度计（N752，上海佑科仪器仪表有限公司）；HWS24型电热恒温水浴锅（上海一恒科学仪器有限公司）。

(3)研究方法

①GC-MS测试

A.茶油的甲酯化[4]

分别称取5种不同品种的油样200mg，放入50mL烧瓶中，加入氢氧化钠-甲醇（0.5mol·L-1）溶液4mL，70℃水浴回流直至油滴消失，大约需10min，用移液管从冷凝器顶部加入三氟化硼-甲醇溶液（质量分数15%）溶液5mL，继续回流3min，加入2mL正己烷，取出烧瓶，立即加入20mL饱和氯化钠溶液，猛烈振摇至少20s，静置分层后弃去水相层，取正己烷层进行GC-MS分析鉴定。

B.脂肪酸测定

采用GC-MS对脂肪酸定性分析，GC对脂肪酸进行定量分析。定量分析采用GB 5009.168-2016第三法归一化法，吸取约60mg试样溶解在4mL异辛烷中，加入200μL氢氧化钾甲醇溶液（2%），通过摇晃混合进行酯交换甲酯化，反应完全后，用约2g硫酸氢钠中和剩余氢氧化钾，取澄清试样上机[6]。

气相条件：氢火焰离子化检测器（FID）；检测条件是进样口温度280℃，柱温100℃保持0.5min，10℃/min升温至250℃，保持20min；进样方式，分流进样，分流比100:1，进样量1μL。

质谱条件：离子源为EI；电离电压：70eV；离子源温度：200℃；质谱范围：50-500Amu；质量范围：30-400Amu；扫描周期：1s。

②黄酮类化合物测定

A.标准曲线的制作

精密称取芦丁0.25g，置50mL容量瓶中，加入50%乙醇，置于水浴上加热溶解，放冷，用50%乙醇稀释至刻度，摇匀。按参考文献[7]进行标准曲线的制作，在500nm下用紫外可见分光光度测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果标准曲线A=0.2595C+0.0724，R2=0.9897。

图1 精炼油脂肪酸的GC-MS图

B.黄酮含量的测定

根据样品中黄酮含量高低，取茶油5mL，用50%乙醇定容到50mL，按A方法进行吸光度测定，并使吸光度在0.3127-1.3887之间，通过下式计算总黄酮含量。

2.结果分析

(1)不同级别茶油脂肪酸组成的分析

对不同级别茶油（毛油和精炼油）脂肪酸组成的GC-MS 测试分析和相对含量的比较结果见图1和表1。

表1 不同级别茶油（毛油和精炼油）脂肪酸的组成与含量

由表1可知，对不同级别茶油（毛油和精炼油）可鉴定出主要脂肪酸组成是棕榈酸、硬脂、酸油、亚油酸和亚麻酸，毛油和精炼各脂肪酸含量差别不是很大，含量大小为：油酸＞亚油酸和棕榈酸＞硬脂酸＞亚麻酸，其中油酸含量最高，为主要脂肪酸，其次为亚油酸和棕榈酸，然后是硬脂酸，含量最低的是亚麻酸。

脂肪酸是茶油构成的主要成分，其性质主要取决于脂肪酸的种类，因此可把脂肪酸组成分析来作为定性鉴别茶油的重要依据。

宜春市产的茶油毛油和精炼油主要脂肪酸组分含量差异不大。精炼后油酸稍增大了一点。

(2)不同级别茶油总黄酮含量分析

分别取茶油毛油和精炼油各5mL，用50%乙醇定容到50mL，取一定量测定其吸光度，按1.3.2.2中的公式计算，得出总黄酮含量，结果见表2。

表2 不同级别茶油总黄酮含量

从表2可知，由于茶油成分复杂，同一产地茶油毛油的总黄酮含量高于精炼油,可能与精炼工艺、生产环境有关以及储存条件、原料的品种等多种因素有关。

3.结论

通过GC-MS分析共鉴定出5种脂肪酸组分：棕榈酸、硬脂、酸油、亚油酸和亚麻酸，毛油和精炼油各脂肪酸含量差别不是很大，含量大小为：油酸＞亚油酸和棕榈酸＞硬脂酸＞亚麻酸，可将山茶籽的含油量和脂肪酸组分的差异作为鉴别其产地的指标结论。通过总黄酮的测定，说明茶油含有酚性物质，具有抗氧化性能。但由于茶油成分复杂，紫外分光光度法测定总黄酮有一定的局限性，还应做进一步的深入研究。