饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能、免疫器官指数和血浆生化指标的影响

从光雷 肖蕴祺 张倩雲 吴 姝 张亮亮 燕 磊 梁明振 施寿荣*

(1.中国农业科学院家禽研究所，扬州 225125；2.中国林业科学研究院林产化学工业研究所，南京 210042；3.山东新希望六和集团有限公司，青岛 266061；4.广西大学动物科学技术学院，南宁 530004)

单宁主要分为水解单宁和缩合单宁两大类，水解单宁是一种多酚类化合物，广泛存在于陆地植物和部分海洋植物中，可细分为棓单宁和鞣花单宁[1]。橡椀单宁属于水解单宁。目前，已发现甜栗木和橡木中提取的单宁(富含棓单宁和鞣花单宁)具有抗氧化、抗菌和抗病毒等多种生物学功能，其应用领域和市场前景广阔[1]。随着畜禽饲料中抗生素的禁用，急需寻找其替代物，从功效以及经济角度来看，单宁能够作为饲料添加剂和抗生素替代物应用于畜禽生产，因此研究其对畜禽生产的影响具有重要意义。Srikhun等[2]研究发现，饲粮添加植物单宁能够增加肉鸡淋巴细胞数量和法氏囊的相对重量，并且能够减轻法氏囊病变程度。Brenes等[3]研究表明，饲粮添加植物单宁能够促进家禽肠道和免疫器官发育。Iqbal等[4]研究发现，饲粮中使用葡萄提取物替代75 mg/kg维生素E，能够提高肉鸡的抗氧化性能和免疫应答，且饲料成本较低，对器官组织也无负面影响。由此可见，水解单宁有多种生物学功能(如增强免疫能力和抗氧化能力)，具备作为家禽饲料添加剂的条件。但因单宁的化学结构复杂，同时提取的来源和添加量均会造成其在动物生产应用中出现不同的效果。因此，本试验旨在研究饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能、免疫器官指数和血浆生化指标的影响，为橡椀单宁在家禽生产中的应用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

试验用爱拔益加(AA)肉鸡购自江苏京海禽业集团有限公司。橡椀单宁(单宁含量≥65%，棕褐色，粉状)由中国林业科学研究院林产业化工研究所植物单宁化学利用课题组提供。

1.2 试验设计

选取1日龄雄性AA肉鸡288羽，随机分为4组，每组6个重复，每个重复12羽公雏。对照组(VT-0组)饲喂基础饲粮，试验组分别在基础饲粮中添加100(VT-1组)、500(VT-2组)和1 000 mg/kg(VT-3组)橡椀单宁。试验期42 d。

1.3 基础饲粮和饲养管理

试验在中国农业科学院家禽研究所仪征试验基地开展，采用网上平养模式，自由采食和饮水，试验初始温度34 ℃，随后每周降低2～3 ℃，直至降至25 ℃。每天24 h光照。通风和免疫等其他管理措施按饲养管理手册执行。饲粮按照NRC(1994)肉鸡营养需求配制并制粒，基础饲粮组成及营养水平见表1。

表1 基础饲粮组成及营养水平(风干基础)

1.4 检测指标

1.4.1 生长性能

21和42日龄，提前禁食4 h，分别称量每个重复的肉鸡体重，记录剩余料重，计算各组肉鸡平均体重和采食量，计算肉鸡体重、平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)和料重比(F/G)。

1.4.2 免疫器官指数

21和42日龄，每个重复随机选取1羽，屠宰解剖后，取出胸腺、脾脏和法氏囊并称其重量，按照以下公式计算免疫器官指数：

免疫器官指数(%)=[免疫器官重量(g)/屠宰前活重(g)]×100。

1.4.3 血浆生化指标

21和42日龄，每个重复随机选取1羽，使用肝素钠抗凝采血管，翅静脉采血，室温静置2 h，3 000 r/min离心10 min，分离得到血浆，-20 ℃冰箱保存待测。

采用UniCel DxC 800 Synchron全自动生化分析仪(Beckman Coulter公司，美国)测定血浆肌酐(CREA)、总胆固醇(T-CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和甘油三酯(TG)含量，试剂盒购自中山标佳生物科技有限公司。

1.5 数据处理与统计分析

试验数据先用Excel 2010进行初步处理，再采用SPSS 24.0软件进行单因素方差分析(one-way ANOVA)以及线性、二次分析，组间采用LSD多重比较检验。结果用平均值和均值标准误(SEM)表示，P<0.05表示显著差异，0.05≤P<0.10表示有趋势。

2 结 果

2.1 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能的影响

由表2可知，饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能无显著影响(P>0.05)。

表2 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能的影响

2.2 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡免疫器官指数的影响

由表3可知，饲粮添加橡椀单宁对21日龄肉鸡免疫器官指数无显著影响(P>0.05)。42日龄时，VT-2组法氏囊指数显著高于VT-0和VT-1组(P<0.05)，且法氏囊指数与橡椀单宁添加量呈显著线性相关(P<0.05)；VT-2组脾脏指数与其他各组相比有提高的趋势(P=0.096)。

表3 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡免疫器官指数的影响

2.3 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆免疫球蛋白含量的影响

由表4可知，VT-2组21和42日龄肉鸡血浆IgG含量显著高于其他各组(P<0.05)，且血浆IgG含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关(P<0.05)。

表4 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆免疫球蛋白含量的影响

2.4 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆生化指标的影响

由表5可知，VT-3组21日龄肉鸡血浆T-CHO和HDL-C含量显著高于其他各组(P<0.05)，且血浆T-CHO含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关(P<0.05)。VT-1和VT-2组42日龄肉鸡血浆CREA含量显著低于VT-0组(P<0.05)，且血浆CREA含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关(P<0.05)。

表5 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆生化指标的影响

3 讨 论

3.1 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能的影响

我国农业农村部于2019年7月发布第194号公告，宣布自2020年7月1日起，饲料生产企业停止生产含有促生长类药物饲料添加剂(中药类除外)的商品饲料。因此，开发天然、绿色、无毒副残留的抗生素替代品刻不容缓。而植物单宁在单胃动物生产中的应用相对较少，人们早期在饲粮中添加高剂量植物单宁或者植物单宁含量高的饲料原料(高粱)，导致单胃动物采食量、蛋白质消化率和生长性能下降等负面影响[5-6]。因此，植物单宁常常被视为是一种抗营养因子。但近年多项研究表明，饲粮添加适量植物单宁具有提高单胃动物生长性能、抗氧化功能和免疫性能等作用，具备作为抗生素替代品的潜力[1,7-8]。本试验研究结果表明，饲粮添加橡椀单宁对肉鸡全期生长性能无显著影响。Brenes等[3]研究表明，饲粮添加0.6、1.8和3.6 g/kg植物单宁对肉鸡生长性能无显著影响。但饲粮添加高剂量植物单宁会对肉鸡生长性能造成负面效应。Chamorro等[9]在饲粮中添加低剂量植物单宁对肉鸡生长性能无显著影响，但饲粮中添加高剂量植物单宁会导致肉鸡饲料转化率和平均日增重降低。Jamroz等[10]研究也发现，饲粮添加250、500 mg/kg植物单宁对41日龄鸡体重和饲料转化率均无显著影响。本试验结果与前人研究结果基本一致，饲粮添加适宜橡椀单宁并不会对肉鸡生长性能造成负面影响，其原因可能是橡椀单宁能够促进消化道的有益菌生长，有利于肠道发育和肠道健康，从而提高机体消化吸收能力[8]。

3.2 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡免疫器官指数的影响

免疫器官是免疫细胞发育、增殖和分化的场所，免疫器官的发育情况以及功能的强弱对禽类的免疫水平起着决定性的作用[11]。禽类的免疫器官主要包括脾脏、胸腺和法氏囊，其相应的免疫器官指数是衡量机体免疫水平的指标之一[12]。胸腺是细胞免疫的中枢器官，法氏囊是禽类特有的体液免疫器官，胸腺指数和法氏囊指数增大，表明机体的免疫机能增强。Srikhun等[2]研究发现，在热应激条件下，肉鸡饲粮中添加植物单宁能够降低法氏囊损伤。本试验研究结果表明，饲粮添加橡椀单宁对21日龄肉鸡免疫器官指数无显著影响，但能够显著提高42日龄肉鸡的法氏囊指数，且法氏囊指数与橡椀单宁添加量呈剂量依赖关系。饲粮添加橡椀单宁也具有提高42日龄肉鸡脾脏指数的趋势。由此可见，饲粮添加橡椀单宁能够促进机体免疫器官发育。

3.3 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆免疫球蛋白含量的影响

免疫球蛋白含量是反映动物机体免疫功能变化的重要标志[13]。IgG的主要作用是介导机体的体液免疫，禽类血清中的IgG具有抗细菌、抗病毒、抗外毒素等多种活性功能[14]。IgA的主要作用是参与黏膜局部免疫，通过与相应病原微生物结合，阻止病原体黏附到细胞表面，在局部抗感染中发挥作用[15]。郝瑞荣等[16]在饲粮中添加100和150 mg/kg植物单宁均显著提高了仔猪血清IgG和IgM含量。另外，Liu等[17]和Ueda等[18]也证实，植物单宁(石榴多酚、石榴皮鞣素和老鹳草鞣质)能显著降低一些病毒的感染。本试验研究发现，饲粮添加500 mg/kg橡椀单宁能显著提高21和42日龄肉鸡血浆IgG含量，且血浆IgG含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关。本试验结果与前人研究结果[19]一致，表明饲粮添加橡椀单宁能够在一定程度上提高肉鸡的免疫球蛋白含量，增强免疫力和抗病力。

综合本试验生长性能、免疫器官指数和血浆免疫球蛋白含量数据，可知饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能未造成显著影响，且能够提高肉鸡血浆IgG含量。因此，橡椀单宁并非是免疫应激导致肉鸡免疫器官快速发育。其原因可能是橡椀单宁能够促进消化道的有益菌生长，抑制致病菌生长[20-22]。有益菌在肠道内大量繁殖，又能够促进有益物质合成，有益物质作为抗原物质促进免疫器官生长发育，提高肉鸡血浆免疫球蛋白含量，从而提高机体免疫力[19,23]。

3.4 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆生化指标的影响

血浆生化指标常用来反映动物体内物质代谢和组织器官机能的变化[24]。T-CHO、TG、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)都与动物的脂类代谢有关[25]，TG、HDL和T-CHO主要是在肝脏中合成。TG是机体内存在最多的脂类。T-CHO是血液中所有脂蛋白所含胆固醇的总和，其与动脉粥样硬化疾病密切相关，动脉粥样硬化又与冠心病有直接关系。HDL具有抗动脉粥样硬化的作用，是减少冠心病患病的物质，并且能有效地抑制LDL的氧化。LDL由极低密度脂蛋白(VLDL)转化而来，含有大量的不饱和脂肪酸，不饱和脂肪酸含量与患心血管疾病呈正相关。本试验发现，在21日龄时，饲粮添加1 000 mg/kg橡椀单宁能够显著提高肉鸡血浆T-CHO和HDL-C含量，且血浆T-CHO含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关。肉鸡血浆T-CHO含量升高可能是通过提高血浆HDL-C含量，从而消除机体多余的TG，来维持肉鸡的机体健康。具体相关机制还有待进一步研究。

在42日龄时，饲粮添加橡椀单宁对肉鸡血浆T-CHO、TG、HDL-C和LDL-C含量均无显著影响，这可能是因为参与脂质代谢的器官和组织发育已经趋于完善。徐晓娟等[26]研究发现，饲粮中添加茶多酚能够降低青脚麻鸡血浆LDL-C、T-CHO和TG含量，能够改善肉鸡脂质代谢功能。Li等[27]研究发现，在肉鸡中添加茶多酚呈剂量依赖方式降低了84日龄血浆T-CHO和LDL-C含量。这与本试验结果并不完全一致，可能是因为试验动物和单宁提取来源等不同所导致的差异，具体原因还需进一步研究。CREA是动物机体肌肉代谢的产物，CREA含量变化主要由肾小球的滤过能力(肾小球滤过率)决定。当肾功能障碍时，CREA在体内蓄积，会对机体造成毒害作用。本试验发现，42日龄时，饲粮添加100和500 mg/kg橡椀单宁能够显著降低肉鸡血浆CREA含量，血浆CREA含量与橡椀单宁添加量呈显著线性和二次相关。结合本试验前期研究结果[8]，发现橡椀单宁能够提高肉鸡血浆过氧化氢酶(CAT)活性和总抗氧化能力(T-AOC)，进而推测橡椀单宁能有效清除自由基，保护细胞膜，使肾脏内过氧化脂质的含量降低，从而减轻了自由基对肾脏实质细胞的损伤，降低了血浆CREA含量。

4 结 论

① 饲粮添加橡椀单宁对肉鸡生长性能无显著影响。

② 饲粮添加500 mg/kg橡椀单宁能够显著提高肉鸡法氏囊指数和血浆IgG含量。

③ 饲粮添加1 000 mg/kg橡椀单宁能够显著提高21日龄肉鸡血浆T-CHO和HDL-C含量，饲粮添加100、500 mg/kg橡椀单宁能够显著降低42日龄肉鸡血浆CREA含量。

④ 综上所述，饲粮添加适量橡椀单宁能够提高肉鸡法氏囊指数和血浆IgG含量，在一定程度上改善血浆生化指标。