MIF、S100β蛋白及SF检测在急性脑出血中的表达及预后

王益 刘万平 何兴林 官念 杨小芳 袁偲旖 彭川 陈倩

近年来，脑血管疾病已成为严重危害人类生命健康的重大疾病之一［1］。急性脑出血作为脑血管疾病中最常见的类型，占急性脑血管疾病的40%以上，具有极高的死亡率及致残率，严重威胁患者生命安全［2］。随着神经生化标志物的研究开展，急性脑出血进展及预后与生化标志物引起广泛关注。S100β 蛋白（S100βprotein，S100β）是钙结合蛋白家族之一，在各种原因所致的脑组织损伤中呈高表达状态，与脑组织损伤情况、脑梗死面积及预后关系密切［3］。巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibition factor，MIF）作为神经损伤重要标志，与炎性反应及免疫应答有关，可激活细胞因子引起泡沫细胞聚集，加速巨噬细胞迁移，刺激血管硬化及斑块形成［4］。而Wang 等［5］发现，血清铁蛋白（serum ferritin，SF）介导的细胞凋亡及氧化损伤在脑部损伤机制中起到十分重要的作用，是加重急性脑出血关键因素之一。本研究就急性脑出血患者MIF、S100β 蛋白及SF 的表达情况及病情、预后的相关性进行分析，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年8月至2018年8月于本院就诊的72 例急性脑出血患者的临床资料作为研究组，纳入标准：①所有患者临床表现及影像学检查确诊，符合中国脑出血诊治指南（2014）诊断标准［6］；②临床资料完整且真实。排除标准：①合并血液疾病者；②严重精神疾患或痴呆等无法配合本研究者；③存在其他原发性恶性肿瘤者。其中男37 例，女35 例，平均年龄（67.71±4.82）岁。根据患者预后情况分为生存组（n=46）及死亡组（n=26）。

选取同期61 例本院进行健康体检者作为对照组，其中男32 例，女29 例，平均年龄（67.75±4.79）岁。两组性别、年龄等一般资料比较差异无统计学意义（P>0.05）。所有研究对象均签署知情同意书，本研究已获得院伦理委员会批准。

1.2 方法

①收集所有患者临床资料，比较研究组及对照组MIF、S100β 蛋白及SF 的表达情况；记录所有患者在出院时预后（存活及死亡）情况。

②对照组于体检当日、研究组于入院24 h 内采用强生Vitros350 全自动干式化学分析仪检测，以酶联免疫吸附法测定S-100β 蛋白及SF，试剂盒由上海江莱食物科技有限公司提供。采用免疫放射分析法测量MIF，试剂盒由美国BioSource 公司提供。检测过程严格按照说明书操作流程进行。

1.3 诊断标准

由本科室两名副主任级别以上医师进行GCS评分［7］：根据患者睁眼、语言、肢体运动等方面进行评分，总分15 分，当患者<9 分时为高，其余均为低。

MIF参考范围：34～48 ng/L，当MIF>48.89 ng/L提示异常升高；S100β 参考范围：0.18～0.22 μg/L，S100β蛋白水平>0.22 μg/L提示异常升高；SF参考范围：138～149 ng/mL，SF>149.08 ng/mL提示异常升高［7］。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件进行统计分析，计数资料以n（%）表示，采用χ2检验，计量资料采用（）表示，行t检验。采用多元Logistic 回归分析影响急性脑出血患者预后死亡的危险因素，采用ROC 曲线分析研究MIF、S100β 蛋白及SF 对患者预后死亡的影响。以P<0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 研究组及对照组MIF、S100β 蛋白及SF 的表达水平比较

研究组患者MIF、S100β 蛋白及SF 水平均明显高于对照组患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表1。

表1 研究组及对照组MIF、S100β 蛋白及SF 的表达水平比较（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in the study group and the control group（±s）

表1 研究组及对照组MIF、S100β 蛋白及SF 的表达水平比较（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in the study group and the control group（±s）

组别研究组对照组t 值P 值72 61 MIF（ng/L）58.42±8.76 41.55±7.34 11.909<0.001 S-100β 蛋白（μg/L）0.98±0.28 0.20±0.02 21.697<0.001 SF（ng/mL）182.34±12.76 143.24±5.84 22.046<0.001

2.2 生存组及死亡组MIF、S100β 蛋白及SF 的表达水平比较

死亡组患者MIF、S100β 蛋白及SF 水平高于生存组患者，差异有统计学意义（P<0.05）。见表2。

表2 生存组及死亡组MIF、S100β 蛋白的表达水平比较（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in survival group and death group（±s）

表2 生存组及死亡组MIF、S100β 蛋白的表达水平比较（±s）Table 1 Compare the expression of MIF，S100 β protein and SF in survival group and death group（±s）

组别生存组死亡组t 值P 值n 46 26 MIF（ng/L）41.72±7.94 61.77±5.41 11.444<0.001 S-100β 蛋白（μg/L）0.51±0.19 1.05±0.21 11.150<0.001 SF（ng/mL）154.33±15.25 189.67±5.43 11.385<0.001

2.3 急性脑出血患者预后死亡的单因素和多因素分析

MIF、S100β 蛋白及SF 异常升高与急性脑出血患者预后死亡相关（P<0.05）。见表3。

表3 影响急性脑出血患者预后死亡的单因素和多因素分析Table 3 univariate and multivariate analysis of prognosis and survival in patients with acute cerebral hemorrhage

2.4 MIF、S100β 蛋白及SF 对急性脑出血患者预后死亡的预测价值

采用ROC 曲线分析MIF、S100β 蛋白及SF 及三者联合对急性脑出血患者预后死亡的预测价值，各指标曲线下面积以联合检测最大0.95，故联合检测的预测价值最佳。见表4、图1。

表4 MIF、S100β 蛋白及SF 对急性脑出血患者预后死亡的预测价值Table 4 the prognostic value of MIF，S100 β protein and SF in patients with acute cerebral hemorrhage

图1 MIF、S100β 蛋白及SF 对急性脑出血患者预后死亡的预测价值Figure 1 The predictive value of MIF，S100 β protein and SF in the prognosis of patients with acute cerebral hemorrhage

3 讨论

目前临床上对于急性脑出血的发病机制尚未明确，相关研究显示，急性脑出血与凝血酶、血红蛋白、炎性因子等血清生化标志物密切相关［8］。

MIF 是临床上第一个发现具有炎性介质的细胞因子，一方面能抑制巨噬细胞从T 细胞激活区向外移动，并激活附近的巨噬细胞增强吞噬作用；另一方面，可抑制炎性细胞活性剂反向调节糖皮质激素达到促炎的目的［9］。研究发现，MIF 与动脉粥样硬化、肾小球肾炎、溃疡性结肠炎、系统性红斑狼疮及肿瘤等疾病密切相关［10］。Dzmitry 等［11］对败血症患者研究显示，在败血症休克时炎症细胞胞浆内MIF 合成加强、聚集增加，与炎症部位炎症细胞的聚集呈现平行相关关系。相关学者［12］对急性呼吸窘迫综合征患者研究发现，MIF 可能通过中性细胞趋化性巨噬细胞炎性因子2 的上调而发挥作用。同时，研究发现，脑出血后，血肿周围脑组织受压、缺血缺氧、受到损伤，大量炎症细胞释放，加上急性脑出血后，患者机体处于应激反应，导致MIF在循环中水平显著上升［13］。本研究结果说明MIF水平与急性脑出血患者预后关系密切。

既往文献发现，S100β 蛋白与中枢神经系统肿瘤或脑血管病密切相关，其峰值浓度与急性脑缺血后的梗死体积呈正相关状态［14］。同时，近年来相关研究表示，S100β 蛋白浓度的变化可作为反映中枢神经系统损害程度及判断预后脑损伤的特异性标志［15］。本文发现，研究组S100β 蛋白明显较正常人群高，且S100β 蛋白异常升高为影响急性脑出血患者预后生存的危险因素。分析其原因与急性脑出血患者出血量大，压迫脑组织，致使血肿周围水肿体积增大，脑组织缺血缺氧加重，大量星形胶质细胞坏死，细胞膜完整性被破坏，S100β 蛋白溢出多，致使血清S100β 蛋白浓度增高有关［15］。

研究指出，铁离子是加重急性脑出血形成的关键因素［16］。SF 是体内铁的主要贮存形式，急性脑损伤时，会产生大量自由基，SF 易受氧攻击从而进入铁蛋白内，将铁蛋白中三价铁还原成二价铁使储存铁释放；还可催化Haber-weiss 反应产生羟自由基及催化脂质过氧化反应，生成丙二醛，破坏血脑屏障，造成脑水肿加重神经损伤［16］。Sorour 等［17］发现，SF 参与脑梗死后的脑组织病理损伤过程，SF 浓度越高，脑梗死体积越大，神经功能缺损评分越高。本研究结果显示，SF 与急性脑出血患者预后关系密切，考虑与急性脑出血患者脑组织细胞受损，使SF水平浓度升高，影响体内代谢能力，导致自我调节能力降低，使铁离子水平异常升高，破坏神经及血管内皮细胞受体，使钙离子三磷酸腺苷酶失活，破坏细胞内稳态，对患者预后造成影响有关。另本研究通过ROC曲线分析显示，MIF、S100β 蛋白及SF 对急性脑出血患者预后死亡的预测价值最佳，进一步提示联合检测三指标可作为预测患者预后死亡的有效手段。

综上所述，MIF、S100β 蛋白及SF 在急性脑出血患者中呈高表达状态，可作为预测急性脑出血患者诊疗及预后的分子标志物。