AECOPD患者呼吸道病毒感染的病原菌及炎症因子检测结果分析

陈伟光，温剑锋

1.深圳市坪山区人民医院内科，广东 深圳 518118；2.佛山市第四人民医院综合内科，广东 佛山 528000

慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)是以持续性气流受限不可逆和肺部异常炎症反应为主要表现的慢性呼吸系统疾病[1]，多种炎症因子在其发生、发展中发挥重要作用。相关报道表明，约30%的急性加重期COPD(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD)患者与呼吸道病毒感染有关[2-3]，呼吸道病毒感染已成为AECOPD患者病情加重的主要诱导因素。本研究对AECOPD合并呼吸道病毒感染患者的病原体状况、炎症因子水平及临床资料进行回顾性分析，旨在为AECOPD合并呼吸道病毒感染患者的临床诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2019年1月至2020年1月在深圳市坪山区人民医院呼吸内科和佛山市第四人民医院综合内科进行住院治疗的400例慢性阻塞性肺疾病急性加重期(AECOPD)患者作为研究对象。本研究经我院伦理委员会审核通过，所有患者均签署知情同意书。纳入标准：(1)符合《慢性阻塞性肺疾病基层诊疗指南(2018年)》[4]中关于COPD的诊治标准，且均处于急性加重期；(2)认知功能良好，具有正常的交流能力，能够积极配合完成相关检查；(3)临床病历资料完整。排除标准：(1)合并严重心、肝、肾功障碍、自身免疫性系统疾病以及恶性肿瘤者；(2)妊娠期、哺乳期妇女；(3)近8周内有抗病毒药物服用史者。

1.2 方法

1.2.1 临床资料收集 采用自制调查问卷调查、采集所有患者的临床资料，具体包括年龄、性别、病程、体质量指数(BMΙ)、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、6 min步行距离(6MWT)、1年内急性加重次数、吸烟、呼吸衰竭、合并高血压、糖尿病和冠心病等内容。

1.2.2 呼吸道病毒感染检测 采用鼻咽拭子采集鼻分泌物标本，标本采集时叮嘱患者自然放松头部，尽可能保持头部稳定，将拭子贴鼻孔壁缓慢旋转进入单侧鼻孔至鼻腭处，停留数秒后挂起分泌物或鼻腔上皮细胞，之后边擦拭边缓慢旋转取出拭子。采用同一拭子以同样方法采集另一侧鼻孔的分泌物标本。标本采集完毕后将拭子放置于采样管内，去除手接触位置的塑料柄，加入2～3 mL病毒采集液(VTM，意大利Copan公司)，浸泡至采集液中旋紧管盖，保存至-80℃冰箱中。将采集好的鼻咽拭子样本通过xTAC®呼吸道病毒快速检测v2(RVP FAST v2)核酸提取试剂盒(批号：192032862)对甲型流感病毒H1/H3、乙型流感A/B、副流感病毒1/2/3/4、呼吸道合胞病毒、鼻病毒、腺病毒、冠状病毒229E/HKU1/NL63/OC43、肠道病毒、偏肺病毒及博卡病毒等18种呼吸道病毒进行检测。

1.2.3 炎症因子检测 所有患者在空腹8 h后于次日清晨采集肘部静脉血5 mL，在室温下以3 000 r/min的速度离心5 min，取上清液对其血沉(ESR)、白细胞计数(WBC)、淋巴细胞计数(LYMPH)进行测定，同时采用酶联免疫吸附法(ELΙSA)对其降钙素原(PCT)、C反应蛋白(CRP)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平进行检测，试剂盒均购至广州华银健康科技有限公司，所有操作均严格按照试剂盒说明书进行。

1.3 统计学方法 应用SPSS19.0统计软件进行数据分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料以均数±标准差(±s)表示，组间比较采用t检验，危险因素采用多因素Logistic回归分析，以P＜0.05为差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 AECOPD合并呼吸道病毒感染患者的病原体状况 400例AECOPD患者中有117例的病原体检测结果呈阳性，呼吸道病毒感染检出率为29.25%，主要病原体包括甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒等，见表1。

表1 AECOPD合并呼吸道病毒感染患者的病原体分布

2.2 两组患者的临床资料比较 按照是否合并呼吸道病毒感染分为阳性组117例和阴性组283例。两组患者在年龄、性别、病程、BMΙ、PaO2、PaCO2、6MWT以及合并高血压和冠心病方面比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；而阳性组患者的1年内急性加重次数明显高于阴性组，吸烟、呼吸衰竭以及合并糖尿病的比例明显大于阴性组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表2。

2.3 两组患者的各项炎症因子水平 两组患者的ESR、WBC和LYMPH水平比较差异均无统计学意义(P＞0.05)；阳性组患者的PCT、CRP及TNF-α水平明显高于阴性组，差异均有统计学意义(P＜0.05)，见表3。

2.4 影响AECOPD患者合并呼吸道病毒感染的因素 多因素Logistic回归分析结果显示，1年内急性加重次数＞2次、呼吸衰竭、合并糖尿病、PCT＞2 ng/mL、CRP＞10 mg/L和TNF-α＞30 pg/mL均是导致AECOPD患者合并呼吸道病毒感染的危险因素(P＜0.05)，见表4。

表2 两组患者的临床资料比较[±s，例(%)]

一般资料年龄(岁)性别(男/女，例)病程(年)BMΙ(kg/m2)PaO2(kPa)PaCO2(kPa)6MWT(m)1年内急性加重次数(次)吸烟呼吸衰竭合并高血压合并糖尿病合并冠心病阳性组(n=117)63.09±6.96 69/48 7.81±1.53 21.23±2.89 10.76±1.88 6.01±1.45 294.58±46.21 2.82±0.57 79(67.52)35(29.91)39(33.33)42(35.90)30(25.64)阴性组(n=283)63.25±7.03 161/122 7.96±1.62 21.49±3.03 11.03±2.09 5.81±1.38 301.71±49.28 2.16±0.34 126(44.52)42(14.84)86(30.39)51(18.02)67(23.67)t/χ2值0.207 7 0.147 3 0.856 0 0.791 2 1.209 5 1.299 0 1.340 1 14.289 0 17.524 2 12.099 6 0.334 1 14.823 9 0.174 2 P值0.835 6 0.701 3 0.392 5 0.429 3 0.227 2 0.194 7 0.181 0 0.000 1 0.000 1 0.000 5 0.563 3 0.000 1 0.676 4

表3 两组患者的各项炎症因子水平比较(±s)

组别阳性组阴性组t值P值病例数117 283 ESR(mm/h)21.36±3.85 21.23±3.71 0.315 3 0.752 7 WBC(×109/L)8.91±2.03 8.85±1.87 0.284 6 0.776 1 CRP(mg/L)21.58±4.36 4.46±1.09 61.655 4 0.000 1 TNF-α(pg/mL)34.28±5.59 10.09±2.37 60.836 9 0.000 1 LYMPH(×109/L)6.81±1.59 6.63±1.47 1.087 5 0.277 5 PCT(ng/mL)6.34±1.79 1.23±0.26 46.921 9 0.000 1

表4 AECOPD患者合并呼吸道病毒感染因素的Logistic回归分析

3 讨论

COPD是一种以气道气流持续受限为主要特征的慢性呼吸系统疾病，呼吸道病毒感染是COPD患者急性加重的主要原因之一[5]。呼吸道病毒感染发生后，COPD患者的可在短时间内由稳定期转变至急性加重期，机体内神经多肽大量分泌，气道平滑肌收缩加剧，血管和黏膜下毛细血管通透性明显增加[6-7]，促使炎症细胞、介质进入气道导致气道上皮细胞坏死，气道狭窄进一步加重，严重时甚至会危及生命。因此，及早明确其病原菌种类和针对性治疗对于延缓AECOPD患者病情进展和改善预后都具有重要意义。

本研究对400例AECOPD患者的鼻分泌物标本进行呼吸道病毒检测，结果发现，400例患者中有117例的病原体检测结果呈阳性，呼吸道病毒感染检出率为29.25%，其中以甲型流感病毒、乙型流感病毒和副流感病毒等最为常见。上述结果提示COPD的急性加重与呼吸道病毒感染相关，尤其是流感病毒，因此在流感流行季节应积极进行预防应对[8]。

AECOPD的主要病理表现为呼吸道炎症损伤和气道重构，多种炎症细胞和细胞因子均参与其中[9]。PCT、CRP均是常见的炎症反应标志物，TNF-α可刺激CRP合成增加，诱导中性粒细胞趋化至炎症反应部位[10]。病毒感染可刺激机体应激水平显著增加，导致AECOPD患者在合并呼吸道病毒感染后体内的各项炎症因子水平急剧上升[11]。本研究结果显示，AECOPD合并呼吸道病毒感染患者的PCT、CRP及TNF-α水平均明显高于未合并呼吸道病毒感染的患者。PCT、CRP、TNF-α等炎症因子水平的异常升高能够在一定程度上提示呼吸道病毒感染的发生[12]。另外，机体各项炎症因子水平升高能够进一步降低AECOPD患者的呼吸功能，造成机体免疫功能失调，对患者的预后造成一定影响[13]。因此，密切监测各炎症因子水平对于AECOPD的临床诊治以及预测呼吸道病毒感染都具有积极意义。

此外，本研究还就合并呼吸道病毒感染和未合并呼吸道病毒感染患者的临床资料进行比较分析，结果显示，合并呼吸道病毒感染患者的1年内急性加重次数明显高于未合并呼吸道病毒感染患者，吸烟、呼吸衰竭及合并糖尿病的比例也明显高于未合并呼吸道病毒感染的患者。多因素Logistic回归分析显示，1年内急性加重次数、呼吸衰竭、合并糖尿病、PCT、CRP和TNF-α均是导致AECOPD患者合并呼吸道病毒感染的危险因素。分析原因：(1)多次急性加重极易损伤气道黏膜、肺血管及肺实质，导致气道和肺血管重塑，肺功能和免疫功能明显降低[14]；(2)呼吸衰竭者需要大量消耗氧气，再加上炎症因子刺激和氧化应激，机体免疫功能发生紊乱，无法有效清除病毒；(3)糖尿病者持续高血糖状态会影响肺泡表面活性物质的合成释放，呼吸功能明显受损[15]；(4)长时间吸烟容易损伤气道上皮细胞，纤毛的摆动清除功能受到影响，病毒清除能力明显下降[16]。

综上所述，AECOPD患者极易并发以流感病毒为主的呼吸道病毒感染，呼吸道病毒感染发生后，PCT、CRP及TNF-α水平等炎症因子水平异常升高。密切监测AECOPD患者的炎症因子水平变化、根据病原菌状况和危险因素有针对性地进行防治，可有效减少AECOPD合并呼吸道病毒感染的发生。