甲状腺乳头状癌患者术前超声造影与淋巴结转移、蛋白酶表达、术后无复发生存的相关性*

陆胜楠 施胜龙 侯剑华 黄春鑫 赵禹喆

1.齐齐哈尔医学院附属第三医院超声科，黑龙江 齐齐哈尔 161099；2.齐齐哈尔医学院附属第二医院超声科，黑龙江 齐齐哈尔 161000 3.齐齐哈尔市中医医院超声科，黑龙江 齐齐哈尔 161099

甲状腺乳头状癌是临床上最常见的甲状腺癌类型，整体恶性程度较低、预后情况较好，但仍有部分甲状腺乳头状癌患者容易早期发生淋巴结转移并影响远期生存率[1,2]。因此，本课题组提出假设：通过CEUS检查能够通过反映甲状腺癌病灶内的微血管分布来评估病情。为了验证这一假设及术前CEUS检查对甲状腺乳头状癌患者病情的评估价值，本研究具体分析了甲状腺乳头状癌患者术前超声造影与淋巴结转移、蛋白酶表达、术后无复发生存的相关性。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2013年2月-2016年8月期间在我院接受手术切除治疗的甲状腺乳头状癌患者作为研究对象，入组标准：①接受甲状腺全切除+颈部淋巴结扩大清扫；②经术后病理诊断为甲状腺乳头状癌；③术前均接受CEUS检查。排除标准：①甲状腺病灶直径<0.5cm；②对造影剂过敏；③既往有其他恶性肿瘤病史。共纳入78例患者，包括男性44例、女性34例，年龄32-63岁、平均43.94±0.64岁，病灶直径0.6-3.2cm、平均1.41±0.18cm。

1.2CEUS检查方法 应用ARIETTA 70彩色超声仪进行CEUS检查，探头频率3-9MHz，造影剂为意大利 Bracco 公司生产的主要成份为磷脂包裹的六氟化硫(SF6)的声诺维(SonoVue)。检查时，患者取平卧位、头后仰、充分暴露颈前区，进行常规超声检查后确定目标结节、选择显示病灶最大径的切面，切换至超声造影模式，将抽取配制好的造影剂混悬液 2.0 ml 经外周静脉团注，随后推注 5.0 ml生理盐水冲管，注入造影剂的同时按下计时键及动态存储键，连续观察病灶灌注60s，观察结节内增强程度以及被膜侵犯情况，计算达峰时间(TTP)和平均通过时间(MTT)[3]。

1.3MMP2、MMP9的免疫组化染色方法 取手术切除的甲状腺癌病灶，制作石蜡切片。结果判读，阳性细胞数<10%、着色较淡为阴性，阳性细胞数≥10%、着色呈棕黄色颗粒者为阳性。

1.4术后无复发生存的随访 手术结束后进行随访，随访截止时间为2018年12月，记录患者无复发生存情况。

1.5统计学方法 采用SPSS21.0软件录入数据，组间计数资料的比较采用卡方检验、计量资料的比较采用t检验，P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1CEUS特征、参数与淋巴结转移的相关性 CEUS的图像如图1所示。CEUS高增强、等增强、低增强患者的淋巴结转移率比较有显著性差异(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的淋巴结转移率比较有显著性差异(P<0.05)。淋巴结转移患者的CEUS参数TTP、MTT均明显低于无淋巴结转移患者，差异有统计学意义(P<0.05)。

图1 甲状腺癌的CEUS图像左图显示病灶内高增强、边界不清、被膜受侵犯；右图显示病灶内低增强、边界清晰、被膜未受侵犯。

2.2超声造影特征、参数与蛋白酶表达的相关性 甲状腺癌病灶内MMP2、MMP9免疫组化染色如图2所示。CEUS高增强、等增强、低增强患者甲状腺癌病灶内MMP2、MMP9的阳性表达率比较有显著性差异(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者甲状腺癌病灶内MMP2、MMP9的阳性表达率比较有显著性差异(P<0.05)。MMP2、MMP9阳性表达患者的CEUS参数TTP、MTT均明显低于MMP2、MMP9阴性表达患者(P<0.05)。

图2 蛋白酶的免疫组化染色图左图为MMP2的免疫组化染色图右图为MMP9的免疫组化染色图。

2.3超声造影特征与术后无复发生存的相关性 CEUS高增强、等增强、低增强患者的术后无复发生存曲线比较有显著性差异(P<0.05)；被膜侵犯、被膜未侵犯患者的术后无复发生存曲线比较有显著性差异(P<0.05)。

3 讨 论

本研究对甲状腺乳头状癌患者CEUS特征与MMP2、MMP9表达的相关性进行了分析，结果如下：CEUS增强信号越强、MMP2及MMP9的阳性表达率越高，被膜受侵犯患者的MMP2及MMP9的阳性表达率高于被膜未受侵犯患者。这一结果提示CEUS特征与MMP2、MMP9的表达存在相关性，MMP2和MMP9的高表达能够增加病灶内血供、促进病灶被膜受侵犯，进一步通过分析MMP2、MMP9表达与CEUS参数的关系可知：MMP2、MMP9阳性表达患者的CEUS参数TTP、MTT均明显低于MMP2、MMP9阴性表达患者。这一结果与CEUS特征与MMP2、MMP9表达相关性的分析结果一致，提示MMP2、MMP9是引起甲状腺乳头状癌患者CEUS特征及参数变化的分子，两者的高表达有利于增加病灶内血供。

综上所述，甲状腺乳头状癌患者术前超声造影与淋巴结转移、蛋白酶表达、术后无复发生存存在相关性，能够用于病情评估。