地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能、血清抗氧化功能和肠道形态的影响

周梦佳，李书伟，张锦秀，邝声耀，刁 慧，张 杰，魏小兰

（四川省畜牧科学研究院，动物遗传育种四川省重点实验室，四川成都 610066）

芽孢菌属能够有效促进动物生长，促进肠道有益微生物的繁殖，维持机体健康的作用[1]。目前，枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、地衣芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus）等芽孢杆菌可作为饲料添加剂应用[2]。地衣芽孢杆因在不利环境下能产生孢子而具有极强的抗逆性，具备在极端条件下可长期储存的特性。相关研究表明，芽孢杆菌产生的消化酶可增加动物肠道中营养物质的消化率，因此饲料中添加地衣芽孢杆菌可提高动物体生长性能[3-5]。在饲粮中补充地衣芽孢杆菌可减轻产气荚膜梭菌引起的肉鸡坏死性肠炎，改善肉鸡肠道形态[6-7]。本试验旨在研究试验饲粮中添加不同剂量的地衣芽孢杆菌对罗氏肉鸡生长性能、血清抗氧化酶清除自由基的能力和肠道健康的影响，探索地衣芽孢杆菌在肉鸡生产中的最优推荐用量，为其进一步推广与应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验菌种 地衣芽孢杆菌H2 菌粉由四川农业大学动物微生态研究中心提供（活菌数分别为1.0×109、2.0×109、4.0×109CFU/mL）。

1.2 试验设计及试验日粮 192 只1 日龄罗氏肉鸡，随机分为4 组，每组4 个重复，空白对照组饲喂基础饲粮，低、中、高剂量组饲喂基础饲粮+0.1% 地衣芽孢杆菌菌粉，地衣芽孢杆菌活菌数分别为1.0×109、2.0×109、4.0×109CFU/mL，试验期42 d。基础饲粮参照NRC（1994）的营养标准配制，基本配方参考王鹤松[8]的日粮设计配制完成，日粮组成及营养成分见表1。

表1 试验饲粮组成及营养成分

1.3 测定指标与方法

1.3.1 生长指标 试验第1 天和第42 天时，统计每个组肉鸡的体重和耗料量，计算肉鸡平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和耗料增重比（F/G）。

1.3.2 血清抗氧化指标 试验结束时，随机从每个重复中选取2 只肉鸡进行翅下静脉采血，3 000 r/min 离心15 min 制备血清样品，-20℃冰箱冷冻分装保存。参照彭豫东等[9]的方法测定肉鸡血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和过氧化氢酶（CAT）活性。试剂盒为南京建成生物工程研究所产品。

1.3.3 肠道形态 试验42 d 时，从每个重复中随机选取2 只肉鸡，剪取回肠中段约1 cm 的肠道组织，用生理盐水小心清洗并置于4%甲醛中进行固定，常温保存。按照常规方法制作回肠肠道组织切片，光学显微镜下观察肠道的绒毛和隐窝形态，利用图像处理系统计算回肠样品的绒毛高度、隐窝深度及绒毛高度和绒毛高度/隐窝深度（V/C）。

1.4 统计分析 地衣芽孢杆菌添加量为单一影响因素，使用SPSS 20.0 软件进行单因素方差分析，P＜0.05 表示显著差异，结果以平均值±标准差表示。

2 结果

2.1 地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响 与空白对照组相比，高剂量组肉鸡的平均日增重提高了2.03%（P＜0.05），低、中、高剂量组肉鸡平均日采食量分别降低了3.04%、2.78% 和3.05%（P＜0.05）。高剂量组F/G 低于空白对照组（P＜0.05）。

表2 地衣芽孢杆菌对肉鸡生长性能的影响

2.2 地衣芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化指标的影响 由表3 可以看出，与空白对照组相比，添加地衣芽孢杆菌组血清GSH-Px 均有所升高，其中中剂量和高剂量组显著高于对照组。血清SOD 含量随地衣芽孢杆菌添加量的增加而呈上升趋势，且低、中、高剂量组显著高于对照组。空白对照组血清MDA 含量略高于其他组（P＞0.05），血清CAT 含量随着地衣芽孢杆菌添加量的增加而上升（P＞0.05）。

表3 地衣芽孢杆菌对肉鸡血清抗氧化指标的影响

2.3 地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道形态的影响 从表4 可以看出，肉鸡回肠绒毛高度与地衣芽孢杆菌在日粮中的添加量呈正相关，但与空白对照组无显著差异。与空白对照组相比，高剂量组隐窝深度显著降低，V/C 值显著升高，低剂量组和中剂量组隐窝深度较空白组降低（P＞0.05）。

表4 地衣芽孢杆菌对肉鸡肠道形态的影响

3 讨 论

地衣芽孢杆菌能在动物体内产生丰富的有益活性代谢产物，其产生的脂肪酶、纤维素酶和蛋白酶等酶类可补充肠道内源酶的不足；地衣芽孢杆菌分泌的小肽类物质还能消除饲料中的抗营养成分，消除其对动物消化吸收利用有效营养物质的阻碍[10]。孙全友等[11]研究发现，在饲料中添加地衣芽孢杆菌能显著提高肉鸡的生长性能。在本试验中，添加地衣芽孢杆菌制剂能显著降低肉鸡F/G，这可能是由于地衣芽孢杆菌在进入肉鸡体内后，快速并大量繁殖消耗了大量氧气，使肉鸡肠道处于厌氧状态，更有利于肉鸡原生益生菌（如乳酸菌类、双歧杆菌等）的繁殖，在自身产生多种消化酶类的同时，也能促进肉鸡体内原生益生菌酶类的产生，直接和间接提高了肉鸡体内酶的活性，提高营养物质的利用率，从而提高了肉鸡的生长性能[12]。

相关研究表明，SOD、CAT、GSH-Px 是机体中主要的抗氧化酶，维持着机体的氧化平衡，它们能清除多余的超氧阴离子自由基，保护细胞免受氧化损伤[9]，而MDA 含量则反映脂质过氧化程度，间接反映细胞受损伤程度[13]。赵莹等[14]研究发现，添加地衣芽孢杆菌能显著提高肉鸡血清SOD、CAT、GSH-Px 和肝脏SOD、CAT 活性。本试验结果亦表明，肉鸡血清SOD和GSH-Px 活性随着地衣芽孢杆菌添加量的增加而呈上升趋势，肉鸡血清抗氧酶活力提高可增强机体清除多余自由基的能力，对肉鸡的健康和生长有促进作用，这可能是由于芽孢杆菌属的代谢产物或本身所带的抗原充当着免疫原的角色能激活肉鸡体内的免疫通路，提高肉鸡的抗病和抗氧化能力。Rajput 等[15]研究发现，在饲粮中添加芽孢菌属能显著增加肉鸡对新城疫（NDV）疫苗的应答，且能增加肠道黏膜中淋巴细胞数量。

小肠绒毛长度和隐窝深度是衡量动物体肠道形态发育的重要指标，芽孢杆菌可刺激隐窝细胞的分化和成熟，从而降低隐窝深度，促进消化液的分泌[16]。Aliakbarpour 等[17]研究发现，芽孢菌属能降低雏鸡十二指肠和回肠的隐窝深度，改善肠道黏膜。陈家祥等[18]研究表明，在麻羽肉鸡饲粮中添加地衣芽孢杆菌可以降低隐窝深度、改善肠道结构。本试验中，添加地衣芽孢杆菌能在一定程度上改善回肠的黏膜形态，这可能是由于地衣芽孢杆菌分泌的多糖等物质刺激了肉鸡回肠的发育[19]，在该试验中的具体表现为隐窝深度的降低和V/C 值的升高，从而增加回肠黏膜的吸收面积，促进了相关营养物质在肉鸡回肠中的吸收能力。

4 结 论

本研究结果表明，与对照组相比，饲粮中添加地衣芽孢杆菌能显著降低肉鸡F/G，提高肉鸡的血清抗氧酶活力，增强机体清除多余自由基的能力，改善肉鸡回肠的黏膜形态，对肉鸡的健康和生长有促进作用。结合生长性能、抗氧化能力和肠道形态看，肉鸡饲粮中地衣芽孢杆菌的适宜添加量为4.0×109CFU/kg。