高效液相色谱法测定蔬菜中氨基甲酸酯类农药残留分析

◎ 李婷婷，李 玲，朱 璐

（1.淄博市疾病预防控制中心，山东 淄博 255000；2.济宁市任城区疾病预防控制中心，山东 济宁 272100）

在我国，随着《中华人民共和国农产品质量安全法》的颁布与实施，蔬菜、水果中氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测备受关注。实践中普遍采取气相色谱仪氮磷检测器，使用条件、样品前处理及检测器的相关要求特别严格，且检测灵敏度较低。同时，由于氨基甲酸酯类农药具有热不稳定性，气相色谱法的测定值较低。再加上蔬菜生长期相对较短，且流通速度快，对农药残留检测的灵敏度、准确性、快速性要求较高。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

1.1.1 供试材料

从当地农贸市场购买重约3 kg的白菜为研究对象。

1.1.2 标准溶液

甲醇、乙腈和二氯甲烷，色谱纯；丙酮，分析纯（重蒸）；柱后衍生试剂邻苯二甲醛（OPA）；巯基乙醇；氯化钠，140 ℃烘烤4 h；农药标准品由农业部环境保护科研中心提供，各浓度农药标准品均使用甲醇稀释，并将其放在-18 ℃环境中保存；超纯水用Milli-Q超纯水系统制备。

1.2 仪器与设备

安捷伦1200型高效液相色谱仪，配有柱后衍生反应装置和荧光检测器[2]；T-25basic匀浆机；3-30k高速冷冻离心机；N-EVAP-24氮吹仪，A10超纯水纯化系统；氨基固相萃取小柱（SPE柱）：300 mg。

1.3 试验方法

1.3.1 样品制备和提取

切开白菜样品，取1 000 g，并切碎能够食用的部分，将其置入到食物调理机中迅速粉碎，放入到容器中备用[3]。准确称取25.0 g样品，将其置入到匀浆机中，添加50 mL乙腈，高速匀浆2 min，过滤后将滤液置入50 mL具塞量筒，在量筒中提前放入5～7 g烘烤后的氯化钠，过滤结束后将塞子盖上，大幅度振荡1 min，在室内常温状态下静置分层，时间不得低于15 min[4]。

1.3.2 净化

从具塞量筒中迅速抽取10.0 mL乙腈相溶液，将其置入100 mL烧杯中，并把烧杯放置在80 ℃水浴锅中，持续加热，并慢慢地向杯中输入空气流或氮气，促使乙腈迅速蒸发近干。将2.0 mL的甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液加入残渣中，溶解并盖上铝箔备用。使用4.0 mL甲醇+二氯甲烷（5+95）的混合液预洗氨基柱，预洗溶液面抵达吸附层表面时迅速添加样品溶液，使用15 mL离心管对洗脱液进行收集，并使用3 mL甲醇+二氯甲烷（5+95）对烧杯洗涤1次，重复上述步骤。把洗脱液离心管放在氮吹仪上，水浴温度50 ℃，氮吹蒸发近干，使用甲醇+水（15+85）的混合溶液精准定容到2.5 mL，混匀后过0.2 μm有机滤膜待测[5]。

2 结果与分析

2.1 萃取液体积条件的选择

为了提高回收效果，需反复开展多次对比试验，在整个净化过程中分别选择使用甲醇+二氯甲烷（1+99)和（5+95)两个不一样的萃取体积比净化样品，回收率结果详见表1。

表1 回收率结果分析表（单位：%）

在本研究所采取的条件下，7种氨基甲酸酯类农药能够迅速分离，出峰顺序分别是涕灭威亚砜、涕灭威砜、灭多威、3-羟基克百威、涕灭威、克百威、甲萘威。

2.2 各个标准物质分离情况

2.3 添加回收率和精密度

在白菜中加入 0.10 μg·mL-1和 0.50 μg·mL-1的 7 种氨基甲酸酯类农药标准样品，其回收率和相对标准偏差结果详见表2。7种农药回收率为90%～110%，满足行业相关标准及要求；精密度保持在10%以内，表明方法精密度良好，可满足此类农药残留分析相关要求。

表2 回收率及精密度表

3 结果与讨论

本研究以市场上销售的白菜为研究对象，采取高效液相色谱仪（配有荧光检测器和柱后衍生系统）对7种氨基甲酸酯类农药的残留量进行准确测定。通过不同甲醇与二氯甲烷洗脱体积比对比得知，体积比为5+95时，标准物质添加回收率明显高于1+99的溶剂比例，最大提高幅度大于5%；对标准物质添加浓度进行改变可知，添加量为0.50 μg·mL-1时，回收率均超过添加量为0.10 μg·mL-1，最大提高幅度为9%。通过对以上两个关键的前处理步骤进行优化可知，优化后的前处理分离效果较好，检测回收率和精密度能够满足农药残留分析要求。