酒石酸泰万菌素成品稳定性研究

于荣 王少云 白海龙 郭涛

摘要：对酒石酸泰万菌素的热稳定性、酸碱稳定性、光稳定性和紫外稳定性进行了研究，结果表明，酒石酸泰万菌素在高温和紫外光照条件下易发生降解，对光照稳定性好，在酸性条件下易降解成其他形式，碱性条件对其成品无影响，因此酒石酸泰万菌素成品应当在常温或低温条件下储存较好。

關键词：酒石酸泰万菌素;稳定性;生物效价

酒石酸泰万菌素是最新一代大环内酯类抗生素[1]，其主要成分是酒石酸乙酰异戊酰泰乐菌素，它可以直接杀死支原体，其生物功效是泰乐菌素的7～10倍，泰万菌素最早由英国伊科公司开发，常使用其酒石酸盐。泰万菌素对多种革兰氏阳性菌有抗菌活性，如葡萄球菌、微球菌、微杆菌、芽孢杆菌、棒状杆菌、气球菌属、弯曲杆菌、肠球菌、链球菌、节杆菌等[1，2];对支原体也有很好的抗菌活性，并且在高浓度时作用更好;但对多数革兰氏阴性菌无作用。泰万菌素的作用机制同其他大环内酯类抗生素。它能与敏感菌的核蛋白体50S亚基结合，通过对转肽作用和/或mRNA位移的阻断，从而抑制肽链的合成和延长，影响细菌蛋白质的合成[3]。

2004年经欧盟批准用于预防和治疗由猪肺炎支原体引起的猪气喘病、由猪痢疾短螺旋体引起的猪痢疾、由胞内劳森氏菌引起的猪增生性肠炎和由鸡毒支原体引起的鸡支气管感染[4]。目前国内已批准酒石酸泰万菌素预混剂和可溶性粉，用于治疗猪、鸡支原体感染和猪血痢短螺旋体以及其他敏感细菌的感染[5，6]。笔者对泰万菌素可溶性粉的稳定性进行了评价，为其更好的生产存放提供重要依据。

1材料与方法

1.1供试材料：

酒石酸泰万菌素可溶性粉，宁夏泰益欣生物科技有限公司生产提供;指示菌培养基，营养肉汤培养基购自北京缘生化科技有限公司

1.2方法

1.2.1酒石酸泰万菌素成品制备。

泰万菌素发酵液经预处理，板框过滤，滤液一次沉淀，二次沉淀，酒石酸溶解制备成精制液，在经过喷粉等步骤，得到抗生素酒石酸泰万菌素的成品。

1.2.2酒石酸泰万菌素成品热稳定性实验。

取5份酒石酸泰万菌素成品各50g，装入小自封袋中，放置在25℃、30℃、40℃、50℃的培养箱中，相对湿度设置为30%±1和40%±1，放置1月、3月、6月后检测其生物效价和主成分的变化。生物效价检测使用管碟法[7]，操作如下：取灭过菌的平皿，在皿底作好标记;将营养肉汤培养基加热融化后，冷却至50℃左右，加入10ml葡萄球菌菌悬，摇匀后，用另一大口移液管取5 m1加入到平皿中已凝固的培养基上，使其摊布均匀。待其凝固后，用镊子夹取无菌牛津杯，按预先标记的位置放于上层培养基上。吸取样品200 ul，加入相应牛津杯中，滴加完毕，盖上平皿，28℃培养箱培养30～36 h，量取抑菌圈直径并记录。

1.2.3酒石酸泰万菌素成品酸碱稳定性试验。

取酒石酸泰万菌素成品50g至溶解制备成精制液，将精制液分别用1.0mol/L的盐酸和氢氧化钠调节pH至2.0、3.0和5.0、6.0，然后放置24h，以为调pH的精制液为对照，用管碟法测其生物活性并计算其生物效价。

1.2.4酒石酸泰万菌素成品光稳定性试验。

酒石酸泰万菌素成品在40W的日光灯下照射6h、12h、24h，及自然光下照射6h、12h、24h后，用管碟法测样品生物活性和组成分含量变化，以原始未处理为对照，观察抑菌活性变化并计算其生物效价。

1.2.5酒石酸泰万菌素成品紫外稳定性试验。

酒石酸泰万菌素成品在40W、3 650A波长的紫外线下照射5、10、15、20 h后，用管碟法测样品生物活性，观察抑菌活性变化并计算其生物效价。

2 结果与分析

2.1酒石酸泰万菌素成品热稳定性

图1表明，成品在放置过程中，其生物效价随放置时间降低，并且温度越高降低趋势越明显，酒石酸泰万菌素成品在25℃下活性比较稳定，在25℃条件下生物效价最大，随着放置时间增长，生物效价呈明显的下降趋势。由此可以说明，该事宜放置在常温条件下保存。

2.2酒石酸泰万菌素成品酸碱稳定性

图2和图3表明，酒石酸泰万菌素成品在用盐酸调节pH后其生物效价都明显升高，pH值2.0时其生物效价最高，可到到1279u/mg，氢氧化钠调节pH5.0和pH6.0对泰万菌素成品的生物效价无显著影响，未调pH的泰万菌素成品生物效价为正常的843u/mg。进一步的检测不同pH的泰万菌素成品的主要组分泰万菌素的含量，发现生物效价越高，其主成分泰万菌素的含量越低，pH2.0的泰万菌素成品中泰万菌素的含量仅仅占有29.4%，而pH5.0的泰万菌素成品中泰万菌素的含量无明显变化，根据其图谱分析发现大部分的酒石酸泰万菌素转化为盐酸泰万菌素，因盐酸泰万菌素的分子量相对较小，所以其生物效价明显升高，而放置时间对泰万菌素成品无明显影响。

2.3酒石酸泰万菌素成品光稳定性

图4表明，酒石酸泰万菌素在40W日光灯下照射6h、12h、24h，及自然光下照射6h、12h、24h后，其生物效价无明显变化，在自然光持续照射24h后，其生物效价仅仅降低了0.91%，说明该抗生素在日光灯和自然光照射一定时间内未定，不发生分解或结构上的变化。

2.4酒石酸泰万菌素成品紫外稳定性

酒石酸泰万菌素成品在40W、3650A波长的紫外线下照射5至10h其生物效价无明显变化，但是在照射15到20 h后其生物效价明显降低，在紫外光连续照射20h时其生物效价降低了1.92%。

3结论与讨论

酒石酸泰万菌素热稳定性不好，高温条件下容易降解，在常温25℃下保存时间较长，并且其生物效价降低速度较慢;酸性条件容易使泰万菌素成品发生降解，pH值2.0时其生物效价最高，可达到1279u/mg，氢氧化钠调节pH5.0和pH6.0对泰万菌素成品的生物效价无显著影响，未调pH的泰万菌素成品生物效价为正常的843u/mg。检测不同pH下主要组分泰万菌素的含量，发现pH2.0的泰万菌素成品中泰万菌素的含量仅仅占有29.4%，而pH5.0的泰万菌素成品中主组分的含量无明显变化;40W日光灯和自然光对泰万菌素成品均无明显的影响，其生物效价随照射时间变化很小，照射24h后生物效价仅仅降低0.91%;紫外光对泰万菌素成品的影响较大，持续照射20h后，其生物效价降低了1.92%。综合以上所述，酒石酸泰万菌素对高温、酸性条件和紫外光照较敏感，成品存放过程中应尽量避开此类不利因素，以延长其储存时间。

参考文献

[1]冯言言，田伟. 大环内酯类药物泰万菌素的研究进展[J].广东畜牧兽医科技，2015，40（06）：5-6+12.

[2]彭玮，张秀英，李睿.酒石酸泰乐菌素微球的制备及其稳定性的初步考察[J].东北农业大学学报，2008（05）：94-97.

[3]姬竹玲.泰万菌素颗粒剂的研制及其在猪体内的药动学研究[D].华南农业大学，2016.

[4]韩冰，张荣飞，晨光，田启宇，熊剑胜，吴强三，梁景乐，张刚，朴香淑.泰万菌素对断奶仔猪生产性能的影响[J].黑龙江畜牧兽医：下半月，2017（9）：197-198.

[5]文丽，李仕超.泰万菌素的抗炎效果分析[J].猪业科学，2018：26-30.

[6]王晓林.泰万菌素及其在养猪生产中的应用[J].中国猪业，2018

[7]李凡，朱志华，姜凤丽，宋丽华，代晓静.管碟法测定生物效价影响因素的探讨及改进[J].中国兽药杂志，2008：49-52.