中药复方抗动脉粥样硬化作用机制的研究进展

谢 彬，袁 星，徐希科，柳润辉 （海军军医大学药学院天然药物化学教研室，上海 200433）

尽管现代医疗卫生条件有了很大改善，但心血管疾病仍然是世界上主要的健康问题。据2018 年世界卫生组织数据统计，每年因心血管疾病导致死亡人数占总死亡人数超过30%。动脉粥样硬化（AS）是动脉壁的一种慢性疾病，是引起心血管疾病的重要因素，病理特征为动脉内膜炎症、坏死、纤维化和钙化，动脉特定部位斑块形成[1-2]。AS 致病因素较为复杂，目前认为主要与血管内皮细胞损伤、炎症反应、脂质代谢紊乱、自噬与凋亡失衡等有关。近些年研究发现，肠道菌群紊乱，特别是肠道菌群代谢产物和AS 发生发展有着密切联系[3]。现代医学在AS 防治中常用的保守治疗药物主要为他汀类药物，临床上取得一定的疗效，但是疗效不足以及药物的副作用等局限性也慢慢呈现出来[4]。传统中草药作为中华文化的瑰宝，在中国的应用超过5 000 年，疗效显著，传承至今仍展现出强大生命力。中药尤其是中药复方由于具有多成分、多靶点、多途径的整体协同作用特点，在心血管疾病等复杂疾病的治疗方面显示出独特的优势。越来越多的学者研究中药复方治疗AS 的药效物质基础及其作用机制，为中医药走向现代化、国际化奠定基础。本文综述近5 年中药复方抗AS 的作用机制，为抗AS 中药复方的深入系统研究提供参考。

1 调节脂质代谢

1.1 降血脂

高脂血症是动脉粥样硬化的独立危险因素，尤其是血液中低密度脂蛋白含量，如果长时间超过人体生理需要浓度，就会引起动脉粥样硬化的发生和发展[5]。刘传亮等[6]探讨复方丹参川芎中药配方颗粒在常规治疗基础上对老年颈动脉粥样硬化的影响及机制，发现和常规治疗组比较，加用复方丹参川芎中药配方颗粒能够显著降低患者血清总胆固醇(TC）、三酰甘油(TG）、低密度脂蛋白(LDL），有效改善血脂水平，缩小动脉粥样硬化斑块。梅琼等[7]研究发现，当归川芎组合能显著降低大鼠血清LDL、TC、TG 水平，升高血清高密度脂蛋白(HDL）水平，显著降低冠状动脉粥样斑块面积指数(PAI)，具有减轻冠状动脉粥样斑块的作用。张燕等[8]探讨不同剂量益气滋阴、活血通络复方对动脉粥样硬化患者LDL 和HDL 水平的影响，结果表明该方防治动脉粥样硬化的作用，与其能够降低LDL、升高HDL有关。王磊等[9]观察复方三七护脉汤，联合西医常规治疗心血瘀阻型冠心病稳定型心绞痛患者的临床疗效，发现复方三七护脉汤联合西医常规治疗6 周后，血清TC、TG、LDL 水平均明显下降，血清HDL 水平明显升高，可明显改善患者的血脂水平，疗效优于西医常规治疗。

1.2 促进胆固醇逆转运，抑制泡沫细胞形成

泡沫细胞是AS 病变的关键成分，它由血管内皮下的巨噬细胞摄取大量脂质胆固醇转变而成[10]。泡沫细胞形成在AS 发生发展中起着至关重要的作用，它主要与脂质内流与外排失衡有关。胆固醇逆向转运(RCT)是HDL 将多余胆固醇转运至肝脏再循环或以胆酸形式排出体外的过程[11]。王晓宁[12]研究发现，化浊通脉方能够通过提高兔胆固醇跨膜逆转运关键蛋白小凹蛋白-1(cav-1)及基因水平、亲环素A 的基因水平，上调三磷酸腺苷结合盒转运体A1（ATP-binding cassette transporters A1，ABCA1）蛋白表达，促进细胞内胆固醇流出，从而达到抗AS效果。祝骥等[13]探讨复方丹参片对颈AS 兔PPAR-γ/LXR-α/ABCA1 信号通路的影响，发现复方丹参片能够降低血脂，增加兔颈动脉中PPAR-γ、LXR-α及ABCA1 mRNA 及蛋白质的表达，表明其可能通过激活PPAR-γ/LXR-α/ABCA1 信号通路促进RCT而发挥抗AS 作用。秦合伟等[14]探讨血管软化丸抗AS 的作用机制，发现用药后小鼠主动脉的miR-33 a 表达量降低，ABCA1基因和蛋白相对表达量均升高，体外实验发现血管软化丸含药血清呈浓度和时间依赖性下调miRNA33a表达，明显上调ABCA1 mRNA 和蛋白的表达，但能被转染miRNA33 mimic 抑制。表明血管软化丸通过调控miR-33a，进而影响下游信号ABCA1 的表达，促进巨噬细胞内胆固醇流出，这可能是其抗AS 作用机制之一。许丽婷等[15]研究发现黄连解毒汤含药血清各剂量组能够明显降低泡沫细胞内TC 含量，明显升高ABCA1 mRNA 表达，表明黄连解毒汤可能是通过上调泡沫细胞ABCA1的转录与表达，促进胆固醇外排来实现防治AS 效果的。Deng 等[16]研究发现中药复方丹蒌片提取物能够通过激活PPARα/ABCA1信号通路，促进RCT，改善巨噬细胞内脂质沉积，从而防治AS。

2 减轻血管内皮细胞损伤

血管内皮细胞损伤被认为是动脉粥样硬化的起始环节，贯穿动脉粥样硬化发生发展的全过程。其发生机制可能与一氧化氮（NO）与活性氧化物（ROS）失衡，即氧化应激有关[17]。过量ROS 产生是导致氧化应激重要因素，血管内皮细胞中ROS的产生可诱导LDL 的氧化和ROS 敏感炎症基因的表达[18]。近年来大量资料提示氧化应激及其产物，尤其是氧化低密度脂蛋白（Ox-LDL）是血管内皮损伤的主要因素，在动脉粥样硬化的发生、发展中发挥重要作用[19]。李红蓉等[20]研究通心络对Ox-LDL 诱导损伤的血管内皮细胞的保护作用，对人脐静脉内皮细胞加Ox-LDL(终浓度为30 mg/L)造成血管内皮细胞氧化应激损伤模型，发现通心络组细胞线粒体膜电位、细胞培养液中NO 含量、超过氧化物岐化酶（SOD）活力明显升高，表明通心络有较强的抗氧化能力，可减轻Ox-LDL 对血管内皮细胞的损伤。汪玉成等[21]探讨泽泻汤在Ox-LDL诱导的血管平滑肌细胞（VSMC）增殖中的作用和机制，发现泽泻汤含药血清可显著抑制Ox-LDL 诱导的VSMC 增殖，机制可能与上调p27 蛋白和抑制周期蛋白D1、周期蛋白E、PCNA 表达有关。王红梅等[22]研究龙血通络胶囊对Ox-LDL 致人脐静脉内皮细胞损伤的保护作用，发现龙血通络胶囊可促进Ox-LDL 损伤的血管内皮细胞增殖，降低胞内丙二醛（MDA）含量，减少细胞乳酸脱氢酶（LDH）释放量，提高SOD 活力及NO 含量，提示龙血通络胶囊可通过抑制Ox-LDL 对人脐静脉内皮细胞损伤来防治动脉粥样硬化。

3 改善炎症反应

炎症反应在动脉粥样硬化发展过程中扮演着重要角色。在动脉粥样硬化早期阶段，主要特征是血管内皮损伤，脂质代谢紊乱以及血流动力学改变，在动脉粥样硬化进展期，主要特征是内皮下炎症反应[23]。因此，改善炎症反应对防治动脉粥样硬化至关重要。

3.1 调节动脉粥样硬化相关炎症通路，降低血清和斑块组织炎症因子水平

与动脉粥样硬化有关的炎症反应相关通路主要有核因子κB（NF-κB）信号通路、丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）信号通路与AP-1，以及Janus 激酶/信号传导及转录激活因子（JAK/STAT）信号通路等[24]。Cheng 等[25]研究发现，银丹心脑通可抑制NF-κB 转录活性，降低下游通路中肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）等相关炎症因子表达，延缓动脉粥样硬化进展，表明其抗动脉粥样硬化机制可能是通过NF-κB 信号通路调控血管的炎症反应来实现的。刘叙阳等[26]以脂多糖诱导的血管内皮细胞为研究对象，探讨补阳还五汤(益气活血)、血府逐瘀汤(活血)、四君子汤(益气)含药血清对细胞Toll 样受体4（TLR4）及下游信号转导通路主要元件的影响，发现补阳还五汤和血府逐瘀汤可抑制TLR4，下游髓样分化因子88(My D88)，肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF-6)及NF-κB 的基因表达，改善炎症反应，从而防治动脉粥样硬化。罗永苗[27]以动脉粥样硬化患者为研究对象，探讨参七脉心通胶囊基于NF-κB 信号通路抗动脉粥样硬化的作用机制，发现参七脉心通胶囊能够下调NFκB 表达，降低IL-6、TNF-α 炎症因子水平，抑制NF-κB 信号转导通路，改善炎症反应，从而达到防治动脉粥样硬化的作用。张冰冰等[28]研究益糖康对动脉粥样硬化兔血清中炎症因子以及NF-κB、MAPK 信号通路的影响，发现其能有效抑制NFκB、P38MAPK、JNK 蛋白磷酸化水平，降低下游炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α 的表达，表明其可能是通过NF-κB 和MAPK 通路防治动脉粥样硬化。

3.2 通过影响巨噬细胞极化来改善炎症反应

巨噬细胞极化在炎症反应中扮演重要作用。巨噬细胞表型主要分为M1 型和M2 型，M1 型巨噬细胞通过分泌促炎因子（IL-6、IL-12、IL-1β、TNF-α 等）来促进炎症反应，M2 型巨噬细胞主要通过分泌抑炎因子（IL-10、TGF-β 等）来抑制炎症反应[29-30]。秦合伟等[31]探讨血管软化丸抗动脉粥样硬化的分子机制时发现，血管软化丸含药血清可以诱导巨噬细胞高表达M2 型巨噬细胞的标志CD206，使巨噬细胞由M1 型向M2 型极化，抑制炎症反应。Li 等[32]研究发现，通心络能够抑制源于THP-1 的Notch-1 信号通路，阻止巨噬细胞向M1型转化，从而改善炎症反应来发挥抗AS 疗效。

4 调节肠道微生物及其代谢物

人体内肠道微生物组成复杂，肠道内菌群数量超过上千种，但是在全部细菌中，有30～40 种的优势细菌却占比99%[33]。肠道微生物对人体消化功能和健康关系密切，肠道微生物组成改变可能会促进动脉粥样硬化进程，Menni 等[34]指出肠道菌群的多样性和动脉粥样硬化进展呈负相关，也有研究[35]表明艾克曼菌能够通过恢复肠道屏障，改善代谢内毒素血症引起的炎症，减轻AS 病变。除此之外，肠道微生物的代谢产物被认为是加速动脉粥样硬化发展的关键因素，尤其是三甲胺氧化物（TMAO）[36]。除TMAO 外，肠道菌群代谢物短链脂肪酸丁酸能够抑制肠道胆固醇吸收，延缓动脉粥样硬化进展[37]。丙酸能够降低炎症水平，抑制动脉粥样斑块形成，从而减少心血管疾病发生[38]。

在中药复方通过肠道菌群防治动脉粥样硬化方面，Zhang 等[39]研究发现，定心方4 号能显著降低小鼠血脂，减少动脉斑块面积，小鼠肠道muribaculaceae和ruminococcaceae菌丰度增加，erysipelotrichaceae菌丰度降低，这些菌群的改变对脂代谢是有益的，表明定心方4 号抗动脉粥样硬化机制可能与其改变肠道菌群组成有关。Zhu 等[40]研究发现，中药复方泽泻汤明显改变小鼠肠道菌群组成，降低血清TMAO 和肝脏黄素单加氧酶3（FMO3）水平，减少动脉粥样硬化斑块面积，表明其抗动脉粥样硬化作用可能是通过调节肠道菌群，进而调节TMA-FMO3-TMAO 轴来实现的。Ji 等[41]探讨中药复方通脉逐瘀汤通过调节肠道菌群抗动脉粥样硬化的作用机制，发现通脉逐瘀汤能显著改变雌性C57BL/6J 小鼠肠道菌群组成，某些细菌的丰度比如肠杆菌、链球菌、梭菌等在给予通脉逐瘀汤处理后恢复正常水平。此外，通脉逐瘀汤能够降低小鼠血清TMAO 水平，在抗生素处理来抑制肠道菌群的基础上再使用通脉逐瘀汤，TMAO 水平未见明显改变，结果表明通脉逐瘀汤能够通过改变肠道菌群组成，调节相关肠道代谢通路效应，来发挥抗动脉粥样硬化作用。

靶向干预某些特定肠道菌群可能是防治AS 或者其他心血管疾病的新途径[42]，已有研究确定在LDLr-/-小鼠中定向重塑肠道微生物组以预防AS 的发生和进展的可行性[43]。中医理论指出“心与小肠相表里”，这表里关系可能部分是通过调节肠道菌群途径来实现的。通过调节肠道菌群组成，进而改变肠道功能，影响与AS 关系密切的肠道菌群代谢物，可能是中药复方通过肠-心轴防治AS 的主要机制。目前，单味中药及其提取物通过调节肠道菌群抗AS 的研究较多，中药复方通过调节肠道菌群抗AS 的研究较少，AS 和某类特定菌群之间的关系尚不十分确切，有待深入研究，中药复方调节肠道菌群的具体有效成分也有待进一步挖掘。

5 结语

越来越多的学者研究传统中药治疗疾病药效物质基础及其作用机制，但是大部分研究基于单味中药，或者中药单体，涉及中药复方抗动脉粥样硬化作用机制的研究不多，通过调节肠道菌群作用机制研究中药复方抗动脉粥样硬化更少。中药复方具有多成分、多通路、多靶点的优势，但是目前研究基于药效方面多，具体作用机制网络通路研究较少，给中药复方现代研究带来机遇和挑战。中医理论指出，心与小肠相表里，这表里关系可能部分是通过调节肠道菌群这途径来实现的，这就为中药复方通过调节肠道菌群抗动脉粥样硬化提供了中医理论基础，目前16s RNA 测序和宏基因组等技术的推广应用，更为肠道菌群的深入研究提供技术支撑，中药网络药理学的发展也为中药复方多种作用机制研究提供了可能。