糙枝金丝桃间苯三酚类成分的研究

徐 雯，许 芳，高 万，李晓秀，徐 芳，赵 军，吉腾飞*，刘 波*

1新疆维吾尔自治区第三人民医院，乌鲁木齐 830011；2中国医学科学院 北京协和医学院药物研究所天然药物活性物质与功能国家重点实验室，北京 100050；3沈阳医学院药学院，沈阳 110034；4新疆药物研究所维吾尔药重点实验室，乌鲁木齐830004

藤黄科(Guttiferae)金丝桃属(Hypericum)植物在全国各地均有分布，尤以华东、华西、川北、贵州、新疆等地分布较为集中。全世界约有400余种，我国有55种8个亚种。该属植物在民间有2 400余年的用药历史，主要有清热解毒、散瘀止痛、祛风湿等功效[1]。金丝桃属植物中主要含有萘骈二蒽酮类、黄酮类、口山酮类和间苯三酚类成分，其中间苯三酚类成分因其新颖的化学结构和多样的药理活性而倍受关注[2，3]。

糙枝金丝桃(Hypericumscabrum)为金丝桃属多年生草本植物，为我国新疆特有种，且仅分布在天山、阿尔泰山、塔尔巴哈台山前山至中山地区[4]。为了进一步明确其药效物质基础，同时也为寻找结构新颖并具有较好药理活性的先导化合物，本文对糙枝金丝桃地上部分乙醇提取物的石油醚萃取部位的化学成分进行了分离纯化和结构鉴定，并测试了各化合物对谷氨酸诱导的神经元损伤的保护活性。

1 材料与方法

1.1 材料

糙枝金丝桃于2013年7月采自新疆维吾尔自治区阿尔泰地区，并由新疆师范大学生命科学与化学学院李进教授鉴定为藤黄科金丝桃属植物糙枝金丝桃Hypericumscabrum，标本现存于中国医学科学院药物研究所植物标本室，标本号为No.ID-S-2545。

1.2 仪器与试剂

Thermo Nicolet 5700型傅立叶变换红外光谱仪(美国热电公司)；Mercury-400、Inova-500和SYS-600核磁共振仪(美国Varian公司)；Agilent 1100 Series LC-MSD-Trap-SL型质谱仪(美国Agilent公司)；柱层析硅胶(200～300目和硅胶H)及薄层层析用硅胶GF254(青岛海洋化工厂)；MCI CHP20/P120(日本三菱公司)；葡聚糖凝胶Sephadex LH-20(瑞典Amersham Pharmacia公司)；Agilent 1260型高效液相色谱仪(美国Agilent公司)，Rp C18色谱柱(分析型：4.6 mm×250 mm，5 μm；制备型：10 mm×250 mm，10 μm，日本YMC公司)。

1.3 提取与分离

将干燥的糙枝金丝桃地上部分15.0 kg，粉碎后用5倍量的95%乙醇加热回流提取3次，每次2 h，减压回收溶剂得浸膏2.3 kg。将浸膏分散于5倍量的水中混悬，依次用石油醚、乙酸乙酯萃取，得石油醚萃取部位750.0 g，乙酸乙酯萃取部位550.0 g。将石油醚萃取部位经减压硅胶柱色谱分离，用石油醚/乙酸乙酯(100∶0→0∶100)梯度洗脱，洗脱液经薄层色谱检测，合并相似的流分，回收溶剂得到13个流分(Fr.A～Fr.M)。

Fr.A(169.2 g)，经硅胶柱色谱分离，依次用石油醚/乙酸乙酯(100∶0→0∶100)梯度洗脱得九个亚组分(Fr.Aa～Fr.Ai)。Fr.Ac(37.9 g)经二醇基硅胶柱色谱分离，石油醚/二氯甲烷(1∶1)洗脱，得四个亚组分(Fr.Ac-1～4)。Fr.Ac-1经反复硅胶H柱色谱，凝胶柱色谱(石油醚/氯仿/甲醇= 5∶5∶1)和制备液相色谱(95%甲醇/水)分离得到化合物1(12 mg，tR= 32.2 min)、5(28 mg，tR= 38.5 min)和10(5 mg，tR= 48.3 min)。Fr.Ad(12.0 g)经硅胶H柱色谱，二氯甲烷/乙酸乙酯(20∶1)洗脱，得八个亚组分(Fr.Ad-1～8)。Fr.Ad-3经制备液相色谱(90%甲醇/水)纯化得化合物3(5 mg，tR= 33.1 min)。Fr.Ad-7经制备液相(90%甲醇/水)纯化得化合物2(14 mg，tR= 35.6 min)、4(25 mg，tR= 42.2 min)和6(21 mg，tR= 45.7 min)。Fr.Ae(1.0 g)经硅胶H柱色谱，凝胶柱色谱(石油醚/氯仿/甲醇= 5∶5∶1)和制备液相色谱(90%甲醇/水)分离得到化合物9(34 mg，tR= 34.8 min)。Fr.Ah经硅胶H柱色谱，石油醚/乙酸乙酯(4∶1→2∶1→0∶1)洗脱，再经制备液相色谱(90%甲醇/水)纯化得化合物7(38 mg，tR= 31.6 min)和8(24 mg，tR= 39.2 min)。

1.4 神经保护活性测定

应用神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株建立谷氨酸诱导损伤的细胞筛选模型，以MTT法观察化合物1～10对SK-N-SH细胞成活率的影响。SK-N-SH细胞在37 ℃、含5% CO2的孵箱中培养，培养基为DMEM(含10%胎牛血清，100 U/mL青霉素和100 μg/mL链霉素，pH 7.2～7.4)。用培养基将细胞分散，使成为密度为1×105个/mL的单细胞悬液，并以每孔0.1 mL接种于96孔板。培养24 h后换含有受试化合物的培养基，并于给药后1 h加入白藜芦醇(终浓度为50 mmol/L)继续培养。给药后24 h换含MTT(0.5 mg/mL)无血清的培养基，培养4 h，吸去培养液，加入DMSO振荡使溶解，570 nm测定各孔吸光值。

2 结果与讨论

2.1 结构鉴定

化合物1无色油状物；HR-ESI-MS：m/z567.404 5 [M+H]+(calcd for C36H55O5，567.404 4)确定化合物的分子式为C36H54O5；1H NMR谱显示三个烯氢质子信号(δH4.92，1H，t，J= 7.0 Hz；4.97，1H，t，J= 6.2 Hz；5.08，1H，t，J= 7.0 Hz)，九个甲基信号(δH1.00、1.23、1.23、1.53、1.65、1.66、1.66、1.67、1.71)以及一个仲丁基信号(δH2.24，1H，m；1.14，3H，d，J= 6.6 Hz；1.34/1.69，2H，m；0.86，3H，t，J= 7.4 Hz)。13C NMR谱显示36个碳信号，包含三个羰基碳信号(δC194.4、206.7、210.8)和六个烯碳信号(δC119.8、122.0、22.2、133.6、133.7、134.5)(见表1)。从HMBC谱中可观察到H2-15(δH1.90/2.48)与C-1、C-7、C-8、C-16、C-17、C-36相关；H2-21(δH3.11/3.31)与C-2、C-3、C-4、C-22、C-23相关；H2-26(δH2.46)与C-4、C-5、C-6、C-9、C-27、C-28相关；H2-31(δH1.58/2.03)与C-6、C-7、C-8、C-32、C-33、C-36相关；H3-36(δH1.00)与C-1、C-7、C-8、C-15相关，如图1所示，推断化合物1是与Hyphenrone E[5]具有相同平面结构的间苯三酚

表1 化合物1的1H NMR(400 MHz)和13C NMR(100 MHz)数据(CDCl3)Table 1 1H NMR (400 MHz) and 13C NMR (100 MHz) data of compound 1(CDCl3)

类衍生物。从ROESY谱图中可观察到H2-31(δH2.03/1.58)与H3-36(δH1.00)相关；H3-36(δH1.00)与H-6a(δH1.50)相关；H-31(δH2.03)与 H-15a(δH1.90)相关；H-17(δH3.84)与H-15b(δH2.50)相关；以及H2-26(δH2.46)与H-6a(δH1.50)相关，如图1所示，说明C-8、C-5和C-7位取代基均为β构型，H-17为α构型。化合物1的CD谱与已知化合物hyperscabrone D[6]非常相似，如图2所示，由此可确定化合物1的绝对构型为1S、5R、7S，8R和17R，将该化合物命名为hyperibrin H。化合物1的详细结构鉴定数据原始图谱可从本刊官网免费下载(www.trcw.ac.cn)。

图1 化合物1的主要HMBC和ROESY相关Fig.1 Key HMBC and ROESY correlations of compound 1

图2 化合物1和hyperscabrone D 的CD谱Fig.2 CD spectra of compound 1 and hyperscabrone D

化合物2无色油状物;ESI-MS：m/z535.3 [M + Na]+，分子式为C32H48O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.28(1H，t，J= 13.6 Hz，H-6a)，1.92(1H，dd，J= 13.6，4.4 Hz，H-6b)，1.61(1H，m，H-7)，2.88(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10a)，3.06(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10b)，4.62(1H，t，J= 10.0 Hz，H-11)，1.24(3H，s，H-13)，1.33(3H，s，H-14)，1.22(3H，s，H-15)，1.70(1H，m，H-16a)，2.11(1H，m，H-16b)，4.92(1H，t，J= 6.4 Hz，H-17)，1.53(3H，s，H-19)，1.66(3H，s，H-20)，1.42(1H，m，H-21a)，1.81(1H，m，H-21b)，2.00(1H，m，H-22a)，2.20(1H，m，H-22b)，5.00(1H，t，J= 6.4 Hz，H-23)，1.59(3H，s，H-25)，1.66(3H，s，H-26)，1.11(3H，s，H-27)，2.16(1H，m，H-29)，1.17(3H，d，J= 6.4 Hz，H-30)，1.36(1H，m，H-31a)，1.69(1H，m，H-31b)，0.88(3H，t，J= 7.6 Hz，H-32)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：74.8(C-1)，172.0(C-2)，120.0(C-3)，191.1(C-4)，60.1(C-5)，41.8(C-6)，44.6(C-7)，47.1(C-8)，206.5(C-9)，26.9(C-10)，93.7(C-11)，71.4(C-12)，25.1(C-13)，26.5(C-14)，16.0(C-15)，28.0(C-16)，122.4(C-17)，133.6(C-18)，18.0(C-19)，25.9(C-20)，39.2(C-21)，25.4(C-22)，124.5(C-23)，132.3(C-24)，17.9(C-25)，25.8(C-26)，12.9(C-27)，208.5(C-28)，47.4(C-29)，17.2(C-30)，27.2(C-31)，11.9(C-32)。以上数据与文献[7]报道的化合物对比一致，鉴定为hypermongone A。

化合物3无色油状物;ESI-MS：m/z535.3 [M + Na]+，分子式为C32H48O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.43(1H，t，J= 13.6 Hz，H-6a)，1.92(1H，dd，J= 13.6，4.4 Hz，H-6b)，1.57(1H，m，H-7)，2.88(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10a)，2.98(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10b)，4.78(1H，t，J= 10.0 Hz，H-11)，1.21(3H，s，H-13)，1.27(3H，s，H-14)，1.32(3H，s，H-15)，1.74(1H，m，H-16a)，2.11(1H，m，H-16b)，4.92(1H，t，J= 6.4 Hz，H-17)，1.53(3H，s，H-19)，1.66(3H，s，H-20)，1.39(1H，m，H-21a)，1.91(1H，m，H-21b)，1.91(1H，m，H-22a)，2.11(1H，m，H-22b)，5.05(1H，t，J= 6.4 Hz，H-23)，1.59(3H，s，H-25)，1.66(3H，s，H-26)，1.02(3H，s，H-27)，1.91(1H，m，H-29)，1.12(3H，d，J= 6.4 Hz，H-30)，1.32(1H，m，H-31a)，1.76(1H，m，H-31b)，0.80(3H，t，J= 7.2 Hz，H-32)；13C NMR(100 MHz， CDCl3)δ：83.7(C-1)，187.6(C-2)，117.7(C-3)，176.8(C-4)，50.7(C-5)，39.7(C-6)，43.7(C-7)，48.1(C-8)，206.6(C-9)，27.8(C-10)，92.7(C-11)，72.3(C-12)，23.7(C-13)，25.0(C-14)，16.0(C-15)，27.2(C-16)，122.5(C-17)，133.6(C-18)，18.0(C-19)，25.9(C-20)，36.8(C-21)，25.4(C-22)，124.5(C-23)，131.3(C-24)，17.9(C-25)，25.8(C-26)，13.7(C-27)，209.3(C-28)，48.9(C-29)，16.7(C-30)，27.2(C-31)，11.7(C-32)。 以上数据与文献[7]报道的化合物对比一致，鉴定为hypermongone E.

化合物4无色油状物;ESI-MS：m/z535.3 [M + Na]+，分子式为C32H48O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.41(1H，t，J= 13.6 Hz，H-6a)，1.96(1H，dd，J= 13.6，4.4 Hz，H-6b)，1.65(1H，m，H-7)，2.88(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10a)，3.04(1H，dd，J= 14.6，10.0 Hz，H-10b)，4.78(1H，t，J= 10.0 Hz，H-11)，1.21(3H，s，H-13)，1.30(3H，s，H-14)，1.32(3H，s，H-15)，1.78(1H，m，H-16a)，2.14(1H，m，H-16b)，4.96(1H，t，J= 6.4 Hz，H-17)，1.57(3H，s，H-19)，1.70(3H，s，H-20)，1.44(1H，m，H-21a)，1.91(1H，m，H-21b)，1.91(1H，m，H-22a)，2.11(1H，m，H-22b)，5.05(1H，t，J= 6.4 Hz，H-23)，1.59(3H，s，H-25)，1.64(3H，s，H-26)，1.02(3H，s，H-27)，1.85(1H，m，H-29)，1.12(3H，d，J= 6.4 Hz，H-30)，1.32(1H，m，H-31a)，1.74(1H，m，H-31b)，0.80(3H，t，J= 7.2 Hz，H-32)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：83.8(C-1)，187.6(C-2)，117.6(C-3)，176.9(C-4)，50.6(C-5)，39.9(C-6)，43.3(C-7)，48.0(C-8)，206.8(C-9)，27.6(C-10)，93.2(C-11)，72.3(C-12)，24.2(C-13)，25.4(C-14)，15.4(C-15)，27.5(C-16)，122.6 (C-17)，133.6(C-18)，18.0(C-19)，25.9(C-20)，36.8(C-21)，25.4(C-22)，124.9(C-23)，131.3(C-24)，17.9(C-25)，25.8(C-26)，13.9(C-27)，209.3(C-28)，48.9(C-29)，16.7(C-30)，27.2(C-31)，11.7(C-32)。以上数据与文献[7]报道的化合物对比一致，鉴定为hypermongone F。

化合物5无色油状物;ESI-MS：m/z521.3 [M + Na]+，分子式为C31H46O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.43(1H，t，J= 13.6 Hz，H-6a)，1.92(1H，m，H-6b)，1.59(1H，m，H-7)，2.87(1H，dd，J= 14.8，7.6 Hz，H-10a)，2.98(1H，dd，J= 14.8，10.4 Hz，H-10b)，4.77(1H，dd，J= 10.4，7.6 Hz，H-11)，1.21(3H，s，H-13)，1.26(3H，s，H-14)，1.32(3H，s，H-15)，1.72(1H，m，H-16a)，2.12(1H，m，H-16b)，4.92(1H，t，J= 7.2 Hz，H-17)，1.57(3H，s，H-19)，1.66(3H，s，H-20)，1.39(1H，m，H-21a)，1.91(1H，m，H-21b)，1.91(1H，m，H-22a)，2.11(1H，m，H-22b)，5.05(1H，t，J= 6.4 Hz，H-23)，1.59(3H，s，H-25)，1.64(3H，s，H-26)，1.02(3H，s，H-27)，2.17(1H，m，H-29)，1.05(3H，d，J= 6.4 Hz，H-30)，1.13(1H，m，H-31)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：83.8(C-1)，187.6(C-2)，117.6(C-3)，176.8(C-4)，50.7(C-5)，39.6(C-6)，43.6(C-7)，48.0(C-8)，206.7(C-9)，27.8(C-10)，92.7(C-11)，72.2(C-12)，23.8(C-13)，25.0(C-14)，15.5(C-15)，27.2(C-16)，122.7(C-17)，133.7(C-18)，18.0(C-19)，25.9(C-20)，36.8(C-21)，25.1(C-22)，124.9(C-23)，131.3(C-24)，17.7(C-25)，25.8(C-26)，13.7(C-27)，209.9(C-28)，42.2(C-29)，20.6(C-30)，21.6(C-31)。以上数据与文献[7]报道的化合物对比一致，鉴定为hypermongone G。

化合物6无色油状物;ESI-MS：m/z521.3 [M + Na]+，分子式为C31H46O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.41(1H，t，J= 13.6 Hz，H-6a)，1.96(1H，m，H-6b)，1.65(1H，m，H-7)，2.87(1H，dd，J= 14.8，8.0 Hz，H-10a)，3.03(1H，dd，J= 14.8，10.4 Hz，H-10b)，4.81(1H，dd，J= 10.4，8.0 Hz，H-11)，1.21(3H，s，H-13)，1.30(3H，s，H-14)，1.32(3H，s，H-15)，1.78(1H，m，H-16a)，2.14(1H，m，H-16b)，4.96(1H，t，J= 7.2 Hz，H-17)，1.57(3H，s，H-19)，1.70(3H，s，H-20)，1.47(1H，m，H-21a)，1.91(1H，m，H-21b)，1.91(1H，m，H-22a)，2.11(1H，m，H-22b)，5.05(1H，t，J= 6.0 Hz，H-23)，1.59(3H，s，H-25)，1.64(3H，s，H-26)，1.02(3H，s，H-27)，2.09(1H，m，H-29)，1.05(3H，d，J= 6.4 Hz，H-30)，1.13(1H，m，H-31)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：83.8(C-1)，187.6(C-2)，117.7(C-3)，177.0(C-4)，50.7(C-5)，39.6(C-6)，43.2(C-7)，48.0(C-8)，206.7(C-9)，27.6(C-10)，93.3(C-11)，72.1(C-12)，24.1(C-13)，25.5(C-14)，15.5(C-15)，27.5(C-16)，122.6(C-17)，133.6(C-18)，18.1(C-19)，26.0(C-20)，36.7(C-21)，25.1(C-22)，124.9(C-23)，131.3(C-24)，17.7(C-25)，25.8(C-26)，13.9(C-27)，209.7(C-28)，42.3(C-29)，20.6(C-30)，21.6(C-31)。以上数据与文献[7]报道的化合物对比一致，鉴定为hypermongone H。

化合物7无色油状物;ESI-MS：m/z541.2 [M + Na]+，分子式为C33H42O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.64(1H，m，H-6a)，2.12(1H，dd，J= 12.4，4.0 Hz，H-6b)，1.75(1H，m，H-7)，7.44(2H，d，J= 8.4 Hz，H-12，16)，7.22(2H，t，J= 8.0 Hz，H-13，15)，7.38(1H，t，J= 8.0 Hz，H-14)，3.04(1H，dd，J= 14.4，6.8 Hz，H-17a)， 3.14(1H，dd，J= 14.4，6.8 Hz，H-17b)，5.05(1H，t，J= 7.2 Hz，H-18)，1.66(3H，s，H-20)，1.66(3H，s，H-21)，1.88(1H，dd，J= 12.8，6.0 Hz，H-22a)，2.71(1H，dd，J= 12.8，10.0 Hz，H-22b)，4.63(1H，dd，J= 10.0，6.0 Hz，H-23)，1.40(3H，s，H-25)，1.24(3H，s，H-26)，1.74(1H，m，H-27a)，2.20(2H，m，H-27b)，4.98(1H，m，H-28)，1.72(3H，s，H-30)，1.60(3H，s，H-31)，1.21(3H，s，H-32)，1.40(3H，s，H-33)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：77.1(C-1)，194.0(C-2)，115.6(C-3)，172.4(C-4)，59.8(C-5)，36.4(C-6)，47.7(C-7)，49.2(C-8)，205.4(C-9)，193.5(C-10)，136.9(C-11)，127.8(C-12)，128.0(C-13)，131.8(C-14)，128.0(C-15)，127.8(C-16)，22.2(C-17)，119.7(C-18)，132.5(C-19)，25.7(C-20)，17.6(C-21)，30.9(C-22)，90.0(C-23)，70.8(C-24)，23.9(C-25)，26.5(C-26)，29.1(C-27)，124.4(C-28)，132.5(C-29)，25.9(C-30)，17.9(C-31)，22.4(C-32)，26.9(C-33)。以上数据与文献[8]报道的化合物对比一致，鉴定为sampsonione L。

化合物8无色油状物;ESI-MS：m/z519.3 [M + H]+，分子式为C33H42O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.52(1H，t，J= 12.8 Hz，H-6a)，2.00(1H，dd，J= 12.8，4.0 Hz， H-6b)，1.67(1H，m，H-7)，7.54(2H，d，J= 7.2 Hz，H-12，16)，7.27(2H，t，J= 7.2 Hz，H-13，15)，7.40(1H，t，J= 7.2 Hz，H-14)，2.93(1H，dd，J= 14.8，7.2 Hz，H-17a)，2.99(1H，dd，J= 10.4，7.2 Hz，H-17b)，4.83(1H，dd，J= 10.4，7.2 Hz，H-18)，1.24(3H，s，H-20)，1.30(3H，s，H-21)，2.45(1H，dd，J= 14.4，7.6 Hz，H-22a)，2.60(1H，dd，J= 14.4，7.6 Hz，H-22b)，5.10(1H，t，J= 7.6 Hz，H-23)，1.67(3H，s，H-25)，1.67(3H，s，H-26)，2.18(2H，m，H-27)，4.98(1H，t，J= 7.2 Hz，H-28)，1.72(3H，s，H-30)，1.58(3H，s，H-31)，1.13(3H，s，H-32)，1.40(3H，s，H-33)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：79.0(C-1)，187.9(C-2)，117.4(C-3)，176.1(C-4)，55.8(C-5)，39.3(C-6)，43.7(C-7)，48.0(C-8)，206.3(C-9)，193.3(C-10)，136.6(C-11)，127.9(C-12)，128.3(C-13)，132.1(C-14)，127.9(C-15)，128.3(C-16)，27.5(C-17)，92.5(C-18)，72.0(C-19)，23.7(C-20)，25.0(C-21)，28.9(C-22)，118.3(C-23)，135.4(C-24)，25.8(C-25)，18.1(C-26)，26.8(C-27)，122.5(C-28)，133.8(C-29)，26.1(C-30)，19.2(C-31)，15.8(C-32)，23.7(C-33)。以上数据与文献[9]报道的化合物对比一致，鉴定为garcinielliptone I。

化合物9无色油状物;ESI-MS：m/z519.3 [M + H]+，分子式为C33H42O5。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：1.46(1H，m，H-6a)，2.00(1H，dd，J= 13.6，4.4 Hz，H-6b)，1.67(1H，m，H-7)，7.58(2H，d，J= 8.0 Hz，H-12，16)，7.35(2H，t，J= 8.0 Hz，H-13，15)，7.48(1H，t，J= 7.6 Hz，H-14)，2.96(2H，d，J= 10.0 Hz，H-17)，4.65(1H，m，H-18)，0.90(3H，s，H-20)，0.90(3H，s，H-21)，2.48(1H，m，H-22a)，2.57(1H，m，H-22b)，5.06(1H，m，H-23)，1.70(3H，s，H-25)，1.67(3H，s，H-26)，1.65(1H，m，H-27a)，2.13(1H，m，H-27b)，4.96(1H，m，H-28)，1.56(3H，s，H-30)，1.67(3H，s，H-31)，1.24(3H，s，H-32)，1.34(3H，s，H-33)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：70.6(C-1)，171.9(C-2)，118.3(C-3)，188.1(C-4)，65.3(C-5)，41.8(C-6)，43.2(C-7)，47.0(C-8)，206.9(C-9)，193.2(C-10)，137.2(C-11)，128.5(C-12)，128.2(C-13)，132.8(C-14)，128.2(C-15)，128.5(C-16)，26.5(C-17)，93.5(C-18)，70.6(C-19)，23.7(C-20)，26.4(C-21)，29.3(C-22)，119.5(C-23)，134.7(C-24)，18.1(C-25)，26.0(C-26)，27.7(C-27)，122.3(C-28)，133.5(C-29)，17.9(C-30)，25.9(C-31)，15.7(C-32)，24.1(C-33)。以上数据与文献[10]报道的化合物对比一致，鉴定为propolone C。

化合物10无色油状物;ESI-MS：m/z333.3 [M + H]+，分子式为C22H37O2。1H NMR(400 MHz，CDCl3)δ：3.62(1H，s，H-2)，2.35(1H，m，H-4)，1.16(1H，m，H-5a)，2.09(1H，m，H-5b)，2.35(1H，m，H-6)，2.40(1H，m，H-8)，0.99(3H，d，J= 6.4 Hz，H-9)，1.00(1H，d，J= 6.4 Hz，H-10)，1.03(3H，s，H-11)，1.00(3H，s，H-12)，2.16(1H，m，H-13a)，2.35(1H，m，H-13b)，5.10(1H，t，J= 8.0 Hz，H-14)，1.67(3H，s，H-16)，1.66(1H，s，H-17)，1.67(1H，m，H-18a)，1.91(1H，m，H-18b)，5.05(1H，m，H-19)，1.57(3H，s，H-21)，1.57(3H，s，H-22)；13C NMR(100 MHz，CDCl3)δ：208.8(C-1)，70.6(C-2)，43.4(C-3)，48.2(C-4)，34.8(C-5)，50.9(C-6)，208.8(C-7)，42.9(C-8)，17.8(C-9)，17.2(C-10)，25.7(C-11)，25.8(C-12)，27.4(C-13)，123.2(C-14)，132.7(C-15)，25.8(C-16)，25.7(C-17)，27.5(C-18)，121.4(C-19)，133.1(C-20)，25.7(C-21)，17.7(C-22)。以上数据与文献[11]报道的化合物对比一致，鉴定为garcinielliptone N。

2.2 神经保护活性评价

应用神经母细胞瘤SK-N-SH细胞株建立谷氨酸诱导损伤的细胞筛选模型，以MTT法观察化合物1～10对SK-N-SH细胞成活率的影响。结果表明，化合物5和6具有一定的神经保护活性(见表2)。

表2 化合物5和6对谷氨酸诱导的神经元损伤的保护作用Table 2 Neuroprotective effects of compounds 5 and 6against glutamate-induced toxicity in SK-N-SH cell

3 讨论与结论

本文对糙枝金丝桃地上部分的乙醇提取物进行了化学成分研究，共分离鉴定了10个间苯三酚类成分，其中化合物1为新化合物。并对各化合物的神经保护活性进行了测试，发现化合物5和6在10 μM浓度下对谷氨酸诱导的神经元损伤具有一定保护作用，化合物5与阳性对照白藜芦醇的活性相当。此外，间苯三酚类化合物多为无色油状物且具有多个手性中心，很难用经典的X-Ray单晶衍射实验来确定其绝对构型，但可以通过比较实验和计算ECD谱来进行确定。