氟尼辛葡甲胺注射液的制备及性状初步研究

郭金梅，朱术会，李申华，郭华亮，王成森

（1.潍坊市农业农村局，山东 潍坊 261061；2.山东畜牧兽医职业学院，山东 潍坊 261061；3.山东金瑞生物科技有限公司，山东 潍坊 261061）

氟尼辛葡甲胺（Flunixin meglumine）是一种非甾体动物用解热镇痛药[1]，属于环氧化酶抑制剂[2]。该药物具有较强的解热、镇痛和消炎作用，兽医临床上单独或与抗生素联合使用来治疗马、牛及猪的内脏绞痛、肌肉及骨骼的疼痛、发热和炎症[3-4]；还可以用于动物因感染引起的急性炎症的治疗[5-6]，如关节炎、母猪乳房炎、子宫炎及无乳综合征[7]。

氟尼辛葡甲胺可口服、静脉注射及肌肉注射[8]，其注射液在大型家畜疾病治疗中应用较广，临床需求量大，本试验在氟尼辛葡甲胺注射剂制备中使用具有助溶和促进药物吸收作用的辅料聚维酮K-30、聚乙二醇-6000和甘油，以期制备的氟尼辛葡甲胺注射液性质稳定，在兽医临床治疗中有较好的作用。

1 材 料

1.1 主要试剂

试验用氟尼辛葡甲胺原料及氟尼辛葡甲胺标准品，由山东金瑞生物科技有限公司赠送；聚维酮K-30（批号为20171220）、聚乙二醇-6000（批号为20180112）、甘油（批号为20170625）、液相色谱级甲醇（批号为20180114）、亚硫酸氢钠（批号为20171106）、EDTA-2Na（批号为20171009），均购自国药集团化学试剂有限公司。

1.2 主要仪器

高效液相色谱仪（型号为LC-10A），购自岛津（中国）有限公司；电子天平（型号为JH4101），购自上海精科天美贸易有限公司；澄明度测定仪（型号为YB-2），购自天津盛达三合光学仪器有限公司；数显恒温磁力搅拌器（型号为MYP11-2），购自上海梅颖仪器有限公司。

2 方 法

2.1 制剂制备及性状考察

称取处方量的氟尼辛葡甲胺原料置于一定量的注射用水中，不断搅拌，60 ℃水浴加热20 min，待氟尼辛葡甲胺充分溶解后，分别加入处方量的聚乙二醇-6000、聚维酮K-30、甘油、亚硫酸氢钠和EDTA-2Na，充分搅拌并60 ℃水浴加热至完全溶解，调pH 值为7.8～8.0，用注射用水定容，0.45 μm滤膜过滤，灌封，灭菌。

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液样品进行性状考察，参考2020 年版《中国兽药药典》二部附录溶液颜色和溶液澄清度检测方法，对氟尼辛葡甲胺注射液进行外观、颜色、澄明度和pH值检查。

2.2 含量测定

参考文献，采用高效液相色谱（HPLC）外标法测定[9]，用十八烷基键合硅胶为填充剂，以甲醇-水-冰醋酸（60∶39∶1）为流动相；检测波长为254 nm，流速1 mL·min-1，进样20 μL。

2.3 稳定性考察

2.3.1 强光照射试验

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液样品，置于（4 500±500）lx 光照强度下放置20 d，分别于第0、5、10、15 天和第20 天取一定量样品进行含量测定，分别考察氟尼辛葡甲胺注射液的性状、澄明度和pH值。

2.3.2 高温试验

取3批次氟尼辛葡甲胺注射液样品置于60 ℃条件下放置15 d，分别于第0、5、10 天和第15 天时取样测定氟尼辛葡甲胺的含量，并分别考察其性状、澄明度和pH值。

2.3.3 长期试验

取3 批次氟尼辛葡甲胺注射液样品室温放置0、30、60、120、180 d 后分别取样进行含量测定，并分别考察其性状、澄明度和pH值。

2.4 临床解热作用试验

取潍坊市某养猪场自然感染并发热、体温在40 ℃以上、体重60 kg左右育肥猪20头，随机分为A、B组。其中A组按2.0 mg·kg-1（以氟尼辛葡甲胺计）肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液，B 组为空白对照组，不给予药物治疗。药物注射后分别于3、6、9、12 小时测定直肠温度，记录数据并进行分析。健康猪体温38～39.5 ℃。

3 结果与分析

3.1 氟尼辛葡甲胺注射液性状考察

本试验制备的氟尼辛葡甲胺注射液为淡黄色澄清透明液体，无纤维、颗粒色块等可见异物，pH值为7.8～9.0，性状符合2020版《中国兽药典》注射液性状要求，合格率100%，3批次性状考察结果见表1。

表1 氟尼辛葡甲胺注射液性状考察

3.2 氟尼辛葡甲胺注射液含量测定

目前市场销售的氟尼辛葡甲胺注射剂规格多为10 mL，0.5 g；含量为5%，本试验制备的氟尼辛葡甲胺注射剂规格为50 mL，5.0 g；含量为10%，试验采用高效液相色谱法对3个批次的制剂含量进行了测定，结果见表2，药物含量在为（99.54±1.17）～（102.24±0.96）mg·mL-1，含量在标示量的95%～105%的区间，符合注射剂含量一般要求。

表2 氟尼辛葡甲胺注射液样品含量测定结果 mg·mL-1

3.3 氟尼辛葡甲胺注射液稳定性考察

3.3.1 强光照射试验

氟尼辛葡甲胺注射液在（4 500±500）lx 光照强度下10 d，外观性状、澄明度、pH 值和含量均无明显变化，但到第15 天后，氟尼辛葡甲胺制剂的颜色加深，结果见表3。表明该制剂在强光照下会发生颜色变化，因此该制剂存储及运输过程中应尽量避免强光照射。

表3 氟尼辛葡甲胺注射液强光照射试验结果

3.3.2 氟尼辛葡甲胺注射液高温试验

3个批次的样品在60 ℃条件下放置10 d，外观性状、澄明度、pH值和含量均无明显变化，到15 d后氟尼辛葡甲胺注射液颜色变深，相对含量下降，结果见表4。表明该制剂在长期高温下放置发生分解。

表4 氟尼辛葡甲胺注射液高温试验结果

3.3.3 氟尼辛葡甲胺注射液长期试验

氟尼辛葡甲胺注射液在室温放置180 d，3 个批次的氟尼辛葡甲胺注射液的含量变化不明显，制剂外观、澄明度及pH 值均符合规定，在长期试验中未观察到结晶现象，结果见表5。说明该制剂在室温下长时间放置性质稳定。

表5 氟尼辛葡甲胺注射液长期试验结果

3.4 临床解热作用试验

健康猪体温为38～39.5 ℃，试验A 组猪肌肉注射试验制备的氟尼辛葡甲胺注射液3 h 后，有4头猪的体温为38～39.5 ℃，注射药物6 h后有9头猪体温为38～39.5 ℃，12 h 后10 头猪体温全部为38～39.5 ℃，全部试验猪体温恢复正常，见表6。B 组为对照组，9 头猪未经药物治疗，12 h后体温超过39.5 ℃。从试验结果来看，发热猪经肌肉注射氟尼辛葡甲胺注射液12 h 后，体温能够恢复正常，这说明本研究制备的氟尼辛葡甲胺注射液对猪的发热症状具有解热作用。

表6 氟尼辛葡甲胺注射液临床解热作用试验结果

4 结论

本研究制备的氟尼辛葡甲胺注射液为淡黄色均一透明液体，pH值7.8～9.0；性状和含量符合注射剂的一般要求；该制剂室温放置性质稳定，在强光照下颜色发生变化，高温60 ℃条件下放置15 d 后相对含量下降，临床试验结果显示对猪发热症状具有解热作用。