胶质瘤CMTM 1、CMTM 6的表达及其临床意义

黄晓东 严立冬 杨明环 李 丹 杨博文 张 力 黄宽明 鲁军体

胶质瘤是颅内最常见的原发性恶性肿瘤，多呈浸润性生长，预后较差[1，2]。研究发现肿瘤的发生及进展与免疫系统受损有关。程序性死亡受体1（programmed death receptor-1，PD-1）/程序性死亡受体配体1（programmed death ligand-1，PD-L1）信号通路是肿瘤细胞逃避免疫系统攻击的重要途径，而趋化素样因子超家族（CKLF- like MARVEL transmembrane domain-containing family，CMTM）6 蛋白可减少PD-L1降解，促进免疫逃逸[3]。姚战非等[4]发现人黑素瘤血管内皮生长因子A、B 的表达上调，而CMTM1 是影响其表达的重要基因。本文探讨胶质瘤组织CMTM6、CMTM1 表达变化及其临床意义，为胶质瘤诊治提供参考。

1 资料与方法

1.1 标本来源 选择2016 年1 月至2019 年6 月手术切除的胶质瘤标本96例，选择同期颅脑损伤内减压术中获得非肿瘤脑组织40 例为对照。胶质瘤组男51 例，女45 例；年龄30～62 岁，平均（45.06±12.65）岁。对照组男23 例，女17 例；年龄32～64 岁，平均（48.92±10.78）岁。本研究方案获应用伦理委员会批准。纳入标准：术后病理诊断为胶质瘤，年龄≥18岁；首次因胶质瘤就诊；既往无放疗、化疗史；精神状态正常；知晓研究内容，签署同意书。排除标准：脑胶质瘤复发入院；术前出现肿瘤卒中、脑疝等；术前行放疗、化疗；合并其他原发性肿瘤；有自身免疫性疾病、脑膜炎、脑血管病、血液系统病等病史。

1.2 检测方法 采用免疫组化法检测组织CMTM1、CMTM6的表达水平，根据说明书操作。染色结果评估[5]：随机选择10 个高倍视野（×400），以胞质、胞浆内出现棕色、棕褐色染色，则判定为阳性。①阳性细胞占比：≤5%为0 分，6%～25%为1 分，26%～50%为2分，51%～75%为3 分，＞75%为4 分。②染色程度评估：无染色为0 分，黄色为1 分，棕色为2 分，深棕色为3 分。二者乘积为最终分值，总分＜2 分为低表达，≥2 分为高表达。根据Envision 二步法测定异柠檬酸脱氢酶1（isocitrate dehydrogenase 1，IDH1）突变情况，常规根据说明书操作，随机选择5 个高倍视野，观察染色阳性率，若染色阳性率＞10%，则判定为IDH1突变，否则为未突变。

1.3 随访 术后随访24个月，记录病人生存情况。

1.4 统计学方法 采用SPSS 20.0软件分析；计量资料以x±s表示，行t检验；计数资料采用χ2检验；采用Spearman 相关系数分析相关性；利用多因素Cox 比例回归风险模型分析胶质瘤预后危险因素；采用生存曲线分析CMTM1、CMTM6 的表达水平与胶质瘤病人生存预后的关系；P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胶质瘤组织CMTM1、CMTM6 的表达 胶质瘤组CMTM1和CMTM6高表达率[分别为64.58%（62/96）、67.71%（65/96）]明显高于对照组[分别为25%（10/40）、20.00%（8/40）；P＜0.01]。胶质瘤组织CMTM1与CMTM6表达水平呈正相关（r=0.837，P＜0.001）。

2.2 胶质瘤预后的影响因素 本文96例随访2年，死亡37例，生存59例。多因素Cox比例回归风险模型分析显示，WHO分级Ⅲ～Ⅳ级、肿瘤直径≥5 cm、肿瘤未全切除及CMTM1 高表达、CMTM6 高表达是胶质瘤预后不良的独立危险因素（P＜0.05，表1），术后放/化疗、IDH1突变是预后保护因素（P＜0.05，表1）。

表1 Cox回归分析胶质瘤病人预后影响因素

2.3 胶质瘤组织CMTM1、CMTM6表达水平与病人生存的关系 生存曲线分析显示，CMTM1、CMTM6高表达组2 年累积生存率（分别为50.15%、52.05%）明显低于表达组（分别为79.85%、84.95%；图1；P＜0.05）。

图1 生存曲线分析胶质瘤组织CMTM1、CMTM6表达水平与病人生存的关系

3 讨论

胶质瘤手术预后并不理想。研究表明肿瘤细胞侵袭、进展过程受多种信号分子与蛋白调控[6]。CMTM家族参与口腔鳞癌、肝癌、肺癌等多种恶性肿瘤进展，CMTM1 影响肿瘤细胞增殖，促进肿瘤发生[7]。丁雨等[8]发现肺腺癌临床分期以及远处转移与CMTM6表达状态有关。研究表明CMTM1可以通过激活β-连环蛋白信号通路，在肿瘤的发生、发展过程中发挥重要作用。此外，CMTM1 高表达，能激活Lyn原癌基因，促进肿瘤进展[9]。CMTM6是调控PDL1 的关键因子，能帮助PD-L1 参与肿瘤免疫逃逸，从而促进肿瘤进展[10]。本文发现胶质瘤组织CMTM1、CMTM6 呈高表达，且呈正相关。这提示CMTM1与CMTM6高表达，二者相互影响，参与胶质瘤发生。本研究结果显示CMTM1、CMTM6 高表达是胶质瘤生存预后不良的危险因素，而且CMTM1、CMTM6 高表达胶质瘤病人2 年累计生存率明显降低。这提示CMTM1与CMTM6高表达参与胶质瘤的进展，与病人不良预后有关。

总之，胶质瘤组织CMTM1、CMTM6 呈高表达，与病人的不良生存预后有关。