氟啶胺在马铃薯和土壤中的残留及安全使用评价

李如美，王英华，李瑞娟，刘同金，梁 慧，于建垒*

（1.山东省农业科学院植物保护研究所，山东省植物病毒学重点实验室，济南 250100；2.山东省农业科学院试验基地服务中心，济南 250100）

马铃薯是世界上第四大粮食作物[1]，中国作为马铃薯生产消费第一大国，2015年我国正式启动马铃薯主粮化战略[2]。目前马铃薯晚疫病作为全球第一大病害，每年都会给全球带来巨大的经济损失[3]。氟啶胺是一种低毒、广谱、高效的吡啶胺类杀菌剂，同时也是一种线粒体氧化磷酸化解偶联剂，可通过影响氧化磷酸化过程达到杀灭病菌的作用。目前已有研究表明，氟啶胺对马铃薯晚疫病、铁皮石斛灰霉病、鳄梨白根腐病、大白菜根肿病等均具有良好的防效[4-9]。

农药残留联合专家会议（JMPR）在2018年的报告中指出将植物源中氟啶胺残留定义为氟啶胺，报道其检测方法有液相色谱法、大气压电离源气相色谱-串联质谱法及超高效液相色谱-串联质谱法等[10-13]。目前关于氟啶胺在马铃薯上的最大残留限量（MRL）美国规定为0.02 mg/kg，欧盟规定为0.02 mg/kg，韩国规定为0.05 mg/kg，澳大利亚规定为0.02 mg/kg，日本规定为0.1 mg/kg，国际食品法典委员会（CAC）尚未规定MRL值。在中国，氟啶胺已在大白菜、马铃薯、黄瓜和苹果等作物上登记，并制定其MRL值为0.5 mg/kg[14]。但是，氟啶胺在马铃薯上的残留行为报道较少。本研究进行了氟啶胺在马铃薯上和土壤中的消解和最终残留试验，旨在为该药剂在马铃薯上的安全使用提供合理建议。

1 材料与方法

1.1 仪器与试剂

Waters 2695-2489高效液相色谱仪配紫外吸收检测器，沃特世科技有限公司；高速匀浆机、旋转蒸发仪，德国IKA公司；Z326K高速冷冻离心机，德国赫姆勒公司；SQP百分之一电子天平、BSA224S-CW万分之一电子天平，赛多利斯科学仪器有限公司。

甲醇、乙腈为色谱纯，美国TEDIA公司；氯化钠、正己烷、二氯甲烷、乙酸乙酯为分析纯，国药集团化学有限公司；弗罗里硅土小柱，安捷伦科技有限公司。

1.2 试验材料

供试马铃薯品种分别为‘鲁育803’‘双丰5号’。

供试药剂：氟啶胺标样（纯度96.0%），江阴苏利化学股份有限公司；50%氟啶胺水分散粒剂、50%氟啶胺水分散粒剂，江阴苏利化学股份有限公司。

1.3 田间试验方法

参照NY/T 788—2018《农作物中农药残留试验准则》[15]要求，试验于2019和2020年在山东和安徽省进行。试验包括最终残留试验和消解动态试验2部分。样本采集、样品制备、储存等按照《农药登记残留田间试验标准操作规程》[16]执行。

1.3.1 消解动态试验

马铃薯植株消解动态试验。于马铃薯生长期，施药时应保证用于动态试验的马铃薯植株均匀着药。施药剂量为375 g a.i./hm2，每个处理重复3次，处理间设保护隔离区，另设清水空白对照，施药后2 h，1、3、7、14、21、28、35 d采样。

土壤消解动态试验。在试验基地中选一块50 m2的地块，单独施药，施药剂量为375 g a.i./hm2，施药后2 h，1、3、7、14、21、28、35、50 d采样，另设清水空白对照。

马铃薯植株样本的采集。在试验小区内按棋盘式分布采集10～15株上的茎叶，每株分别按上、中、下采集3～6片有代表性的叶片，每小区采样量不少于500 g，将采集的叶片叠放整齐，装入样本容器中，贴好标签，带回实验室处理。

1.3.2 最终残留试验

设2个施药剂量：低剂量和高剂量。低剂量按250 g a.i./hm2，高剂量按375 g a.i./hm2施药。每个剂量均施药3、4次，每个处理设3次重复，小区面积为50 m2，在马铃薯生长后期喷药。另设清水空白对照，处理间设保护带。

马铃薯块茎样本的采集。采样时间为马铃薯收获期，在试验小区内按棋盘式分布采样，在距离马铃薯秧约5 cm处用铁锹将下部块茎翻出，拔下，抖掉块茎上的泥土。每小区采9点，采集茎块不小于2 kg，装入样本容器中，贴好标签，带回实验室处理。

1.4 分析方法

1.4.1 提取与净化

马铃薯植株及块茎：称取处理好的马铃薯10.0 g于50 mL离心管中，加入5 mL水，混匀，再加入10 mL乙腈，匀浆2 min，再加入7 g氯化钠，涡旋1 min，12 000 r/min离心5 min，取4 mL上清液转移至50 mL离心瓶中，在60℃下浓缩至近干，加入2 mL正己烷-二氯甲烷（95∶5，V/V）溶解，待净化。

用5 mL正己烷-二氯甲烷（95∶5，V/V）预淋弗罗里硅土小柱，当溶液到达吸附层表面时，立即倒入待净化液，用10 mL正己烷-二氯甲烷（95∶5，V/V）洗脱，弃去，再用20 mL正己烷-二氯甲烷（80∶20，V/V）洗脱收集。在40℃下浓缩至近干，用甲醇定容至4 mL，过0.22μm滤膜，待测。

土壤：称取土壤样品10.0 g，加入乙酸乙酯30 mL，超声提取15 min，以上操作重复3次后，过滤于平底烧瓶中，浓缩至干，用甲醇溶液定容至10 mL，过0.22 μm微滤膜，待测。

1.4.2 检测条件

Waters 2695-2489高效液相色谱仪，紫外吸收检测器；色谱柱：ODS-C18液相色谱柱（150 mm×4.6 mm，5μm）；吸收波长：239 nm；柱温：30℃；进样量：20μL；流速：1 mL/min；流动相：A相为甲醇，B相为蒸馏水；流动相采用梯度洗脱程序见表1。

表1 流动相梯度洗脱程序

2 结果与分析

2.1 标准曲线绘制

配置0.05、0.10、0.50、1.00、5.00 mg/kg 5个不同质量浓度的氟啶胺标准品，采用外标法峰面积定量，在1.4.2色谱条件下做标准曲线。试验结果表明，氟啶胺进样质量浓度为0.05～5.00 mg/kg具有良好的线性关系，直线回归式为y=57 935x-759.07，相关系数为R2=1.00。

2.2 方法灵敏度、准确度及精密度

在1.4.2色谱条件下，氟啶胺最小检出量为0.1 ng；氟啶胺在马铃薯植株、块茎和土壤中的最低检测浓度均为0.05 mg/kg。

马铃薯植株、块茎和土壤样品的添加水平均为0.05、0.5、5 mg/kg。氟啶胺在马铃薯植株、块茎和土壤中的添加回收率分别为88.7%～95.8%、83.6%～101.9%和88.4%～107.3%，相对标准偏差分别为0.091%～1.3%、0.052%～2.2%和0.093%～1.2%。本方法有较好的准确度及精密度，符合农药残留检测要求[15]。

2.3 氟啶胺在马铃薯植株和土壤中残留消解动态

2019年试验，氟啶胺在山东地区马铃薯植株中的半衰期为3.4 d，药后21 d消解达99.0%，氟啶胺在安徽地区马铃薯植株中的半衰期为3.8 d，药后21 d消解达98.4%；2020年试验，氟啶胺在山东地区马铃薯植株中的半衰期为3.7 d，药后21 d消解达98.6%，氟啶胺在安徽地区马铃薯植株中的半衰期为5.8 d，药后21 d消解达93.5%（表2）。总趋势基本一致，消解动态符合一级动力学方程，消解速度较快。

表2 2019、2020年氟啶胺在马铃薯植株中的残留消解动态

2019年试验，氟啶胺在山东地区土壤中的半衰期为6.7 d，药后28 d残留量未检出（＜0.05 mg/kg），氟啶胺在安徽地区土壤中的半衰期为11.6 d，药后28 d消解达85.7%；2020年试验，氟啶胺在山东地区土壤中的半衰期为6.5 d，药后28 d残留量未检出，氟啶胺在安徽地区土壤中的半衰期为10.0 d，药后28 d残留量未检出（表3）。总趋势基本一致，消解动态符合一级动力学方程，消解速度较快。

表3 2019、2020年氟啶胺在土壤中的残留消解动态

2.4 氟啶胺在马铃薯块茎及土壤中的最终残留量

2.4.1 马铃薯块茎中最终残留量

50%氟啶胺水分散粒剂施药剂量为250 g a.i./hm2时，3、4次药后7、14、21d马铃薯块茎中氟啶胺残留量均未检出（＜0.05 mg/kg）；50%氟啶胺水分散粒剂施药剂量为375 g a.i./hm2时，3、4次药后7、14、21 d马铃薯块茎中氟啶胺残留量均未检出。对照区样品中残留量均未检出。

2.4.2 土壤中最终残留量

50%氟啶胺水分散粒剂施药剂量为250 g a.i./hm2时，3、4次药后7、14、21 d土壤中氟啶胺残留量为0.052～0.209 mg/kg；50%氟啶胺水分散粒剂施药剂量为375 g a.i./hm2时，3、4次药后7、14、21 d土壤中氟啶胺残留量为0.124～0.431 mg/kg。对照区样品中残留量均未检出（＜0.05 mg/kg）。

3 结论与讨论

氟啶胺进样量在0.05～5.00 mg/kg之间线性关系良好，氟啶胺的最小检出量为0.1 ng，本方法有较好的灵敏度，符合农药残留检测要求。

50%氟啶胺水分散粒剂用于防除马铃薯晚疫病时，在马铃薯植株中的半衰期为3.4～5.8 d，药后21 d消解93.5%以上，在土壤中的半衰期为6.5～11.6 d，药后28 d消解85.7%以上，消解动态均符合一级动力学方程。总体来说，氟啶胺在马铃薯和土壤中消解速度较快。

根据GB 2763—2019，氟啶胺在马铃薯上最大残留限量为0.5 mg/kg，据2019—2020年山东、安徽残留试验结果，50%氟啶胺水分散粒剂用药量为250～375 g a.i./hm2，于马铃薯生长后期连续喷药3～4次，最后1次施药后7、14、21 d收获的马铃薯块茎中氟啶胺的残留量均未检出（＜0.05 mg/kg）。推荐50%氟啶胺水分散粒剂用于防治马铃薯晚疫病，最高用药量为250 g a.i./hm2，于马铃薯晚疫病发生初期，喷药3次，安全间隔期为14 d较为合适。