50%酰嘧磺隆水分散粒剂高效液相色谱分析方法研究

王诗雨，宋 朋，高胜健，张保建，赵广义*

(1.中国农业大学理学院，北京 100193；2.山东威瑞信试验检测有限公司，山东 济南 250119)

1 前言

酰嘧磺隆英文名称：Amidosulfuron，CAS号：120923-37-7，分子式：C9H15N5O7S2，化学名称：3-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)-1-(N-甲基-N-甲基磺酰氨基磺酰)-脲。酰嘧磺隆是一种选择性内吸除草剂，被叶面和根系吸收后传导至植株全身，抑制植物生长，开始是顶向，然后是根向出现萎斑。主要用于用于冬小麦、硬质小麦、大麦、黑麦、黑小麦、燕麦等作物苗后防除多种阔叶杂草尤其是猪殃殃。酰嘧磺隆在土壤中易被土壤微生物分解，不易在土壤中残留积累，在推荐剂量下，对当茬麦类作物和下茬作物安全。

目前国内有关酰嘧磺隆水分散粒剂的分析方法未见公开报道。本文采用高效液相色谱法对50%酰嘧磺隆水分散粒剂进行定量分析，该方法操作简便快捷，分离效果好，精密度和准确度均能达到定量分析的要求。

2 试验部分

2.1 试剂和溶液 乙腈(色谱纯)；超纯水(电阻率18.2MΩ·cm，25℃)；磷酸(分析纯)；磷酸溶液：ψ(磷酸:水)=1:1 000；酰嘧磺隆标样，已知质量分数99.7%；50%酰嘧磺隆水分散粒剂。

2.2 仪器 高效液相色谱仪：日立Primaide，具有二极管阵列检测器和自动进样器；日立色谱工作站；色谱柱：250mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色谱操作条件 流动相：ψ(乙腈:磷酸溶液)=50+50(V/V)；流量：1.0mL/min；柱温：30±2℃；检测波长：254nm；进样体积：10μL；保留时间：酰嘧磺隆约5.7min。典型的酰嘧磺隆标样和50%酰嘧磺隆水分散粒剂的高效液相色谱图(图1、2)。

图1 酰嘧磺隆标样高效液相色谱图

图2 50%酰嘧磺隆水分散粒剂高效液相色谱图

2.4 测定步骤

2.4.1 标样溶液的配制 称取0.05g酰嘧磺隆标样(精确至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超声波振荡5min，冷却至室温，用乙腈稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀。

2.4.2 试样溶液的配制 称取含酰嘧磺隆0.05g的试样(精确至0.0001g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超声波振荡5min，冷却至室温，用乙腈稀释至刻度，摇匀。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，过滤。

2.4.3 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针标样溶液的响应值相对变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

2.4.4 计算 将测得的2试样溶液以及试样前后2针标样溶液中酰嘧磺隆峰面积分别进行平均。试样中酰嘧磺隆的质量分数ω(%)，按式(1)计算：

(1)

式中：

A1——标样溶液中酰嘧磺隆峰面积的平均值；

A2——试样溶液中酰嘧磺隆峰面积的平均值；

m1——标样的质量，g；

m2——试样的质量，g；

P——标样中酰嘧磺隆的质量分数，%。

3 结果与讨论

3.1 色谱条件的选择 通过日立Primaide高效液相色谱仪的光谱数据采集功能，获得酰嘧磺隆的紫外波长扫描图(图3)。从图中可以看到酰嘧磺隆最大吸收波长在235nm～260nm处，为了提高灵敏度，减少干扰，满足分析的要求，故将检测波长确定为254nm。

图3 酰嘧磺隆的紫外光谱图

色谱柱选择250mm×4.6mm(i.d.)ZORBAX SB-C18、5um的不锈钢柱。根据酰嘧磺隆物化性质和溶剂的紫外吸收波长，选择乙腈作为溶剂溶解样品，并以乙腈和水作为流动相，为了得到更好的分离效果和峰形，在1 000mL水里加入1mL磷酸。将流动相按不同比例在色谱柱上进行试验，随着乙腈比例的增加，保留时间减小，当乙腈与0.1%磷酸水溶液比例达到55 : 45时，有杂质峰干扰，峰纯度达不到试验要求，最终选择Ψ(乙腈: 0.1%磷酸水溶液)=50: 50作为流动相，流速1.0mL/min。该条件下，酰嘧磺隆色谱峰峰形较好，与杂质能完全分离，具有良好的精密度和准确度，并且分析时间较短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特异性试验 将2.4.1、2.4.2配制的酰嘧磺隆标样溶液和试样溶液，在上述色谱操作条件下进行全波段扫描、峰纯度分析。结果表明标样溶液和试样溶液中酰嘧磺隆峰纯度均>990，有效成分出峰处无其他物质干扰，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的线性相关性试验 称取0.05g酰嘧磺隆标样(精确至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超声波振荡5min，冷却至室温，用乙腈稀释至刻度，摇匀。用移液管移取3、4、5、6、7mL上述溶液，分别置于50mL容量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，配置成5个不同浓度的标准溶液。在上述色谱操作条件下进行分析，以酰嘧磺隆质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标绘制标准曲线(图4)，得到酰嘧磺隆线性回归方程为y=70 299x+25 791，线性相关系数为0.999 9。

图4 酰嘧磺隆线性关系图

3.4 分析方法的精密度试验 从同一产品中准确称取5个试样，在上述色谱操作条件下进行分析，测得酰嘧磺隆的标准偏差为0.23，变异系数为0.47%(表1)。

表1 分析方法的精密度试验结果

3.5 分析方法的准确度试验 从已知质量分数(48.99%)的酰嘧磺隆水分散粒剂中称取5个试样，分别加入一定量的酰嘧磺隆标样(99.7%)，在上述色谱操作条件下进行分析，测得酰嘧磺隆的平均回收率为99.90%(表2)。

表2 分析方法的准确度试验结果

4 结论

本文建立了酰嘧磺隆水分散粒剂有效成分含量测定的高效液相色谱分析方法，试验结果表明，本方法分离效果好、线性关系良好，具有较高的精密度和准确度，分析操作简便快捷，是酰嘧磺隆水分散粒剂产品质量控制较为理想的分析方法。