茶叶基质对胆碱酯酶活性干扰水平的研究进展

郑芹芹 金莉莉 吴正浩 陈红平 郝振霞 鲁成银

摘要：基于酶抑制法的农药残留快速检测技术具有简单、快速、易操作、成本低等优点，在基质成分较为简单的蔬菜、水果样品的质量安全快速筛查和监管中发挥了重要作用。然而，在对茶叶样品的检测中，该方法的速测结果普遍呈强（假）阳性，且检測结果与实际农药含量水平无关，严重阻碍了其在茶叶样品检测中的应用。明确茶叶样品中基质对胆碱酯酶干扰的来源、水平与机理是解决这一难题的理论基础。文章综述了茶叶基质成分对胆碱酯酶活性干扰水平的研究进展，同时包含了近年来茶叶功能性成分通过抑制胆碱酯酶活性在阿尔茨海默症（AD）治疗中应用的研究内容。

关键词：酶抑制法;茶叶;基质干扰;胆碱酯酶;农药残留;快速检测

Research Progress on the Interference Level of

Tea Matrix on Cholinesterase Activity

ZHENG Qinqin1， JIN Lili2， WU Zhenghao1，3， CHEN Hongping1，4， HAO Zhenxia1，4*， LU Chengyin1，4*

1. Tea Research Institute， Chinese Academy of Agricultural Sciences， Hangzhou 310008， China;

2. Changzhou Industrial and Consumer Goods Inspection Co.， Ltd.， Changzhou 213000， China;

3. Graduate School of Chinese Academy of Agricultural Sciences， Beijing 100081; 4. Quality and Safety

Risk Assessment Laboratory of Tea Products， Ministry of Agriculture and Rural Affairs， Hangzhou 310008， China

Abstract： The rapid detection of pesticide residues based on enzyme inhibition assay presents the merits of simplicity， rapidity， easy-operation and low cost. It has played an important role in screening and supervision of the quality and safety of vegetable and fruit samples. However， when applied on tea sample detections， false positive results are easily obtained and the results have nothing to do with the actual pesticide residue level， which prevents the application in real samples. Identification of the source， level and mechanism of matrix interferences with cholinesterase in the tea samples is the theoretical basis for solving this problem. This article reviewed the research progress of tea matrix components on the interference of cholinesterase activity， as well as recent researches on the application of tea functional components in the treatment of Alzheimer's disease （AD） through inhibiting cholinesterase activity.

Keywords： enzyme inhibition assay， tea， matrix interference， cholinesterase， pesticide residues， rapid detection

茶叶被誉为“世界三大饮料”之一，具有较高的经济和健康价值。近年来，茶叶中的农药残留问题引起越来越多的关注。对消费者而言，尽管茶叶例行监测的平均合格率已达到98%[1]，但2%的不合格率依然是痛点问题;在企业层面，由于常规仪器检测无法及时动态追踪茶鲜叶的农药残留水平[2]，导致对生产原料的监控困难，产品质量难以有效保证。农药残留快速检测技术对于保障茶叶质量安全及茶产业健康发展有着重要意义。酶抑制法是目前为止发展最为成熟、应用最为广泛的农残速测技术，其利用有机磷和氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶（以乙酰胆碱酯酶AChE和丁酰胆碱酯酶BChE为主）的抑制作用进行定性和定量检测，当样品中不含有这两类农药成分时，胆碱酯酶可以正常催化、水解底物生成一定量的产物，显现出颜色信号[3]或电化学信号[4];而当待测样品中含有农药时，胆碱酯酶活性受到农药的抑制而难以正常催化、水解底物，致使相应的检测信号减弱甚至消失。酶抑制法通过直观的信号变化即可判断样品中的农药残留水平，由此减少了常规农残检测方法中对仪器、场地和专业检测人员的硬性需求，展现出了较强的灵活性和巨大的应用潜力，检测时间和成本大幅降低[5]，该方法在蔬菜、水果等简单基质样品中已广泛应用[6-8]。

随着研究深入，酶抑制法也被尝试应用于茶叶样品的速测中。但茶叶中含有较多生物活性成分，如茶多酚、咖啡碱等[9]，具有抗氧化、抑菌抑酶等生理活性[10-12]，对酶反应干扰严重，检测结果可靠性差[13-14]。因此，探究茶叶速测中基质干扰的具体来源及干扰机制是解决茶叶基质对酶抑制法速测产生干扰问题、实现可靠速测的研究基础。本文综述了不同茶叶基质成分对胆碱酶活性干扰的研究进展，以期为酶抑制法对茶叶样品的抗干扰速测研究提供理论参考，进一步为酶抑制法速测在复杂基质样品中的应用提供研究思路。

1  茶叶样品在酶抑制法农药残留速测中的基质干扰

茶叶样品在基于酶抑制法的农残速测中的假阳性现象近年来引起研究者的关注。赵超群[13]采用酶抑制法对比了茶鲜叶和成品茶的农残速测检测效果，结果显示茶鲜叶和成品茶的检测中均存在明显假阳性，并且茶鲜叶中敌敌畏、敌百虫的检出限（分别为0.07 mg/kg、0.32 mg/kg）低于成品茶（分别为0.28 mg/kg、1.26 mg/kg）。金莉莉[14]探究了不同茶叶基质成分对酶检测体系的具体影响，结果显示咖啡碱和（-）-表没食子儿茶素没食子酸酯（EGCG）对AChE活性呈现出明显的抑制作用，从原理上证实了这两种茶叶基质成分均会导致检测结果呈现假阳性。

为了减少基质成分对酶反应体系的干扰，提高酶抑制法在茶叶中检测的准确度，有研究者在将现有酶抑制法用于茶叶样品中的农残速测时，增加了溶剂置换、酸碱调节、脱色处理等较为繁复的样品前处理步骤[15-18]。在《茶中有机磷及氨基甲酸酯农药残留量的简易检验方法  酶抑制法》（GB/T 18625—2002）速测标准中[15]，茶叶样品也需经过有机溶剂提取、缓冲液复溶及提取液氧化、还原等步骤后才可以展开酶反应进行检测。黄敏[16]设计开发的茶叶中农药残留酶抑制速测卡，采用酸度调节剂使茶叶提取液pH值调节至4～5范围内，再用小柱层析后将收集到的滤液进行测试。针对茶叶色素的干扰，李彦杰[18]在基于单酯酶比色阵列系统检测茶叶农药残留的研究中提出了要对茶叶进行脱色处理。额外的前处理操作，在改善茶叶样品检测基质干扰的同时，也大大增加了操作的复杂性和专业程度，提高了方法及产品的使用门槛，无形中背离了快速检测的初衷。

目前，茶叶基质干扰是阻碍酶抑制法农残速测技术有效应用于茶叶检测的主要因素，探究茶叶中对酶反应干扰的具体基质成分及干扰原理对进一步解决酶抑制法农残速测应用中茶叶基质的干扰问题，实现可靠速测具有重要指导意义。

2  茶叶基质成分与胆碱酯酶的相互作用

胆碱酯酶主要分为AChE和BChE。其中AChE主要存在于动物的神经系统中，通过水解乙酰胆碱来终止神经递质对突触后膜的兴奋作用，保证神经信号在生物体内的正常传递。有机磷（OP）和氨基甲酸酯（CM）类杀虫剂通过抑制昆虫体内的AChE活性造成神经毒性，实现杀虫的目的。因而通过测定样品对胆碱酯酶的活性抑制程度，可以快速筛查样品中的农药水平。AChE是目前市面上绝大多数酶抑制法农残速测中所采用的生物酶，对其活性抑制水平的准确测定是该速测方法的关键。

目前关于茶叶基质对酶抑制法基质干扰的直接研究较少，文献检索发现，茶叶中所含的多种活性成分均可通過抑制AChE活性、降低神经递质乙酰胆碱的分解来治疗阿尔兹海默症（AD），因而科学家们进行了大量关于茶叶中活性成分与胆碱酯酶相互作用的研究，这些研究结果在解决AD治疗难题的同时，也为我们探究茶叶基质对酶抑制法检测干扰的原因提供了可靠数据[19-20]。

2.1  茶多酚对胆碱酯酶活性的影响

茶多酚是一类存在于茶树中的多元酚混合物，占茶叶干物质质量的18%～36%，是茶叶中重要的生物活性成分[9]。茶叶中的多酚类物质包括儿茶素、黄酮和黄酮醇类、花色素类、酚酸及缩酚酸类等，前3类化合物均具有2-苯基苯并吡喃的基本结构，统称为类黄酮化合物[21]。

茶多酚对胆碱酯酶表现出显著的抑制作用，且抑制水平与茶多酚浓度呈正相关。Kim等[22]发现茶多酚对失忆小鼠大脑中AChE活性具有明显的抑制作用，且茶多酚浓度越高，其对酶活性的抑制率也越大，酶活性被抑制一半时所需底物浓度（IC50）为248 μg/mL。Chung等[23]研究发现，茶多酚对人体神经母细胞瘤细胞中AChE的活性具有相似的抑制效果。

进一步研究中，研究者们运用Ellman方法筛选出对胆碱酯酶有抑制作用的具体多酚类化合物，同时进一步结合分子对接模拟实验、酶动力学、荧光滴定法等手段，从茶多酚类物质与酶的结合能值（Ea）、米氏常数（Km）、亲和力等角度研究茶多酚对胆碱酯酶的影响，证实了不同的多酚成分对胆碱酯酶的抑制作用。

2.1.1  儿茶素对酶活性的影响

儿茶素类物质是茶多酚的主体成分，占茶多酚总量的70%～80%，是茶叶的主要功能性成分[9]。根据分子结构的不同，茶叶中的儿茶素类化合物可以分为多种类型。其中EGCG、（-）-表没食子儿茶素（EGC）、（-）-表儿茶素-没食子酸酯（ECG）和（-）-表儿茶素（EC）为含量最高的4种儿茶素，分别约占儿茶素总量的59%、19%、13.6%和6.4%[24]。

在典型儿茶素对胆碱酯酶抑制作用的研究中，酯型儿茶素（如EGCG、ECG等）对AChE的抑制作用高于非酯型儿茶素（如EGC、EC等），其中EGCG呈现出最明显的抑制作用[25]。Meng等[26]基于Ellman方法筛查了13种茶叶成分对酶活性的影响，发现EGCG和ECG（来源于白毛茶）可明显抑制AChE活性，相应IC50值分别为0.124 μmol/L和0.102 μmol/L。Ali等[27]利用AutoDock 4.2软件进行了分子模拟实验，认为4种儿茶素单体（EGCG、EGC、ECG、C）均可抑制AChE 和BChE的活性。其中，EGCG与AChE、BChE结合所需的能量值最低（分别为-60.49 kJ/mol和-55.67 kJ/mol），ECG与两种酶的结合能值（分别为-59.77 kJ/mol和-50.15 kJ/mol）水平与EGCG相当，表明EGCG和ECG抑制两种酶活性的能力相近。Srividhya等[28]将EGCG与AChE进行分子对接计算，发现两者的结合自由能仅为28.17 kJ/mol，表明EGCG易与AChE结合，能够明显抑制AChE的活性。据Salazar等[29]报道，EGCG对人体红细胞膜上AChE活性的抑制作用较强，其IC50值为18.5 μmol/L。同时，酶反应动力学数据显示EGCG与AChE反应的Km值最低为3.707，与实验所测的IC50水平相符合。

除上述几种主要的儿茶素成分外，其他儿茶素成分对胆碱酯酶活性也具有一定的抑制作用。Mazumder等[30]通过计算模拟分子对接的方法研究了（+）-C、EC、EGC、EGCG 4种儿茶素分别与AChE、BChE的结合能力，并综合MolDoc和氢键两种效果评价，发现除EGCG表现为最强抑制效果外，其余3种儿茶素对AChE和BChE也有较强的抑制能力。Wang等[31]发现紫娟茶中3种羟基肉桂酰化的新型儿茶素（HCCs）对AChE具有较强的抑制作用，这3种新型儿茶素为表儿茶素3-O-咖啡酸酯（ECC）、表没食子儿茶素3-O-P-对香豆酸酯和表没食子儿茶素-3-O-阿魏酸酯，其抑制AChE的IC50值分别为2.49 μmol/L、11.41 μmol/L、62.26 μmol/L;分子模拟结果显示，ECC具有最低的结合常数（Ki）和结合能（Ea），抑制能力在这3种儿茶素中最强。

综合以上文献报道，酶反应动力学测定数据和分子对接模拟计算结果均显示，EGCG是儿茶素类物质中最强的胆碱酯酶抑制剂，其抑制酶活性的IC50值在0.124～18.5 μmol/L之间[26，29]（表1）;同时，EGCG也是茶叶中含量最高的儿茶素成分。所以，在酶抑制法测定茶叶中农药残留的研究和应用中，应首先考虑EGCG的干扰作用。此外，ECG（IC50=0.102 μmol/L）[26]对酶活性的影响也需纳入研究中，其他儿茶素类由于在茶叶中含量较少，抑制酶的能力相对较弱，在酶抑制法干扰研究中可作为次要考察因素。

2.1.2  黄酮及黄酮苷类对酶活性的影响

茶叶中的黄酮及黄酮苷类物质按化学结构可分为黄酮、黄酮醇和黄酮苷3类。黄酮在干茶中的含量约为0.7 mg/g，主要包括芹菜素和木犀草素[32];黄酮醇在干茶中的含量约为4 mg/g，主要有槲皮素（含量最高可达2.1 mg/g）、山奈素和杨梅素[32];黄酮苷类物质（由黄酮醇与糖结合形成）约占茶叶干重的0.8%[33]，主要有槲皮苷、山奈苷、芦丁等，其中槲皮苷含量最高[9]。

研究发现，黄酮及其苷类物质对胆碱酯酶表现出不同程度的活性抑制作用，其中槲皮素是黄酮类物质中最有效的胆碱酯酶抑制剂。Orhan等[34]通过Ellman方法测定目标物对酶的抑制率数据，发现槲皮素在1 mg/mL质量浓度下对AChE和BChE的抑制率分别为76.2%和46.8%。与胆碱酯酶标准抑制剂加兰他敏在相同浓度下对两种酶的作用效果（抑制率分别为99.8%和80.3%）相比较，认为槲皮素是AChE的有效抑制剂。另外，该研究中用同样的方法测定胆碱酯酶活性变化，发现茶叶中其他黄酮类物质对两种酶均无抑制作用。Ademosun等[35]在体外研究中观察到槲皮素和芦丁对AChE、BChE活性均显示出浓度相关的抑制作用。基于Ellman方法的改良分光光度法测定酶活性，研究了槲皮素和芦丁分别对AChE和BChE活性的影响水平，槲皮素對两种酶抑制的IC50值分别为0.181 mmol/L、0.203 mmol/L，芦丁的相应IC50值分别为0.219 mmol/L、0.288 mmol/L，两者对AChE和BChE活性均有明显的抑制作用，且槲皮素的酶抑制作用稍高于芦丁。Khan等[36]研究了4种黄酮类物质分别对AChE、BChE活性的影响，槲皮素抑制两种酶的IC50值分别为353.86 μmol/L、420.76 μmol/L，与前述报道结果相当;但芦丁对两种酶无明显抑制作用（在高浓度下对酶的抑制率低于50%）;酶反应动力学研究显示槲皮素对两种酶均表现出竞争性的抑制作用，槲皮素在AChE和BChE活性位点的对接计算中显示出较低的对接能值（-268.48 kJ/mol、

-281.92 kJ/mol）和结合能值（-1.59 kJ/mol、

-1.98 kJ/mol），此结果与酶活性测定结果相吻合。

黄酮类物质对酶的抑制作用与分子结构中的羟基数量有关，研究者们将分子对接结果与其结构相联系，总结了可能的构效关系。Katalinić等[37]使用分子对接模拟软件计算确定8种黄酮类化合物对BChE存在可逆抑制作用，抑制能力由大到小顺序为高良姜素（6.9 μmol/L）、芹菜素（37.4 μmol/L）、山奈素（43.1 μmol/L）、槲皮素（68.0 μmol/L）、杨梅素（71.0 μmol/L）、漆黄素（90.0 μmol/L）、木犀草素（166.1 μmol/L）、芦丁（501.2 μmol/L），由此推测类黄酮物质分子中侧苯基环上的-OH数量越少对BChE抑制作用越强。Xie等[38]用Ellman方法测定黄酮类物质抑制酶活性的水平，并通过荧光滴定法测定其与酶结合的亲和力，从分子结构角度解释了其对AChE的活性抑制能力。如表2所示，漆黄素5'（A环）位置上的羟基化使其抑制AChE活性作用增大了20.4倍，山奈素3'（B环）位置的羟基化使其对酶活性的抑制作用增大了6.3倍。黄酮类化合物A环和B环中的羟基增加了其与AChE的亲和力，使得其对AChE活性的抑制作用增强。

整体看来，虽然不同实验方法所得出的黄酮及其苷类对胆碱酯酶的抑制作用不同，槲皮素对AChE和BChE的抑制作用最强，IC50值分别为0.181～15.7 mmol/L和0.203～0.421 mmol/L。从构效关系上看，黄酮及其苷类物质B环上的羟基对其抑制AChE和BChE活性影响效果相反，以山奈素和槲皮素为例（山奈素比槲皮素在B环少1个羟基），山奈素对AChE抑制能力低于槲皮素，而对BChE抑制能力高于槲皮素[38]。

综合以上研究报道，在酶抑制法应用于茶叶中农残速测的研究中，黄酮类物质对结果的干扰情况应根据具体的酶反应体系加以判断;考虑到槲皮素是茶叶中含量最高的黄酮醇，可以选择受槲皮素影响小的酶体系，或者优先考虑选择性去除槲皮素成分以降低基质对检测结果的干扰。当综合考虑茶叶中的实际含量时，黄酮类物质对酶活性的影响应远小于儿茶素类成分。

2.1.3  酚酸和缩酚酸类对酶活性的影响

酚酸属于芳香族化合物，其分子中含有羧基和羟基，两分子的酚酸通过羧基与羧基之间的相互作用缩合形成缩酚酸[9]。茶叶中的酚酸类含量较少，主要包括没食子酸（含量0.5%～4.0%）、鞣花酸（含量0.1%～3.2%）、绿原酸（含量0.1%～0.4%）、咖啡酸和对香豆酸（含量均不超过0.02%），这5种酚酸类物质的总量在0.8%～5.0%之间[39]。酚酸类化合物具有茶多酚物质共有的生理功能，对茶叶品质也有重要的影响，如没食子酸可以参与儿茶素的氧化而形成茶黄素类物质[40]。

有研究报道指出，没食子酸可以中度抑制AChE的水解活性，IC50值为2.99 μmol/mL，其热水解产物邻苯三酚表现出更强的酶抑制作用，IC50值为0.18 μmol/mL，是没食子酸的抑制能力的16倍[25]。Akomolafe等[41]筛选了3种酚酸类物质，研究其对胆碱酯酶活性的影响，发现没食子酸对AChE几乎无抑制作用，在1 mg/mL质量浓度下对BChE有中度抑制作用，抑制率为48.8%;绿原酸和咖啡酸对AChE和BChE均无抑制作用;作者以咖啡酸饲喂大鼠后，测定大鼠大脑匀浆和大脑皮层中的AChE活性，试验结果证实咖啡酸单独给药对酶的活性无影响（与对照组相比）。

没食子酸是茶叶中含量最高的酚酸类物质，且目前的研究中，只有它表现出了对AChE和BChE活性的抑制作用。因此，在茶叶快速检测中只需排除没食子酸单一酚酸类干扰物质的影响。另外，酚酸类物质在茶叶中总体含量较低，而且整体对酶的抑制活性不明显，也可忽略其对检测体系中的酶干扰作用。

2.2  咖啡碱对酶活性的影响

咖啡碱又名1，3，7-三甲基黄嘌呤，属于嘌呤碱（即由1个嘧啶环和1个咪唑环稠合而成），是茶叶中含量最高的生物碱类化合物，占茶叶干重的2%～4%[9]。咖啡碱呈苦味，是影响茶叶滋味的重要理化成分之一，多存在于茶树的幼嫩芽叶中，其含量常被人们作为评判真假茶叶的重要指标之一[42]。

Fabiani等[43]研究发现红茶的甲醇提取物对AChE活性抑制的IC50值可达0.043 mg/mL，后用二氯甲烷萃取提取物，经色谱分离后组分3对酶活性的抑制作用最强，经鉴定该组分为咖啡碱。Okello等[25]试验测定咖啡碱体外抑制AChE（电鳗提取）的IC50为0.25 µmol/ml。Akomolafe等[41]给大鼠饲喂50 mg/kg咖啡碱，7 d后大鼠脑匀浆和大脑皮层中AChE活性分别被抑制16%、13%。

除了通过测定咖啡碱的胆碱酯酶活性抑制水平外，研究者们对咖啡碱的抑制机理也进行了探索，但不同实验室所得出的结论具有较大差异。Pohanka等[44]根据Dixon图判断咖啡碱是AChE和BChE的非竞争性抑制剂，其对AChE的Ki值是BChE近8万分之一（对两种酶的Ki分别为：175 µmol/L ± 9 µmol/L、13.9 mol/L ± 7.4 mol/L）;分子对接计算显示咖啡碱对AChE具有较低的结合能（−28.05 kJ/mol），因而咖啡碱可以有效抑制AChE的活性。Stoytcheva等[45]将牛红细胞中AChE固定在电化学生物传感器上，采用电化学方法分析抑制剂对酶的影响，其结果显示咖啡碱是AChE的有效竞争性抑制剂，Ki为0.75 µmol/L，约是标准抑制剂加兰它敏的2倍。

咖啡碱是AChE的有效抑制剂，但对BChE几乎无抑制作用。因而，在酶抑制法应用中可以通过酶源的筛选排除或降低检测样品中咖啡碱的基质干扰。另外，目前已有的文献报道中咖啡碱对AChE的抑制机理并无一致的结论，需要进一步研究探索。

2.3  茶叶提取物对酶活性的影响

茶叶提取物一般是由茶叶经过提取、过滤、浓缩、萃取、干燥、粉碎、过筛等制备工序而获得，主要成分包括茶多酚（EGCG、ECG、EC等）、少量的咖啡碱和没食子酸等[46]。

不同種类的茶叶提取物对胆碱酯酶均具有一定的抑制作用并呈现出浓度依赖性的抑制关系。Min等[47]通过Ellman方法实验测定，明确绿茶提取物（GTE）是酶的潜在抑制剂，在质量浓度为0.6 mg/mL时，其对固定化AChE的抑制率为54.6%。Mathiyazahan等[48]用基于ELISA方法测定大鼠的海马体和大脑皮层中AChE活性，与AlCl3处理的大鼠相比，红茶提取物（BTE）联合给药显著且剂量依赖性地抑制AChE活性。当实验组大鼠饮水中BTE添加量为3%时，大鼠海马体和大脑皮层中AChE活性最低。Okello等[25]采用Ellman比色法在96平底孔板上测定酶活性，结果显示GTE和白茶提取物（WTE）对AChE均有浓度相关的抑制作用，两者在实验最高质量浓度28.4 μg /mL时对AChE抑制率分别为80.4%、85.7%，IC50值分别为8.06 μg / mL和7.20 μg / mL。作者指出，GTE 和WTE本身含有相似水平的EGCG、ECG、可可碱和咖啡碱，但同时GTE含有较高水平的黄酮醇衍生物而WTE含有较高水平的葡萄糖衍生物。但它们化学成分的差异部分并没有显著影响其对AChE抑制。Okello等[49]还发现GTE和BTE对AChE和BChE活性的抑制效果与浓度水平正相关，且同浓度下抑制水平几乎相同，具体表现在两者对AChE和BChE抑制的IC50值相近。刘德等[50]研究了6种茶叶提取物对AChE的抑制作用，认为绿茶、红茶、乌龙茶、白茶等4种茶叶提取物对AChE的抑制率存在显著差异，结论与Okello等的研究结果不同。推测这两个实验室研究结果的差异可能由茶叶提取中所用溶剂不同，造成了实际获得的提取物成分组成具有较大差异。

3  总结与展望

基质干扰是目前茶叶样品农药残留速测中存在的主要问题，基质成分对胆碱酯酶活性的影响是造成这一问题的最重要的原因之一。茶多酚、咖啡碱等茶叶功能性成分与胆碱酯酶的相互作用在医学领域有比较深入的研究，值得在茶叶速测方法的研究中加以借鉴和应用。

茶叶基质成分组成复杂，茶多酚、生物碱等不同基质对胆碱酯酶活性具有不同的影响水平。其中，含量高且种类多的是多酚类物质。EGCG是茶叶多酚类物质的典型代表，其对胆碱酯酶（AChE、BChE）均具有显著的抑制作用。以咖啡碱为代表的生物碱类成分含量水平虽不及茶多酚，但是胆碱酯酶对其响应非常灵敏。咖啡碱能够有效抑制AChE的活性，而几乎对BChE无影响，且其抑制AChE活性的机理目前文献中尚无一致结论。因而，在解决茶叶样品酶抑制法农残速测中的基质干扰问题时，首先应考虑降低茶多酚（特别是EGCG）和咖啡碱的干扰作用，可在前处理中利用特定吸附剂选择性去除这两类基质成分。同时，也可考虑选择BChE体系检测以减少咖啡碱对检测体系的干扰。另外，已有研究中明确了茶叶基质与胆碱酯酶的分子结合位点，在具体的结合位点对酶进行一定的修饰，改变结合位点的氨基酸残基结构，也是抗干扰检测可尝试的研究思路之一。

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