鹅痛风病的诊断与防控

2022-03-08 11:04夏芳
现代农业科技 2022年4期
关键词:星状雏鹅痛风

夏芳

(芜湖市畜牧兽医管理服务中心,安徽芜湖 241000)

当机体代谢功能紊乱,或近期采食大量高蛋白时,会导致体内产生较多的尿酸盐,这是鹅发生痛风的一个重要原因。近期有研究表明,鹅感染星状病毒也是痛风发生的一个主要原因,并不是单纯的营养代谢性疾病所引起[1-2]。

星状病毒(astroviruses,AstV)是一种单股无囊膜的RNA病毒,根据宿主类型不同,可分为哺乳动物星状病毒和禽星状病毒,其中鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)属于禽星状病毒[3]。 近几年,GAstV 严重危害我国鹅养殖业,造成了严重的经济损失。该病毒主要侵染21 d内的小鹅,发病高峰在10 d前后,可致雏鹅精神沉郁、采食量减少或食欲废绝、关节肿大,甚至死亡,严重时其死亡率达30%甚至更高[4-7]。因此,亟须加强对鹅痛风病的诊断与防控。

2020年7月,安徽省芜湖市繁昌区一家养鹅场发生了一起关节肿胀、喙部尿酸盐沉积的疾病,怀疑是鹅痛风。笔者通过临床诊断结合实验室PCR诊断的方法,对疾病做出诊断,确认该疾病是鹅感染星状病毒以及饲料营养过剩所引起鹅痛风。笔者总结了诊断与防控过程,以期为基层兽医工作者在疾病诊断方面提供参考,从而更好地预防该疾病,减少鹅痛风疾病所带来的经济损失。

1 发病过程与临床症状

养鹅场位于芜湖市繁昌区内,目前鹅存栏量约1 000只。从4月底开始陆续发病,发病的大多数是雏鹅。询问诉主可知,小鹅瘟疫苗、免疫过鹅副黏病毒和禽流感灭活疫苗均已注射过,给雏鹅喂养肉鸡饲料。病鹅临床症状主要表现为神情低迷,采食量减退或食欲废绝,不喜走动,病情严重的会不自觉排白色粪便,严重的还出现死亡,场里发病较为严重。

2 剖检

剖检时在病死鹅的心脏、肝脏等地方可见清晰的尿酸盐沉积,在肾脏、肝脏表面可见白色斑点,是尿酸盐沉积所致,输尿管肿胀并向外扩张,有石灰样内容物,病鹅多处关节腔可见白色斑点。

3 诊断

结合诉主交代的发病经过,根据临床症状以及解剖情况,可初步诊断为鹅痛风。为进一步确诊,在无菌条件下采集发病雏鹅的肾脏、肝脏等器官进行实验室PCR检测。

3.1 病料采集

镊子无菌采集病死鹅的肾脏、肝脏,用生理盐水(NaCl)反复冲洗3次后,放入高压灭菌过的试管中,随后在-80℃冰箱下存放,送往实验室检测。

3.2 病毒核酸提取

将采集的适量病料放入含有青霉素和链霉素的磷酸盐缓冲生理盐水(PBS)中进行研磨,将研磨好的病料放入1.5 mL离心管中,反复冻融3次。之后使用离心机,在4℃条件下,设置转速为12 000 r/min,离心3 min。取300 μL上清液后,置于干净的1.5 mL EP管中,使用病毒核酸DNA/RNA试剂盒提取病毒RNA,试剂盒购于天根生化科技(北京)有限公司。之后使用反转录试剂盒进行反转录以获取病毒cDNA作为PCR模板。

3.3 RT-PCR检测

查阅文献可知该病毒的ORF2序列能够作为PCR检测的靶基因[8],对病毒进行PCR扩增,引物序列如下:上游引物F为5'-AGATAGACAGCAGGATT T-3';下游引物R为5'-CCTTGTCCAGTTGTATTC-3'。产物大小115 bp,引物由上海生工公司合成。PCR反应体系见表1。

表1 鹅星状病毒PCR反应体系

扩增程序如下:95℃预变性5 min,95℃变性30 s,60℃退火 30 s,72℃延伸 10 s,共计 35个循环,72℃延伸5 min。扩增产物用1.5%琼脂糖凝胶,电泳条件为恒定电压110 V,时间30 min,之后使用凝胶成像仪进行观察。

3.4 RT-PCR检测结果

以提取的病毒DNA为模板,利用合成的引物成功扩增出明亮的115 bp大小的目的片段,与预期相符(图1)。PCR产物送公司测序,证实有鹅星状病毒感染。结合临床症状以及实验室PCR诊断可确认该养殖场患有鹅痛风。

4 发病原因

4.1 饲料因素

饲料中鹅能食用的蛋白质含量为16%~18%,有些养殖场为了加快雏鹅生长,会投喂鸡饲料,但鸡饲料中的蛋白质含量与鹅所需要的蛋白质含量不同,其蛋白质量一般在21%以上,会造成雏鹅摄入过多的蛋白质,机体无法代谢,在鹅体内大量堆积,尿酸盐沉积在内脏及骨骼上,从而出现痛风。

4.2 环境因素

当饲养管理不当、通风不良、饲养密度过大时会造成舍内有害气体浓度升高,导致雏鹅抵抗力下降、环境中病原菌大量繁殖,严重影响雏鹅健康发展,加重了痛风的发病率。

5 防控措施

5.1 切断传播途径

目前,市面上尚未研究出预防GAstV的疫苗以及药物,主要采取以预防为主的措施防控GAstV。采取封闭式的饲养环境,与此同时完善防疫流程,实施全进全出制度。根据GAstV的传播方式,定期消毒,及时对粪便进行清理,确保有一个良好的卫生环境。养鹅场要保持良好的通风环境,需要定期换气,防止氨气、硫化氢等有害气体累积,以免降低雏鹅抵抗力。对进出养鹅场的外来车辆、外来人员严格消毒,消毒隔离后方可进入养殖场。对于引进的雏鹅应隔离观察2周后,若无异常,方可合栏,避免外界的病原体进入养殖场,切断传染源。若发现疑似病例,及时进行消毒隔离,防止该病传播,并限制人员进出鹅舍,对养鹅场的地面、水线等进行消毒,对患病鹅接触过的垃圾、粪便做到无害化处理,从根源上切断传播途径,并对发病鹅采取相应的治疗方案。

5.2 加强饲养管理

鹅的每个生长阶段对营养的需求均有差异,饲养者需合理调整饲料搭配,确保饲料营养全面,禁止喂养鸡饲料,不随意提高饲料中蛋白质和钙的含量。蛋白质含量应控制在16%~18%,雏鹅才能排出尿酸等代谢产物,避免其在体内积累,防止痛风发生。同时应保障饮水充足,发现霉变饲料尽早丢弃,增加青绿饲料在饲喂料中的百分比。饲养密度不能太大,使雏鹅有充足的活动空间,加强雏鹅运动,以此提高雏鹅对疾病的抵抗力。这些措施可以降低营养代谢型痛风的发病率。

6 结语

2017年以来,随着鹅饲养量的增加,我国部分地区陆续大范围出现鹅痛风病例,各品种鹅(如长乐灰鹅、扬州白鹅、皖西白鹅等)均有发生[2,9]。患有鹅痛风的雏鹅多表现为运动迟缓、食欲减退、腹泻,部分雏鹅腿、翅关节肿胀明显。剖检病死鹅的肝脏、心脏、肾脏及输尿管等,可见白色斑点,为尿酸盐沉积[10]。近年来,有试验表明鹅痛风病例中均存在星状病毒[11],然而由鹅星状病毒引起的雏鹅痛风,其发病机制尚未了解,故一旦发现该病毒应尽快采取隔离、控制、消毒等措施。

根据诉主描述,该养殖场中一直喂养的是鸡饲料,其蛋白质含量远远高于雏鹅所需要的量,导致蛋白质在体内聚积,这是雏鹅患鹅痛风的一大重要因素。此外,通过实验室PCR诊断检测到了GAstV,这与之前的鹅痛风也可能是由GAstV引起的相关报道一致。

对于营养代谢失衡所导致的痛风,可以减少饲料中蛋白质含量,增加一定量的青绿饲料。同时在水中添加含有中药成分的肾肝解毒液、0.5%碳酸氢钠、维生素等,增强机体代谢能力。目前,尚无针对GAstV的药物和疫苗,故若感染了GAstV,应尽早将其进行隔离治疗,对病鹅接触过的环境进行消毒,避免该病毒传播。痛风发病后没有特效药,多种致病因素相互作用,导致其发病机制复杂,病雏鹅治愈率低,给全国养殖场造成了巨大的经济损失。因此,鹅痛风要以预防为主、综合防控,减少该病的发生,促进我国养鹅业健康绿色发展。

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