氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系及对癫痫发病的预测研究

王萌萌

【摘要】 目的：探討氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系及对癫痫发病的预测研究。方法：选择黑龙江省佳木斯市中心医院2016年1月-2020年10月接诊的365例缺血性脑卒中患者作为观察组，另选同期的100例健康体检者作为对照组;根据缺血性脑卒中患者是否继发出血转化，分为出血组和正常组;比较观察组与对照组血清氧化应激指标[丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷酸（8-OHdG）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）]水平，使用单因素及多因素logistic回归分析血清氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系，分析癫痫发病情况，通过受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）评价氧化应激指标对癫痫发病的预测效能。结果：观察组血清MDA、8-OHdG水平均明显高于对照组，GSH-Px水平明显低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05）;出血转化组血清MDA、8-OHdG水平均明显高于正常组，GSH-Px水平明显低于正常组，差异均有统计学意义（P<0.05）;经多因素logistic回归分析显示，血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均为缺血性脑卒中继发出血转化的独立危险因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL是保护性因素（P<0.05）;经ROC曲线分析，血清MDA、8-OHdG联合GSH-Px预测癫痫发病的AUC为0.916。结论：血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均与缺血性脑卒中继发出血转化密切相关，三者联合预测癫痫发病的效能较高，值得临床检测中应用。

【关键词】 缺血性脑卒中 继发出血转化 氧化应激 癫痫

[Abstract] Objective： To explore the relationship between oxidative stress index and the transformation of ischemic stroke secondary bleeding and to predict the incidence of epilepsy. Method： 365 patients with ischemic stroke admitted to Jiamusi Central Hospital， Heilongjiang Province from January 2016 to October 2020 were selected as the observation group， and 100 healthy physical examination patients in the same period were selected as the control group. Patients with ischemic stroke were divided into bleeding group and normal group according to whether they had secondary bleeding transformation. The levels of serum oxidative stress indexes [malondialdehyde （MDA）， 8-hydroxydeoxyguanosine acid （8-OHdG） and glutathione peroxidase （GSH-Px）] were compared between the observation group and the control group. Univariate and multivariate logistic regression were used to analyze the relationship between serum oxidative stress indexes and the transformation of secondary bleeding after ischemic stroke. The incidence of epilepsy was analyzed. The area under ROC curve （AUC） was used to evaluate the predictive efficacy of oxidative stress on the incidence of epilepsy. Result： The levels of serum MDA， 8-OHdG in the observation group were significantly higher than those in the control group， and level of GSH-Px was significantly lower than that in the control group， with statistically significant differences （P<0.05）. The levels of serum MDA， 8-OHdG were significantly higher in the hemorrhagic transformation group than those in the normal group， and level of GSH-Px was significantly lower than that in the normal group， with statistically significant differences （P<0.05）. Multivariate logistic regression analysis showed that serum MDA>7.34 ng/mL， 8-OHdG>18.12 ng/mL were independent risk factors for secondary hemorrhagic transformation of ischemic stroke （P<0.05）， and GSH-Px >244.37 ng/mL was a protective factor （P<0.05）. By ROC curve analysis， the AUC of serum MDA and 8-OHdG combined with GSH-Px in predicting the onset of epilepsy was 0.916. Conclusion： The levels of serum MDA， 8-OHdG and GSH-Px are closely related to the secondary bleeding transformation of ischemic strok. The combination of the three has high efficacy in predicting the onset of epilepsy， and it is worthy of application in clinical testing.

[Key words] Ischemic stroke Secondary bleeding transformation Oxidative stress Epilepsy

First-author’s address： Jiamusi Central Hospital， Heilongjiang Province， Jiamusi 154002， China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2022.03.038

缺血性腦卒中是一种病情凶险且致死率和致残率均较高的急性脑血管疾病，局部脑组织缺血被公认为此病的典型病理表现[1]。静脉溶栓治疗是恢复缺血性脑卒中急性期血流最有效的方法之一，然而大多数患者在从溶栓治疗中获益的同时，面临着继发出血转化的风险，并可能增大癫痫发病的可能性。癫痫是缺血性脑卒中的常见并发症，尤其是继发出血转化患者，癫痫发病率高达18%[2]。对于缺血性脑卒中继发出血转化的检出，现阶段主要借助头颅CT、MRI等影像学检查，临床急需寻找此病的血液学标志物，期望能筛选出继发出血转化的高风险人群，以指导溶栓治疗，减少癫痫发病。近年来，研究显示，氧化应激指标可能是缺血性脑卒中继发出血转化的病理产物，可作为溶栓治疗中并发出血危险性的血液学标志物[3-4]。目前也有研究显示氧化应激指标可能预测癫痫发病[5]。对此，本研究目的在于探讨氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系及对癫痫发病的预测价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择佳木斯市中心医院2016年1月-2020年10月接诊的365例缺血性脑卒中患者作为观察组。纳入标准：（1）符合缺血性脑卒中的诊断标准;（2）发病48 h内入院并接受静脉溶栓治疗;（3）首次发病;（4）患者自愿参与研究，配合治疗。排除标准：（1）合并其他神经系统疾病;（2）长期服用可能影响氧化应激指标的药物;（3）患有严重的心、肝、肾疾病;（4）不耐受溶栓治疗。另选同期的100例健康体检者作为对照组。纳入标准：无重要器官严重疾病;血常规检查正常者;沟通能力正常，能独立完成研究。排除标准：有精神病史者;卧床或行动不便者。该研究经医院医学伦理学委员会批准，研究对象知情同意。

1.2 方法 （1）氧化应激指标检测。收集观察组患者静脉溶栓治疗前及对照组清晨空腹静脉血5 mL，均放置在抗凝试管中，离心分离并提取血清，置于-70 ℃冰箱中待测。使用酶联免疫吸附试验检测血清氧化应激指标[丙二醛（MDA）、8-羟基脱氧鸟苷酸（8-OHdG）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）]，检测试剂盒分别来源于上海臻科生物科技有限公司、上海信裕生物科技有限公司、上海康朗生物科技有限公司，均严格按照说明书进行检测操作。（2）根据溶栓后头颅CT结果显示缺血性脑卒中患者有无颅内出血转化，分为出血组和正常组;比较观察组与对照组血清氧化应激指标水平，使用单因素及多因素logistic回归分析血清氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系，分析癫痫发病情况，通过受试者工作特征（ROC）曲线下面积（AUC）评价氧化应激指标对癫痫发病的预测效能。

1.3 统计学处理 采用SPSS 18.0软件处理所得数据，符合正态分布且方差齐性的计量资料以（x±s）表示，两组间比较采用独立样本t检验，多组间数据比较采用方差分析;计数资料使用字2检验;采用ROC曲线计算两组AUC。以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料比较 观察组男253例，女112例;年龄41～75岁，平均（66.12±4.35）岁。对照组男59例，女41例;年龄36～71岁，平均（66.83±8.46）岁。两组一般资料比较，差异均无统计学意义（P>0.05），具有可比性。

2.2 观察组与对照组血清氧化应激指标水平比较 观察组血清MDA、8-OHdG水平均明显高于对照组，GSH-Px水平明显低于对照组，差异均有统计学意义（P<0.05），见表1。

2.3 脑卒中出血转化单因素分析 随访观察365例缺血性脑卒中患者，继发出血转化58例;出血转化组血清MDA、8-OHdG水平均明显高于正常组，GSH-Px水平明显低于正常组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表2。

2.4 脑卒中出血转化多因素logistic回归分析 以血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平为自变量，赋值为：根据中位数MDA>7.34 ng/mL=1，MDA≤7.34 ng/mL=0;8-OHdG>18.12 ng/mL=1，8-OHdG≤18.12 ng/mL=0;GSH-Px>244.37 ng/mL=1，GSH-Px≤244.37 ng/mL=0;以脑卒中出血转化为应变量，经多因素logistic回归分析显示，血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均为缺血性脑卒中继发出血转化的独立危险因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL为保护性因素（P<0.05）。见表3。

2.5 癫痫发病组与非癫痫发病组血清氧化应激指标水平比较 在58例缺血性脑卒中继发出血转化患者中，癫痫发病7例，占12.07%;癫痫发病组血清MDA、8-OHdG水平均明显高于非癫痫发病组，GSH-Px水平明显低于非癫痫发病组，差异均有统计学意义（P<0.05）。见表4。

2.6 氧化应激指标预测癫痫发病的ROC曲线分析 经ROC曲线分析，血清MDA、8-OHdG联合GSH-Px预测癫痫发病的AUC为0.916，明显大于单一指标MDA的0.687、8-OHdG的0.594和GSH-Px的0.715。见图1、表5。

3 讨论

继发出血转化是限制缺血性脑卒中患者溶栓治疗，增大治疗难度和影响预后的重要危险因素。关于缺血性脑卒中继发出血转化的机制仍未明确，国外研究认为，此病并不必然与溶栓治疗有关，与缺血性脑卒中的病情损伤有关，还可能增大癫痫发病的风险[6]。由此，如能寻找检测较为简便的血液学标志物，评估缺血性脑卒中继发出血转化的风险，准确预测癫痫发病，对于制订治疗策略极其重要。张小鹏[7]研究显示，氧化应激产生的自由基不仅是缺血性脑卒中的病理产物，还可能介导继发出血转化的病理过程。对于缺血性脑卒中患者，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px均能在一定程度上反映机体氧化应激水平。张颖[8]研究表明，缺血性脑卒中患者血清MDA水平较健康体检者明显升高。本研究结果亦支持了上述结果，提示缺血性脑卒中患者存在氧化应激反应，体内自由基增多，可能损伤血管壁、增大血管通透性，导致再通血管或侧支循环发生渗血或破裂出血[9]。由此可见，氧化应激与缺血性脑卒中密切相关，与患者继发出血转化的关系，研究尚少。

MDA是氧自由基的代谢产物之一，能反映氧化损伤程度。张鑫宇等[10]研究显示，血清MDA水平与缺血性脑卒中发病初期的病情严重程度密切相关。8-OHdG是细胞DNA氧化损伤的标志物。有研究指出，8-OHdG能用于评价机体氧化损伤程度[11]。GSH-Px具有减少氧自由基的生理作用，能提高机体的抗氧化能力[12]。由此可见，血清MDA、8-OHdG水平升高，GSH-Px水平降低，可能预示着缺血性脑卒中患者的病情恶化，溶栓治疗效果不理想，有发生继发出血转化的危险。本研究经单因素及多因素logistic回归分析显示，血清氧化应激指标与缺血性脑卒中继发出血转化的关系密切，其中血清MDA>7.34 ng/mL、8-OHdG>18.12 ng/mL均为缺血性脑卒中继发出血转化的独立危险因素（P<0.05），GSH-Px>244.37 ng/mL为保护性因素（P<0.05）;与Syafrita等[13]的研究结果相符，提示缺血性脑卒中继发出血转化患者体内存在严重的氧化应激反应亢进及抗氧化能力减小的现象。许靖等[14]研究认为，氧化应激反应增强是缺血性脑卒中继发出血转化的特异性表现，亦佐证了本研究上述观点。说明患者血清MDA、8-OHdG水平持续升高，GSH-Px水平持续降低，提示缺血性脑卒中患者病灶可能出现大面积脑梗死和严重脑水肿，而严重脑水肿是继发出血转化的独立危险因素。

癫痫发病是缺血性脑卒中继发出血转化患者的常见并发症之一[15]。Li等[16]研究發现，癫痫发病与缺血性脑卒中继发出血转化患者大脑皮层缺血缺氧引起的氧化应激反应有关。尹小花等[17]研究认为，氧化应激损伤导致局部大脑神经元异常放电，神经细胞损伤，引起癫痫发病。本研究发现，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均与缺血性脑卒中继发出血转化有关，若血清MDA、8-OHdG持久升高，可能增大癫痫发病风险。笔者通过ROC曲线分析，发现缺血性脑卒中继发出血转化患者血清MDA、8-OHdG联合GSH-Px预测癫痫发病的AUC为0.916，明显大于单一指标MDA的0.687、8-OHdG的0.594和GSH-Px的0.715，提示三者联合预测癫痫发病的效能较高，与谷鸿秋等[18]研究一致，该学者研究表明氧化应激反应是缺血性脑卒中患者并发癫痫的独立危险因素。此外，Ba等[19]研究显示，缺血性脑卒中继发出血转化并发癫痫的患者血清MDA、8-OHdG水平明显升高，GSH-Px水平明显降低，也支持了本研究上述观点。基于上述研究结果，可认为临床上监测缺血性脑卒中继发出血转化患者血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平的变化，对于评估患者病情演变具有积极作用，并能促使临床工作者不断寻找氧化应激拮抗剂，用于缺血性脑卒中继发出血转化及癫痫发病的防治。

综上所述，血清MDA、8-OHdG、GSH-Px水平均与缺血性脑卒中继发出血转化密切相关，三者联合预测癫痫发病的效能较高，值得临床检测中应用。然而，本研究存在以下局限性：研究规模较小，随访时间不长，病例发病距入组时间不同，治疗方案存在一定差异，均可能对检测结果产生影响，本研究结论还需进一步深入研究加以验证。

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（收稿日期：2021-04-25） （本文编辑：占汇娟）