羊角拗的化学成分研究*

杨瑶， 曾贵俊， 黄玉平， 赵勇

(云南师范大学 化学化工学院，云南 昆明 650500)

羊角拗(Strophanthusdivaricatus(Lour.) Hook.et Arn.)别名羊角扭，系夹竹桃科(Apocynaceae)羊角拗属(Strophanthus)植物，野生于丘陵山地、路旁疏林或山坡灌木丛中，多为灌木或小乔木[1]，是我国华南地区传统中草药[2-3].羊角拗的根、茎、叶、花和种子均可入药[4]，但同时羊角拗全株有毒，误食会产生心律失常、恶心呕吐及腹泻等强心苷中毒症状[5]，在民间常用其治疗跌打损伤、骨折、蛇伤、癣疥、风湿性关节炎、多发性脓肿及小儿麻痹后遗症等[6]，临床上主要用于治疗慢性心力衰竭及心律失常.文献报道,羊角拗属植物主要化学成分有强心苷类、黄酮类、蒽醌类及生物碱类等[7].为进一步了解羊角拗的活性成分，对采自云南省西双版纳傣族自治州的羊角拗甲醇提取物进行分离纯化，得到12个化合物，其结构见图1.

1 实验部分

1.1 材料与仪器

正相硅胶柱层析硅胶(75～150 μm和48～75 μm，青岛海洋化工厂)；反相硅胶柱层析硅胶RP-18(40～65 μm，德国Merck公司)；Sephadex LH-20(德国Merck公司)；分析型GF254高效薄层层析硅胶板(100 mm×200 mm，青岛海洋化工厂)；柱层析溶剂：石油醚、氯仿、乙酸乙酯、丙酮及甲醇等(工业纯，昆明福海达有限公司)；氘代试剂：CDCl3和MeOD(北京希凯创新科技有限公司).核磁共振仪(TMS为内标，DRX-400，瑞士Bruker公司)；旋转蒸发仪(EYELAN-1100，日本东京理化有限公司)；低温冷却液循环泵(DLSB-5L/25，巩义市予华仪器有限公司)；电子天平(Kern ABS 80-4，德国Kern公司)；真空泵(SHZ-D(Ⅲ)，巩义市予华仪器有限公司)；恒温电炉(HP-05，上海学森仪器有限公司)；磨口玻璃柱及其他常见玻璃仪器(北京欣维尔玻璃仪器有限公司).

图1 化合物1-12的结构

1.2 植物原料

植物样品于2018年8月采自云南省西双版纳傣族自治州，经中国科学院昆明植物研究所陈瑜老师鉴定为夹竹桃科羊角拗属植物羊角拗(Strophanthusdivaricatus(Lour.) Hook.et Arn．)，标本保存于中国科学院昆明植物研究所.

1.3 提取分离

将2 kg干燥的羊角拗样品用甲醇冷浸提取3次，每次24 h，将提取液利用旋转蒸发仪减压浓缩得甲醇总浸膏26 g.浸膏用75～150 μm硅胶拌样，以石油醚-乙酸乙酯(1∶0-0∶1，体积比，下同)梯度洗脱，经TLC分析合并为Fr A(1 g)、Fr B(2 g)、Fr C(1.5 g)和Fr D(0.6 g)4个部分.Fr B经硅胶柱层析，以石油醚-丙酮(1∶0-2∶1)梯度洗脱，分离得到Fr B1-B4.其中Fr B1(0.3 g)经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯(120∶1-1∶1)洗脱，分离得到化合物9(4.5 mg)和10(3.2 mg).Fr B2(0.2 g)经RP-18柱层析，甲醇-水(3∶2-1∶1)洗脱，分离得到化合物1(3.0 mg)和8(2.7 mg).Fr B3(0.4 g)经硅胶柱层析，石油醚-乙酸乙酯(80∶1-1∶1)洗脱，分离得到化合物5(2.8 mg)和6(4.2 mg).Fr C经Sephadex LH-20柱层析，氯仿-甲醇(1∶1)洗脱，分离得到Fr C1-C4.其中C2(0.2 g)经RP-18柱层析，甲醇-水(3∶2-1∶0)洗脱，分离得到化合物7(3.4 mg)和11(4.5 mg).Fr C3(0.3 g)经Sephadex LH-20柱层析，采用氯仿-甲醇(1∶1)洗脱，分离得到化合物2(2.5 mg)、3(2.8 mg)和12(3.8 mg).Fr C4(0.1 g)经硅胶柱层析，氯仿-丙酮(120∶1)洗脱，分离得到化合物4(3.1 mg).

2 结果与讨论

β-谷甾醇化合物(1)：白色针状结晶.经TLC多个体系展开，与β-谷甾醇标准品在多种溶剂系统中对照，Rf值均相等，故确定化合物1为β-谷甾醇.

periplocymarin(2)：白色粉末.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：5.93(1H,s,H-22),4.66(2H,m,H-21),4.66(1H,overlap,H-1′),4.18(1H,m,H-3),3.46(3′-OCH3),1.24(3H,d,J=6.2 Hz,H-6′),0.95(3H,s,H-19),0.90(3H,s,H-18)；13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：174.4(C-20),173.4(C-23),117.8(C-22),98.2(C-1′),86.4(C-14),79.1(C-3′),77.2(C-3),75.8(C-5),75.3(C-21),74.3(C-4′),71.5(C-5′),58.2(3′-OCH3),51.9(C-17),50.9(C-13),41.8(C-8),41.6(C-10),40.9(C-12),40.2(C-9),35.8(C-4),35.7(C-6),35.5(C-2′),33.3(C-15),28.0(C-16),26.8(C-2),26.6(C-1),24.8(C-7),22.7(C-11),18.6(C-6′),17.3(C-19),16.3(C-18).其数据与文献[8]报道的基本一致，故鉴定化合物2为periplocymarin.

carisursane A(3)：白色粉末.1H NMR(125 MHz,CD3OD)δ：5.26(1H,t,J=3.4 Hz,H-12),3.65(1H,m,H-2),2.93(1H,d,J=9.6 Hz,H-3),1.04(6H,CH3-24,25),0.91(3H,d,J=6.4 Hz,H-29),1.14,1.00,0.87,0.83(each 3H,s,CH3× 4)；13C NMR(500 MHz,CD3OD)δ：139.8(C-13),126.6(C-12),84.4(C-3),69.5(C-2),56.7(C-5),54.4(C-18),49.9(C-9),48.3(C-1),43.3(C-14),40.8(C-8),40.5(C-17),40.4(C-4,19),39.2(C-10),38.2(C-22),34.2(C-7),31.8(C-21),29.3(C-20,23),29.2(C-15),25.3(C-16),24.4(C-11),24.1(C-27),21.6(C-29),19.5(C-6),17.8(C-28),17.7(C-26),17.5(C-25),17.2(C-24).以上数据与文献[9]报道的基本一致，故鉴定化合物3为carisursane A.

α-香树脂醇(4)：白色粉末.1H NMR(125 MHz,CD3OD)δ：5.20(1H,t,J=3.6 Hz,H-12),3.18(1H,dd,J=11.5,4.7 Hz,H-3),1.00(6H,s,CH3-24,25),0.85(3H,d,J=6.5 Hz,H-30),1.11,0.96,0.95,0.81(each 3H,CH3× 4),0.78(3H,d,J=2.8 Hz,H-29)；13C NMR(500 MHz,CD3OD)δ：142.1(C-13),124.9(C-12),79.7(C-3),56.8(C-5),54.6(C-17),44.0(C-14),41.4(C-8),40.5(C-4),40.0(C-20),39.9(C-19),39.7(C-1),39.3(C-10),38.2(C-22),34.7(C-7),33.5(C-21),32.8(C-15),32.3(C-2),28.8(C-23),27.9(C-16),24.8(C-11),24.2(C-27),23.4(C-30),21.6(C-6),19.5(C-26),18.3(C-28),17.7(C-29),16.4(C-24),16.1(C-25).其数据与文献[10]报道的基本一致，故鉴定化合物4为α-香树脂醇.

羽扇豆醇(5)：白色粉末.C30H50O，MW=426.4.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：4.72(1H,d,J=7.4 Hz,H-29a),4.60(1H,d,J=7.5 Hz,H-29b),3.22(1H,m,H-3),2.40(2H,m,H-2),1.70(3H,s,CH3-21),1.05,0.98,0.97,0.85,0.80,0.78(each 3H,s,CH3× 6)；13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：150.9(C-20),109.3(C-29),79.0(C-3),55.2(C-5),50.4(C-9),48.3(C-18),48.0(C-19),43.0(C-17),42.8(C-14),40.8(C-8),40.0(C-22),38.9(C-4),38.7(C-1),38.0(C-13),37.2(C-10),35.6(C-16),34.3(C-7),29.8(C-21),28.0(C-23),27.4(C-2,15),25.1(C-12),20.9(C-11),19.3(C-30),18.3(C-6),18.0(C-28),16.1(C-25),16.0(C-26),15.4(C-24),14.6(C-27).与文献[11]数据基本一致，故鉴定化合物5为羽扇豆醇.

桦木脑(6)：白色粉末.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：4.70(1H,s,H-29a),4.60(1H,s,H-29b),3.82(1H,d,J=10.9 Hz,H-28a),3.36(1H,d,J=10.9 Hz,H-28b),3.21(1H,dd,J=11.1,6.2 Hz,H-3),1.70(3H,s,CH3-21),1.04,1.00,0.99,0.84,0.78(each 3H,s,CH3× 5)；13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：150.6(C-20),109.6(C-30),79.0(C-3),60.5(C-28),55.3(C-5),50.4(C-9),48.7(C-19),47.8(C-17,18),42.7(C-14),40.9(C-8),38.9(C-4),38.7(C-1),37.3(C-10),37.2(C-13),34.2(C-7),34.0(C-22),29.7(C-21),29.2(C-16),28.0(C-23),27.4(C-2),27.2(C-15),25.2(C-12),20.8(C-11),18.3(C-6),16.1(C-25),16.0(C-26),15.4(C-24),14.8(C-27).与文献[12]数据基本一致，故鉴定化合物6为桦木脑.

槲皮素-3-O-芸香苷(7)：黄色油状.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：7.69(1H,br s,H-2′),7.65(1H,br d,J=8.2 Hz,H-6′),6.89(1H,d,J=8.2 Hz,H-5′),6.43(1H,br s,H-8),6.23(1H,br s,H-6),5.13(1H,d,J=6.4 Hz,H-1″),4.54(1H,br s,H-1‴),3.32～3.81(10H,protons of rutinose),1.21(3H,d,J=5.9 Hz,H-6‴)；13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：179.3(C-4),166.0(C-7),163.0(C-5),159.3(C-9),158.5(C-2),150.0(C-4′),145.8(C-3′),135.6(C-3),123.6(C-6′),123.1(C-1′),117.7(C-2′),116.0(C-5′),105.6(C-10),104.7(C-1″),102.4(C-1‴),99.9(C-6),94.9(C-8),78.2(C-3″),77.2(C-5″),75.7(C-2″),73.9(C-4‴),72.2(C-3‴),72.1(C-2‴),71.4(C-4″),69.7(C-5‴),68.5(C-6″),17.9(C-6‴).与文献[13]数据基本一致，故鉴定化合物7为槲皮素-3-O-芸香苷.

植醇(8)：黄色油状.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：5.43(1H,m,H-2),4.18(2H,m,H-1),2.01(2H,m,H-4),1.39～1.08(19H,overlap,H-5～15),0.90～0.86(12H,overlap,CH3-16～19);13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：140.3(C-3),123.0(C-2),59.4(C-1),39.9(C-14),39.4(C-4),37.4(C-8,10),37.3(C-12),36.7(C-6),32.8(C-7),32.7(C-11),28.0(C-15),25.1(C-5),24.8(C-13),24.5(C-9),22.7(C-17),22.6(C-16),19.8(C-19),19.7(C-18),16.2(C-20).与文献[14]数据一致，故鉴定化合物8为植醇.

(9Z)-十七碳烯酸(9)：淡黄色油状.C17H32O2，MW=268.2.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：2.37(2H,t,J=7.5 Hz,H-2),1.65(2H,m,H-3),2.03(4H,m,H-8,11),5.37(2H,m,H-9,10),1.26～1.30(20H,m,H-3～7,H-12～16),0.90(3H,t,J=6.9 Hz,H-17);13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：178.4(C-1),130.2(C-9),129.9(C-10),33.9(C-2),32.1(C-15),29.9～29.2(C-4～7,C-12～14),24.9(C-3),22.9(C-16),14.3(C-17).以上数据与文献[15]报道的一致，故鉴定化合物9为(9Z)-十七碳烯酸.

十六碳酸(10)：无色油状.1H NMR(125 MHz,CDCl3)δ：2.36(2H,t,J=7.5 Hz,H-2),1.65(2H,m,H-3),1.27～1.36(24H,m,H-4～15),0.88(3H,t,J=6.9 Hz,H-16);13C NMR(500 MHz,CDCl3)δ：179.1(C-1),34.0(C-2),32.1(C-14),29.8～28.9(C-4～13),24.7(C-3),22.8(C-15),14.3(C-16).以上数据与文献[16]报道的一致，故鉴定化合物10为十六碳酸.

莨菪亭(11)：白色针状结晶.1H NMR(125 MHz,CD3OD)δ：7.87(1H,d,J=9.4 Hz,H-4),7.13(1H,s,H-5),6.79(1H,s,H-8),6.22(1H,d,J=9.4 Hz,H-3),3.91(3H,s,OCH3);13C NMR(500 MHz,CD3OD)δ：164.1(C-2),152.9(C-7),151.4(C-9),147.1(C-6),146.1(C-4),112.6(C-3),112.5(C-10),109.8(C-5),103.9(C-8),56.8(OCH3).以上数据与文献[17]报道的一致，故鉴定化合物11为莨菪.

没食子酸(12)：淡黄色针状晶体.经TLC多个体系展开，与没食子酸标准品在多种溶剂系统中对照，Rf值均相等，故确定化合物12为没食子酸.

从西双版纳产羊角拗甲醇提取物中分离得到12个化合物，利用波谱技术结合文献对照，分别鉴定为：β-谷甾醇(1)、periplocymarin(2)、carisursane A(3)、α-香树脂醇(4)、羽扇豆醇(5)、桦木脑(6)、槲皮素-3-O-芸香苷(7)、植醇(8)、(9Z)-十七碳烯酸(9)、十六碳酸(10)、莨菪亭(11)和没食子酸(12).