饲料中橄榄油代替鱼油对罗非鱼生长发育的影响

钟 萍，罗 威，陈鲜丽

（1.湛江幼儿师范专科学校，广东湛江 524084；2.韶关学院医学院，广东韶关 512026）

脂类不仅为水生动物提供足够的营养，也能对水生动物疾病预防起到免疫调节作用（吴学君和汤婷，2015）。适量脂类物质不仅能节约饲料的蛋白来源，适量减少环境中氮污染，还能提高其饲料利用率，节约成本。目前，鱼油是水产饲料配方中的重要脂类原料。但鱼油的成本高，供应量严重不足，且生产质量参差不齐，因此急需寻找一种水产饲料中鱼油替代物。植物油因其产量高、成本低被认为是能替代饲料中鱼油的理想物质之一（易新文等，2013）。研究表明，水产动物饲料中植物油可以部分替代鱼油，且替代水平与鱼的种类、年龄及个体大小有关。还有研究表明，饲料中植物油替代鱼油的比例可能会影响鱼类的生长发育和鱼体健康，其影响程度与植物油种类和比例息息相关（文远红等，2016）。

橄榄油是一种从橄榄树果实提取的木本油，是一种理想脂肪的重要原料。橄榄油的营养成分为不饱和脂肪酸、多酚、三萜烯二醇、维生素及类胡萝卜素等，不饱和脂肪酸的含量达到82%～87%，其含量丰富，比大豆油与菜籽油的不饱和脂肪酸含量更高，更优于橡胶籽油（Deng等，2015）；研究表明，橄榄油是一种膳食关键成分，长期服用对预防心血管疾病和癌症有重要作用。

罗非鱼是我国重要经济鱼类之一，其市场前景较好，经济价值高；罗非鱼生长速率快，养殖周期短，肉质鲜美，已成为我国水产市场的重要经济品种（何金钊等，2019）。近年来，罗非鱼的研究主要集中在营养研究和疾病免疫等方面（陈涛等，2019），对饲料中橄榄油替代鱼油的应用研究较少。因此，文章研究添加不同比例的橄榄油替代鱼油对罗非鱼生长性能的影响，以期为罗非鱼的饲料研究提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料 橄榄油、鱼粉、豆粕、菜籽粕、棉粕、次粉、矿物质预混料均购置于当地饲料厂，鱼类购置当地养殖场，挑选健康无病的鱼类。

1.2 主要设备 立体压力蒸汽灭菌锅（YXQ-LS-40SII），室内养殖循环养殖桶，数显鼓风干燥箱，饲料制作机器，电子天平；恒温水浴锅；立式超低温保温箱，高效液相质谱仪，电冰箱；分析试验用纯水机（PQROOP-01234）；涡旋机，玻璃皿若干烧杯，量筒，玻璃棒，棉花与纱布。

1.3 主要试剂与材料 鱼粉，氢氧化钠（10%，1 mol/L），HCl（10%，1 mol/L），硝酸钾，NaCl，甲醇。

1.4 饲料配方设计 以蚕蛹粉、豆饼、菜籽粕、玉米蛋白粉为饲料蛋白原料，饲料橄榄油按0%、20%、40%、60%、80%、100% 等比例代替鱼油，将所有原料使用粉碎机进行粉碎，且过50目筛，将所有的饲料原料与油类混合，加适量蒸馏水混匀，放入颗粒机中，将其制成2 mm的颗粒料，将饲料进行烘干处理，放入冰箱备用，配置为6种不同原料，试验饲料配方组成如表1所示。

表1 试验饲料配方组成

矿物质预混料为每千克饲料提供：CuSO·5H2O 150 mg，FeSO4·5H2O 70 mg，ZnSO4·5H2O 120 mg，KI（2%）80 mg，Ca（H2PO4）2200 mg，NaCl 100 mg，MnSO4·5H2O 130 mg，MgSO4120 mg。

1.5 试验饲养管理 试验罗非鱼均来自人工培育养殖厂，由水产推广站提供。养殖试验开始前对其罗非鱼进行饥饿处理，选取840尾体重为4.12 g的健康无病罗非鱼，将其随机分为6组，每组4个重复，每组重复35尾鱼，6组鱼分别投喂标记饲料，按照试验饲料标记进行分组。鱼苗被放入饲养桶内饲养，每个饲养桶放入相应的鱼类，饲养试验为8周。

试验在水产试验养殖基地进行，开始正式试验前对试验鱼类暂养2周，以便适应水产基地养殖桶内的水域环境。每天上午、中午、下午进行投喂，定期巡查，观察鱼类摄食情况和饲料投喂效率，每天准时记录罗非鱼的摄食情况和鱼类饲养情况。养殖水为循环流动自来水，水温为26～28℃。

1.6 样品制备及相关指标测定 罗非鱼饲养试验结束后立即测量其体重，取出鱼体肝胰脏，放入液氮罐中冻存。

采用凯氏定氮法测定饲料及鱼体的粗蛋白质含量，采用索氏抽提法测定粗脂肪，采用高温灼烧法测定粗灰分，采用氧弹氏能量仪测定总能。饲料中脂肪酸和鱼体不饱和脂肪酸使用高效液相色谱仪进行测定。参照其单种混合标准对其脂肪酸进行定性，而后使用标准方式计算脂肪酸含量。

1.7 饲养指标 饲养试验结束后测量鱼类的体重与体长，计算鱼类增重率（WGR）、成活率、特定生长率（SGR）、相对增重率、饵料系数（FCR），公式如下：

特定生长率（SGR）/（%/d）=100×（ln终末体重-ln初始体重）/饲养天数；

饵料系数（FCR）=总投料量/增重量；

肥满度（CF）=体重（g）/体长（cm）3×100；

成活率（SR）/%=存活尾数/初始尾数×100；

增重率（WGR）/%=（末均重－初均重）/初均重×100。

1.8 试验数据分析 采用Excel 2013进行统计数据，用SPSS22.0进行单因素方差分析，结果数据以“均值±标准差”表示，P＜0.05表示组间差异显著。

2 试验结果

2.1 橄榄油替代鱼油对罗非鱼生长的影响 由表2可知，随着饲料橄榄油替代水平不断升高，罗非鱼的增重率先上升后下降，在60%水平时增重率为5.27，与对照组存在显著差异（P＜0.05）。随着橄榄油替代水平的不断上升，罗非鱼的特定生长率和蛋白质效率先上升后下降，饲料中橄榄油替代鱼油水平为60%时，其值达到最大水平，分别为2.69和2.54，与对照组存在显著差异（P＜0.05），而罗非鱼的饵料系数不断上升，替代水平为100%时其值与对照组存在显著差异（P＜0.05）。饲料中橄榄油替代比例高于60%时，罗非鱼的增重率和蛋白利用率明显下降，且100%橄榄油替代比例会严重影响罗非鱼的生长。各试验组罗非鱼存活率和摄食率均不存在明显差异（P ＞ 0.05）。

表2 橄榄油替代比例对罗非鱼生长性能的影响

2.2 橄榄油替代鱼油对罗非鱼生长形态的影响 由表3可知，用橄榄油替代鱼油对罗非鱼鱼体的水分、粗灰分和粗蛋白质含量无显著影响（P＞0.05）；与对照组相比，饲料中橄榄油替代水平为100%时，罗非鱼鱼体的粗脂肪含量显著高于对照组（P＜0.05）；饲料中橄榄油替代水平为80%时，罗非鱼的肝胰脏脂肪含量显著高于对照组（P＜0.05），但替代水平为60%时罗非鱼的肝胰脏脂肪含量显著低于对照组（P＜0.05）。用橄榄油替代鱼油，各组罗非鱼的肝体比和脏体比与对照组无显著差异（P＞0.05），但用60%的橄榄油替代鱼油，罗非鱼的肥满度明显高于对照组（P＜ 0.05）。

表3 橄榄油替代鱼油对罗非鱼的生长形态的影响

2.3 橄榄油替代鱼油对罗非鱼全鱼脂肪酸营养成分影响 由表4可知，罗非鱼全鱼中共测出26种脂肪酸，其中9种为饱和脂肪酸（SFA），17种为不饱和脂肪酸（UFA）。在罗非鱼脂肪酸营养成分中，脂肪酸含量最多的为C16：0和C18：1n-9。从脂肪酸组成看，饲料中用橄榄油替代鱼油的比例不断提高，罗非鱼全鱼PUFA的含量不断上升，与对照组相比，用橄榄油替代鱼油的比例为40%～100%时，罗非鱼全鱼PUFA的含量显著高于对照组（P＜0.05）；而0%替代组罗非鱼的SFA和MUFA含量最高，显著高于其他各组（P＜0.05）。随着饲料橄榄油替代比例不断提高，罗非鱼 C18：2n-6，C18：3n-3，C22：5n-3和C22：6n-3的含量不断上升，饲料中用橄榄油替代鱼油的比例为20%～100%时，罗非鱼全鱼C18：2n-6，C18：3n-3，C22：5n-3和C22：6n-3的含量显著高于对照组（P＜0.05）；各试验组罗非鱼C20：4n-6和C20：5n-3的含量与对照组无显著差异（P＞0.05）；此外，随着饲料橄榄油替代比例的增加，罗非鱼C16：0，C16：1n-7和C22：0的含量不断下降，与饲料橄榄油替代鱼油的比例呈负相关。用橄榄油替代鱼油，罗非鱼的C17：1含量与对照组无显著差异（P＞0.05）。

表4 橄榄油替代鱼油对罗非鱼全鱼脂肪酸营养成分的影响

3 讨论

3.1 橄榄油替代鱼油对罗非鱼生长的影响 在本试验结果中，橄榄油替代比例为60%时罗非鱼的增重率最高，超过该比例时，罗非鱼生长发育受到限制，且更高替代比例会抑制罗非鱼生长。这与张新党等（2018）的研究结果类似，即饲料中植物油代替部分鱼油将不会影响其饲料效果。彭祥和等（2014）研究发现，饲料中亚麻籽油替代比例超过50%会明显抑制哲罗鱼的生长，替代部分鱼油不会明显影响哲罗鱼的生长。因而，本研究饲料中橄榄油的适宜替代水平可能会促进罗非鱼生长。本试验结果证明，饲料橄榄油的合适添加比例对罗非鱼的生长存在明显影响。饲料中橄榄油的替代比例与罗非鱼的生长状况、年龄和饲料原料组成存在显著相关性。

此外，当饲料中橄榄油替代比例超过60%后，饲料中PUFA含量较高，会明显抑制罗非鱼的生长，而且饲料利用率较低，彭祥和等（2014）研究表明，亚麻籽油替代水平过高会严重影响罗非鱼的生长，同时降低其饲料利用率。本试验结果表明，饲料橄榄油替代比例过高会严重影响PUFA含量，其含量会超出鱼类正常水平，会加重罗非鱼脂类代谢负担，对其生长发育产生不利影响。

3.2 橄榄油替代鱼油对罗非鱼生长形态的影响 研究表明，不同替代比例橄榄油对罗非鱼粗蛋白质、水分和粗灰分不存在显著影响，但对罗非鱼的粗脂肪存在显著影响，这与其他鱼类的研究结果类似。当橄榄油替代比例超过60%时，罗非鱼脂肪含量会增加，这与其他鱼类结果类似，脂肪能大量沉积在鱼体肝脏中（程炜轩等，2021；张新党等，2018）。这些结果表明，饲料中不同橄榄油替代水平会对罗非鱼脂肪沉积产生重大影响，从而引起鱼体脂肪肝综合征。本研究发现，投喂高水平橄榄油饲料，罗非鱼肝胰脏脂肪含量不断上升，进而引起肝脏脂肪沉淀量增加。而在其他鱼类研究中，饲料中亚麻籽油代替鱼油能被鱼类利用，不会影响其脂肪沉积。目前，对罗非鱼的脂肪沉积机制研究不够清晰，橄榄油替代鱼油在鱼类中的研究资料较少，需要进一步研究证明。

3.3 橄榄油替代鱼油对罗非鱼全鱼脂肪酸营养成分的影响 本研究发现，罗非鱼全鱼脂肪酸营养成分与饲料配方存在显著关系。罗非鱼全鱼共检测出26种脂肪酸，其中9种为饱和脂肪酸（SFA），17种为不饱和脂肪酸（PUFA）。罗非鱼中全鱼脂肪酸C16：0和C18：1n-9含量最高，这与吉罗罗非鱼（张新党等，2018）的结果类似。罗非鱼的营养成分主要由不饱和脂肪酸组成，这些脂肪酸在罗非鱼体内沉积。

在本试验中，随着饲料橄榄油含量的增加，罗非鱼不饱和脂肪酸总量显著增加，其结果与亚麻籽油饲喂的结果类似。Deng等（2015）研究发现，罗非鱼将ALA转化为长链不饱和脂肪酸，罗非鱼能合成长链不饱和脂肪酸；这些结果表明，罗非鱼对其饲料不饱和脂肪酸的利用效率较高。PUFA有效降低血压、抗癌等医用价值，因此，罗非鱼具有较好的医用价值。

在本试验中，橄榄油的不同替代比例对罗非鱼C20：4n-6含量无显著影响，但罗非鱼的C17：1含量与橄榄油替代比例呈正相关。这些研究结果表明，饲料中不饱和脂肪酸的利用率与鱼类个体大小、代谢水平和环境有关。与其他鱼类研究结果相比，罗非鱼富含SFA、PUFA和单不饱和脂肪酸，n-3和n-6的含量较高，是补充人体营养物质的理想食品来源，并具有广阔的市场开发潜力。

4 结论

通过分析罗非鱼全鱼脂肪酸营养成分可以得出，罗非鱼饲料配方具有一定的开发价值。测定罗非鱼不饱和脂肪酸成分可以推测罗非鱼对不饱和脂肪酸的需要量，调整饲料组成，用以促进生长、节约饲料蛋白，氨基酸平衡可以促进动物生长，节约饲料蛋白质资源，减少含氮物质对环境的污染。

用橄榄油替代部分鱼油可能对罗非鱼生长起到积极作用，同时优化橄榄油代替比例，提高饲料利用效率，促进罗非鱼生长。

饲料中橄榄油替代鱼油会改善饲料营养成分，可有效改善罗非鱼不饱和脂肪酸含量，有利于罗非鱼吸收营养物质。