不同方法炮制白芍的芍药苷含量检测对比及其镇痛效果比较

卜家福

摘要： 目的 研究不同方法炮制白芍的芍药苷含量以及镇痛效果。方法 选择高效液相色谱法测定生品、炒、醋制、酒制、麸炒的白芍，测定其中芍药苷含量，比较不同方法炮制白芍的芍药苷含量，另在2021年7月选择雄性小鼠30只作为观察对象，分析不同方法炮制白芍的扭体次数，最后通过Pearson计算不同炮制品的芍药苷含量与扭体次数的相关性。结果 生品的芍药苷含量高出炒制、醋制、酒制、麸炒，但炒制低于生品、醋制、酒制、麸炒（P<0.05）。生品、炒制组的扭体次数高出醋制、酒制、麸炒（P<0.05）。经Pearson计算，发现不同炮制品的芍药苷含量与扭体次数并无相关性（P<0.05）。结论 不同方法炮制白芍的芍药苷含量存在较大差异，且镇痛效果与芍药苷含量并无关联，临床应根据实际需求选择合适的炮制方式。

关键词：镇痛效果;白芍;芍药苷;高效液相色谱

【中图分类号】 R282 【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）09--01

白芍作为临床常见的中草药，也是毛莨科植物芍药的干燥根，味苦性温，并具备养血调经、收敛止痛的作用，通常被运用于腹痛、肢痛、血虚、肋痛等疾病的治疗中，且取得过一定的应用价值。目前，临床除了生白芍之外，还可通过不同炮制方法制备白芍，从而导致其功效出现较大差异[1]。从现代医学上看，白芍以芍药苷为主要成分，其存在一定抗炎以及镇痛的作用，因此白芍及炮制品在药方中通常发挥镇痛功效，其中芍药苷成为判断白芍质量的重要指标[2]。若能够完全掌握不同方法炮制白芍的芍药苷含量，并了解其镇痛作用，可为临床治疗提供一定指导价值。本文对此展开试验，选择高效液相色谱法测定生品、炒、醋制、酒制、麸炒的白芍，测定其中芍药苷含量，另选择雄性小鼠30只作为观察对象，分析不同方法炮制白芍的镇痛效果，结果如下：

1 资料与方法

1.1 仪器与设备

2021年7月选择雄性小鼠30只，体重17-21g，平均体重（19.51±0.33）g，另选择白芍（购自江苏亚泰五洲药业），芍药苷对照品，甲醇，对乙酰氨基酚片，乙腈，乙酸，高效液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）。

1.2 方法

选择蒸馏水清洗生白芍，常规切片并干燥，经炒（清炒）、醋制（使用米醋浸泡12h）、酒制（使用白酒浸泡12h）、麸炒（取适量与麸皮炒）不同方式进行炮制，直至白芍切面呈现微黄色后停止，等待其冷却，常规干燥，不同方式均炮制白芍500g。

取不同炮制品的粉末（0.65g），加入甲醇置于容量瓶，摇晃均匀后常温下静置，30min后选择超声处理，时间30min，等待其自然冷却后加入适量甲醇，定容，摇晃均匀，过滤。同时制备对照品，选择干燥的芍药药苷（0.35g）放在容量内，加入甲醇，定容。

选择高效液相色谱仪以及250mm*4.5mm、5μm的C18反相色谱柱，乙腈-水为流动相，检测波长230nm，柱温30摄氏度，流速1.0ml/min。另外选择2、4、6、8、10、12μl对照品，得到峰面积及浓度，制作标准曲线，开展重复实验。再取样本与对照品测定样品回收率，检测不同炮制方法白芍的芍药苷含量，重复三次。

将30只小鼠进行随机分组，分别是生品、炒、醋制、酒制、麸炒、空白对照组，各组5只，选择0.3%醋酸溶液经皮下注入小鼠颈背部，其中对照组选择蒸馏水以0.3ml/10g蒸馏水灌胃，剩余组煎煮30g炮制品至30ml，以0.3ml/10g蒸馏水灌胃。统计15min之内小鼠的扭体次数，以此评价镇痛效果。

1.3 观察指标

比较不同方法炮制白芍的芍药苷含量，同时分析不同方法炮制白芍的扭体次数，最后通过Pearson计算不同炮制品的芍药苷含量与扭体次数的相关性。

1.4 统计学处理

全文数据选择SPSS 20.0系统计算，x±s为计量数据，选择t检验;百分比为计数数据，选择χ2检验，P<0.05为数据存在统计学差异。选择Pearson计算相关性，P<0.05表示有相关性。

2 结果

2.1 不同方法炮制白芍的芍药苷含量

生品的芍药苷含量高出炒制、醋制、酒制、麸炒，但炒制低于生品、醋制、酒制、麸炒（P<0.05）。见表1。

2.2 不同方法炮制白芍的扭体次数

生品、炒制组的扭体次数高出醋制、酒制、麸炒（P<0.05）。见表2。

2.3 相关性分析

经Pearson计算，发现不同炮制品的芍药苷含量与扭体次数并无相关性，r=0.023，p=0.082。

3 讨论

白芍作为毛茛科芍药属植物，广泛种植于国内各地区，且存在悠久的种植历史，被广泛运用于临床治疗中。其中芍药苷作为白芍主要成分，存在保肝护肝、退热解痉的作用。而生白芍的功效为补阴强肝、敛固止痛，其作用受到芍药苷含量的影响[3]。一旦经过炒制后，其中芍药苷明显减少，从而导致其药效更加平稳，且滋阴养血的效果更为突出，被广泛应用于疲弱阴虚、肝火旺盛的疾病治疗中[4]。而酒炒白芍的鞣质、多糖增加，可明显增强调节免疫以及抗氧化的作用，同时可发挥镇痛效果，加速芍药苷起效，尤其适用于产后镇痛。醋炒后可进入肝经，进一步提升柔肝止痛以及疏肝解郁的效果。最后麸炒白芍的酸痛作用明显，同时可增强柔肝以及养肝效果[5]。由此可见，白芍的作用机制较多且复杂，在临床治疗上具备极大优势。因此掌握不同方法炮制白芍的芍药苷含量及镇痛效果，可为指导临床治疗提供重要价值。

曾有报道表示[6]，不同方法炮制的白芍可能存在不同的功效，其可能与白芍主要成分有关。但目前相关报道较少，本文对此进行试验，结果显示：生品的芍药苷含量高出炒制、醋制、酒制、麸炒，但炒制低于生品、醋制、酒制、麸炒（P<0.05）;生品、炒制组的扭体次数高出醋制、酒制、麸炒（P<0.05）;经Pearson计算，发现不同炮制品的芍药苷含量与扭体次数并无相关性（P<0.05），提示不同方法炮制白芍的芍药苷含量差异明显，且镇痛效果与芍药苷含量并无关联。经分析发现，芍药苷含量可能随着不同炮制方法而逐渐减少，其中生品、炒制、醋炒、酒炒白芍可直接作用在离体兔肠，且自发振幅、收缩活动逐渐增强，同时随着药物剂量的不断增多而随之升高，并有效抑制肾上腺素性肠管蠕动[7-8]。另外上述表格中看到，炒制白芍的芍药苷含量较低，但其小鼠扭体次数与生品更为接近，证实芍药苷含量与镇痛效果并无关系，还需临床在使用期间按照实际需要选择更为适宜的炮制方法[9]。

综上所述，不同方法炮制白芍的芍药苷含量存在较大差异，且镇痛效果与芍药苷含量并无关联，临床应根据实际需求选择合适的炮制方式。

参考文献：

[1]劉亮镜，徐斌，张强.白芍炮制过程中的美拉德反应及芍药苷的变化[J].中华中医药学刊，2020，38（3）：74-77，后插6.

[2]丁妍，孔铭，徐亚运，等.炮制对硫熏白芍饮片检控指标的影响[J].东南国防医药，2022，24（1）：50-53.

[3]于定荣，邓志灏，翁小刚，等.炮制加工对白芍中9个成分含量的影响[J].中药材，2020，43（12）：2909-2913.

[4]王杨，甄臻，隆毅，等.基于颜色变化的酒白芍质量标准及炮制工艺研究[J].中药材，2020，43（9）：2141-2145.

[5]马灵珍，马亚利，刘耀武.白芍不同炮制工艺优选[J].辽宁中医药大学学报，2019，21（2）：69-73.

[6]熊贤兵，关媛媛，张凌.微波消解-火焰原子吸收光谱法测定白芍及其炮制品中5种微量元素的含量[J].中南药学，2021，19（1）：118-122.

[7]梁伟，董烜彤.中药复方炮制液中芍药苷含量高效液相色谱法快速检测研究——评《中药材高效液相色谱检定》[J].分析测试学报，2020，39（1）：后插2.

[8]熊哲，谢家璇，朱鲲博，等.芍药苷调控酸敏感离子通道发挥镇痛作用[J].医药导报，2019，38（11）：1403-1407.

[9]林秀敏，张振凌，王胜超，等. 白芍饮片的HPLC指纹图谱建立及聚类分析、主成分分析[J]. 中国药房，2019，30（24）：3375-3382.