CD14 基因-159C/T 多态性与变应性鼻炎易感性关系的meta 分析

冯会杰 杜翠萍 白素娟

(上海市普陀区人民医院耳鼻咽喉科 上海 200060)

变应性鼻炎(allergic rhinitis，AR)是特应性个体接触变应原后由免疫球蛋白E(immunoglobulin E，IgE)介导的递质释放，并有多种免疫活性细胞和细胞因子参与的Ⅰ型变态反应性疾病。近年来，AR的患病率显著上升，严重影响了患者的生活质量，并且给社会经济带来沉重的负担[1]。尤其体现在儿童AR患病率上，儿童AR在发达国家已达20%~40%[2]。Brozek 等[3]的研究显示，机体遗传易感性与环境因素的相互作用是导致AR 发病的根本原因。因此，找寻与人类复杂疾病密切相关的基因位点，是研究其遗传机制、预防及治疗的重要途径之一[4]。现已发现多个与其相关的基因位点。其中编码白细胞分化抗原簇l4基因(CD14)的启动子区159C/T多态性基因受到了普遍关注。目前国内外对于CD14基因-159C/T多态性与AR易感性的研究结果存在不同的观点[5-8]。本研究通过检索较为全面的国内外数据库，选取病例对照研究文献进行meta分析，对AR发病相关遗传学机制进行初步分析。

1 资料与方法

1.1 文献检索 检索万方数据、中国生物医学文献数据库(CBM)、维普资讯、中国知网(CNKI)、PubMed、Embase等数据库。中文检索策略:“变应性鼻炎”“基因多态性”“CD14”；英文检索策略：allergic rhinitis，CD14，gene OR genetic variant OR polymorphism。检索文献发表时间截至2020年12月。以CBM为例的检索式为(“基因多态性”OR“SNP”)AND(“过敏性鼻炎”OR“变应性鼻炎”OR“变态反应性鼻炎”)AND(“CD14”)。此外，进一步对纳入文献的参考文献进行手工检索，以发现符合纳入标准的潜在文献。

1.2 文献筛选 文献纳入标准：①关于CD14基因-159C/T多态性与AR易感性关系的病例对照研究；②研究对象均符合AR病例组诊断标准；③必须提供单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism，SNP)频率数据。文献排除标准：①病例报告、综述类文献；②摘要评论、评论、信件和会议演示文稿；③研究数据不完善的文献。

1.3 数据提取 由2位作者根据纳入和排除标准分别对文献进行逐一筛选，并提取数据，如遇分歧，协商解决。数据提取内容包括：期刊名、作者、发表年限、研究人群的国家及种族、对照组和病例组数量、对照组来源、SNP检测法、等位基因和基因型频率等。

1.4 统计学处理 分析等位基因和基因型频率，绘制森林图。各研究之间的异质性采用I²检验，若I²＜50%，各研究具有同质性，采用固定效应模型(fixed effect model，FEM)；若I²≥50%，各研究异质性较大，采用随机效应模型(random effect model，REM)。本研究选用比值比(OR值)为评价指标，以α=0.05为检验水准，计算OR值及95%可信区间(confidence interval，CI) ，以P＜0.05为差异有统计学意义。由于AR在遗传学特征上遗传规律并不符合经典的孟德尔遗传规律，而且可能是多个基因共同参与的复杂疾病，因此采用基因模型分别合并计算OR值，等位基因模型TvsC、显性模型TT+CTvsCC、隐性模型TTvsCC+CT、CTvsCC、TTvsCC，用敏感性分析评价单一研究对总体结果的影响，Begger漏斗图和Egger检验评价发表偏移(以P＜0.05为存在发表偏倚)。

2 结果

2.1 纳入文献的基本特征 最终纳入文献9 篇[5-13]，其中英文文献6 篇、中文文献3 篇。9 篇文献中，病例组1 195 例，对照组1 124 例。文献检索流程见图1，文献特征和基因型分布见表1。

表1 纳入文献基本特征

图1 文献筛选流程

2.2 meta分析结果 见表2。等位基因及4种基因模型经异质性检验，I²值均≥50%，故采用随机效应模型进行meta分析，结果显示，等位基因TvsC(OR=1.09，95% CI:0.80～1.50；P=0.585)、显性模型TT+CTvsCC(OR=1.18，95% CI:0.74～1.88；P=0.50)、隐性模型TTvsCC+CT(OR=1.17，95%CI:0.76～1.82；P=0.479)、CTvsCC(OR=1.20，95%CI:0.78～1.84；P=0.413)、TTvsCC(OR=1.30，95%CI:0.69～2.45；P=0.417)在病例组和对照组间的差异均无统计学意义(图2)。

图2 CD14基因-159C/T 多态与AR易感性关系的森林图 A. 等位基因T vs C ；B. 显性模型；C. 隐性模型；D. CT vs CC；E. TT vs CC。

按种族进行亚组分析显示，在非洲人群中，等位基因TvsC(OR=2.05，95% CI：1.47～2.86；P＜0.05)、显性模型TT+CTvsCC(OR=2.00，95% CI：1.24～3.22；P=0.004)、隐性模型TTvsCC+CT(OR=4.04，95% CI：2.02～8.09；P＜0.05)、TTvsCC(OR=5.02，95% CI：2.37～10.63；P＜0.05)在病例组和对照组间的差异均有统计学意义，而CTvsCC(OR=1.48，95% CI：0.89～2.45；P=0.129)差异无统计学意义(图3)。

图3 CD14基因-159C/T多态性与AR易患性关系的亚组分析森林图(按种族) A.等位基因T vs C；B.显性模型；C.隐性模型；D.TT vs CC。

按对照组来源和SNP检测法进行亚组分析，结果显示，等位基因和各基因型在病例组和对照组间的差异均无统计学意义(表2)。

表2 CD14基因-159C/T多态性与AR易感性关系的meta分析结果

异质性分析，各组及亚组I²值均≥50%，存在异质性。异质性来源分析：尽管进行了细致的文献检索，严格的数据分析，但整个人群中仍存在异质性，在进行亚组分析时，大多数模型的异质性未得到消除和降低，说明种族和对照组来源及实验方法不是异质性来源。

敏感度分析，通过每次排除1篇文献观察结果稳定性，显示在统计学上比较稳定。单个研究对总体结果无明显影响(图4)。

图4 单个研究对总体影响的敏感性分析结果(显性模型)

发表偏倚显示：等位基因TvsC，P=0.466；显性模型TT+CTvsCC，P=0.602；隐性模型TTvsCC+CT，P=0.348；CTvsCC，P=0.251；TTvsCC，P=0.251：故各模型之间不存在发表偏倚。

3 讨论

基因多态性的出现改变了编码序列或者转录、翻译的过程，从而改变了基因表达产物蛋白质的性状、活性及剂量，最终改变了疾病的发生、发展规律[14]。由于启动子区是调控蛋白表达的关键因素之一，因此位于启动子区的基因多态性具有重要意义。位于启动子区的CD14基因位于第5号染色体长臂5q31.1，全长约为3 900 bp，相对分子质量为5 500。CD14是脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)受体，由于CD14分子缺少跨膜区，只有与LPS形成复合物后，再进一步与细胞表面的Toll样受体4 (Tolllike receptor 4，TLR4)结合，通过信号转导通路使转录因子活化，引起相关基因的转录，释放大量炎症介质，从而诱导Thl型免疫上调，抑制Th2型免疫，降低变应性疾病的发生率[15-16]。CD14基因变异可能影响不同个体对内毒素和LPS的反应性，从而影响变应性疾病的发生[17]。

CD14基因-159C/T基因多态性可引起多种疾病。Litonjua等[18]研究发现，美国东北部2岁儿童CD14基因第159位CT和TT基因型与总IgE水平和湿疹发病率的增高有关。Postma等[19]研究荷兰人CD14基因多态性与特应性疾病的关系，发现C等位基因纯合子CC与CT和TT比较有较高的皮肤试验阳性率和高血清总IgE水平。Saçkesen等[20]研究发现，土耳其613例哮喘患儿的T等位基因影响总IgE水平，TT基因型与低IgE水平有关。

关于CD14基因多态性与AR的发病风险关系，报道结果不一。Kang等[5]发现，164例韩国常年性AR患儿与160例健康对照的基因型频率无明显不同，CC纯合子与高总IgE水平及皮肤点剌试验阳性率高有关。张海邻等[6]研究显示，温州地区汉族2～12岁AR患儿CDl4-159基因型以TT为主，未发现CDl4-159基因型和哮喘、变应性鼻炎、特应性皮炎及IgE水平之间存在相关性。鲁红梅等[13]研究显示，CDl4-159等位基因C与AR有关。

本研究共纳入对CD14基因-159C/T多态性与AR易感性进行研究的9篇文献，总体发现CD14基因-159C/T多态性与AR发病风险无明显相关性；但是按种族进行亚组分析时发现，相较于C等位基因，非洲埃及AR患儿在CD14基因159位点携带的T等位基因可增加AR的易感性，TT基因型较其他基因型更增加AR的易感性。但是非洲组只有1篇文献，可能无法全面评价非洲人群CD14基因-159C/T多态性与AR易感性的关联，需进一步增加文献及样本量。

在CDl4基因-159C／T基因多态与AR易感性的关系研究中，C和T哪个为易感基因，结论不同，除种族差异外，我们根据文献总结以下几点原因：

1)不同水平的内毒素暴露影响不同基因型对内毒素的反应。Martinez等[21]和Liebers等[22]研究发现，T等位基因在高水平内毒素暴露时是变应性疾病的风险因素，在低水平内毒素暴露时为保护性因素；而C等位基因恰恰相反。由此可见，环境因素的变化对变应性疾病的发病起着很大的作用，不同水平的LPS和暴露时间都可能影响CDl4-159基因多态性和特应性疾病发病的关系。因此研究不同水平LPS暴露对CDl4的影响有助于解决这个问题。

2)随着年龄的增长，环境的变化，成人与小儿AR基因必然存在差异。O’Donnell等[23]报道，CDl4-159基因多态性具有年龄差异，在8～25岁人群中，CDl4基因-159C碱基对变应性疾病的影响主要发生在8～12岁年龄段。

3)不能排除CD14基因与其他位点基因的共同连锁作用。Hussein等[7]研究了埃及500例哮喘、150例AR及150例对照儿童，结果显示，CD14基因-159T、CD14基因-550T等位基因和CD14基因-159T/-550T单倍型与特应性哮喘与AR有关，CD14基因-159TT和CD14基因-550TT基因型与烟草烟雾暴露儿童的IgE水平升高有关。

本研究存在的局限性：①纳入文献只限于公开发表的文献，影响了资料的全面性，有可能影响研究结果的统计效能，有待于进一步开展样本量更大的临床研究以提供更具代表性的统计分析；②由于原始信息不足，数据不能按疾病严重程度、性别、年龄、环境因素等变量进行分层；③研究人群只有亚洲和非洲，缺乏欧美等其他种族的数据；④AR是一种复杂的多基因遗传性疾病，不能排除CD14基因与其他位点的共同连锁作用。