血AFP/CEA与HCY联合检测在诊断原发性肝细胞癌中的应用

余道武 余天雾 苟毅 杨陆蒙

肝细胞癌（hepatocellular carcinoma，HCC）是一种常见的原发性肝癌，早期缺乏典型的临床症状，就诊时大多已发展为中晚期，临床预后较差［1］。目前，临床常采用血清甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）联合超声检查方法来诊断，但研究显示，AFP对一些早期较小的肝癌诊断敏感性不理想［2］。寻找新的高敏感性的指标进行联合检测，以提高临床HCC 的早期诊断率具有重要意义。癌胚抗原（Carcino-embryonic antigen，CEA）是一种广谱的肿瘤标识物，在多种恶性肿瘤中具有阳性表达［3］。临床研究显示，AFP/CEA 可以提高AFP 和CEA 对HCC 的诊断价值，更准确地区分转移性和原发性肝癌［4］。血浆同型半胱氨酸（Homocysteine，HCY）是蛋氨酸代谢过程中的中间产物，其合成与代谢与肝功能密切相关，可用于临床HCC 的诊断［5］。本研究将分析血AFP/CEA 与HCY 联合检测在诊断HCC 中的应用价值，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2016年6月到2018年9月在重庆医科大学附属永川医院收治的85 例HCC 患者作为HCC组。纳入标准：经组织学穿刺活检确诊为HCC 患者［6］。排除标准：合并其它系统恶性肿瘤者；合并严重心脑血管系统疾病者；合并免疫系统疾病者；妊娠期或哺乳期患者；合并血液系统疾病者；临床资料不完整者。HCC 患者根据UICC/AJCC 第7 版TNM 分期［7］，Ⅰ期28 例，Ⅱ期57 例。选取同期收治的100 例非HCC 患者为对照组，疾病类型：慢性肝炎48 例、肝硬化38 例、继发性肝癌8 例、其它肝脏病变者6 例。本研究经院医学伦理委员会批准通过，受试者或家属均签署知情同意书。

1.2 检测指标

记录两组患者的性别、年龄、吸烟史（连续或累计吸烟6 个月或以上）、饮酒史（存在长期饮酒超过5年，且平均每天饮酒量＞40 g/d）、Child-Pugh 分级［8］等一般资料。于入院第2 d 清晨，采集空腹血液3～5 mL，离心（3 500 rpm，r=10 cm，10 min），取上清。采用ELISA 法检测HCY 水平（试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司），采用贝克曼Access 2全自动发光分析仪及配套检测试剂检测患者血清AFP、CEA 水平，严格按操作说明进行操作。

1.3 统计学处理

采用SPSS 17.0 统计软件进行分析，计量资料均以（±s）表示，采用t检验；计数资料均以n（%）表示，采用χ2检验；采用多因素Logistic 回归分析影响HCC发生的独立危险因素；采用ROC 分析AFP/CEA 联合HCY 对HCC 的诊断价值，曲线下面积（AUC）表示预测价值；以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般临床资料

HCC 组饮酒史、吸烟史所占比例明显高于非HCC 组，血HCY、AFP、CEA 和AFP/CEA 水平明显高于非HCC组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 HCC 患者的一般资临床料［n（%），（±s）］Table 1 General clinical data of HCC patients［n（%），（±s）］

表1 HCC 患者的一般资临床料［n（%），（±s）］Table 1 General clinical data of HCC patients［n（%），（±s）］

一般资料年龄性别n t/χ2值0.685 0.441 P 值0.494 0.507饮酒史7.228 0.007吸烟史Child-Pugh分级男女有无有无 A B C 4.736 0.030 185 153 32 70 115 57 128 48 104 33 185 185 185 185 HCC 组（n=85）52.34±10.27 72（84.71）13（15.29）41（48.24）44（51.76）33（38.82）52（61.18）18（21.18）50（58.82）17（20.00）20.85±6.41 223.64±107.45 9.26±4.71 22.47±6.57对照组（n=100）51.27±10.85 81（81.00）19（19.00）29（29.00）71（71.00）24（24.00）76（76.00）30（30.00）54（54.00）16（16.00）14.76±4.22 41.52±15.76 3.71±1.24 14.16±4.27 1.981 0.376 HCY（μmol/L）AFP（ng/mL）CEA（ng/mL）AFP/CEA 7.733 16.746 11.335 10.340＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 多因素Logstic 回归分析影响HCC 发生的因素

选择2.1 中影响HCC 发生的差异有统计学意义的变量进行赋值，非HCC=0，HCC=1；无饮酒史=0，有饮酒史=1；无吸烟史=0，有吸烟史=1。采用直接进入法将单因素分析有差异的变量带入方程进行Logstic 回归分析，结果显示，合并饮酒史、HCY 升高、AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高均为影响HCC 发生的独立危险因素（P＜0.05）。见表2。

表2 多因素Logstic 回归分析影响HCC 发生的因素Table 2 Multivariate Logstic regression analysis of factors affecting the occurrence of HCC

2.3 血AFP/CEA 与HCY 联合检测对HCC 的诊断价值

AFP/CEA 联 合HCY 诊 断HCC 的AUC 为0.918 优于单一检测（P＜0.05）。见表3、图1。

表3 血AFP/CEA 与HCY 联合检测诊断HCC 的ROC 特征Table 3 ROC characteristics of combined detection of blood AFP/CEA and HCY in the diagnosis of HCC

图1 血AFP/CEA 与HCY 联合检测对HCC 的诊断价值Figure 1 The diagnostic value of combined detection of blood AFP/CEA and HCY for HCC

2.4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 与TNM 分期之间的关系

Ⅱ期患者血清HCY、AFP 和AFP/CEA 水平明显高于Ⅰ期患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表4。

表4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 与TNM 分期之间的关系（±s）Table 4 The relationship between blood AFP/CEA and HCY and TNM staging of HCC patients（±s）

表4 HCC 患者血AFP/CEA 和HCY 与TNM 分期之间的关系（±s）Table 4 The relationship between blood AFP/CEA and HCY and TNM staging of HCC patients（±s）

nⅠ期Ⅱ期t 值P 值28 57 HCY（μmol/L）18.21±5.47 22.16±6.13 2.890 0.005 AFP（ng/mL）190.59±58.46 239.67±70.34 3.188 0.002 CEA（ng/mL）8.75±2.55 9.51±2.86 1.192 0.237 AFP/CEA 21.57±5.49 24.65±6.31 2.204 0.030

3 讨论

HCC 是一种常见的恶性肿瘤，目前临床医师主要根据患者病情发展采取个体化的综合治疗，早期诊断和治疗是改善患者预后的关键。AFP 是目前评估HCC 最敏感最常用的指标，但近年来研究显示，AFP 对于早期肝癌的诊断存在一定的局限性［9］。本研究分析了影响HCC 发生的因素，发现合并饮酒史为影响HCC 发生的危险因素。廖玉宜等［10］研究显示，长期饮酒会使血液中乙醇浓度升高，导致酒精性肝炎和肝硬化等的发生，增加HCC 发生的风险，与本研究结果基本一致。

本研究中，HCC 患者体内的AFP 和CEA 水平显著升高。AFP 为一种白蛋白家族的糖蛋白，参与调节机体多种生物学过程，在多种肿瘤中均可表现出较高浓度，临床常用于HCC 的诊断［11］。CEA 是从结肠癌和胚胎组织中提取的一种可溶性糖蛋白，在多种恶性肿瘤中均具有高表达［12］。本研究中，AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高等均为影响HCC 发生的独立因素，且AFP/CEA比值对HCC 的诊断价值高于AFP 或CEA 单独诊断，提示临床可优先选择AFP/CEA 诊断HCC。临床研究显示，CEA 是一种广谱的肿瘤相关抗原，不能作为诊断某种恶性肿瘤的特异性指标，临床常采用联合诊断来提高其诊断价值［13］。王铮等［14］研究显示，AFP 与CEA 联合检测可以提高对HCC 的诊断价值，与本研究结果基本一致，提示临床可优先采用AFP/CEA 进行HCC 诊断。

本研究中，HCC 患者体内的HCY 水平显著升高，且HCY 水平升高是影响HCC 发生的独立因素。HCY 是一种含硫氨基酸，在体内有两种代谢途径，少部分HCY 在维生素B6 的参与下生成半胱氨酸，大部分在维生素B12 和叶酸的作用下生成蛋氨酸［15］。肝脏是HCY 的主要代谢场所，肝功能异常可影响HCY 在体内的代谢过程，导致血HCY 累积，水平异常升高。肖健等［16］研究显示，血清HCY 水平与肝脏的病变程度有关，有望应用于肝脏疾病的诊断和预后评估。张庚等［17］研究显示，血浆HCY 水平可以在一定程度上反映肝脏的损伤程度，对HCC 具有一定的诊断价值，与本研究结果基本一致，提示临床可根据患者的HCY 水平预测其肝功能损伤程度。本研究中，AFP/CEA 比值联合HCY 对HCC 患者的临床诊断价值显著高于单独诊断，提示临床可联合检测AFP/CEA 和HCY，以提高HCC 的检出率。本研究分析了HCC 患者血HCY、AFP 和AFP/CEA 水平与TNM 分期之间的关系，发现TNM 分期为Ⅱ期组患者血清HCY、AFP 和AFP/CEA 水平明显高于Ⅰ期组。结合本研究结果说明，临床医师可根据HCY、AFP 和AFP/CEA 水平评估HCC 患者的病情发展，指导临床治疗。

综上所述，合并饮酒史、HCY 升高、AFP 升高、CEA 升高和AFP/CEA 比值升高均为影响HCC 发生的独立危险因素，AFP/CEA 比值联合HCY 对HCC 患者的临床诊断价值显著高于AFP/CEA 或者HCY 单独诊断，临床可联合检测患者的血清AFP/CEA 和HCY，以提高HCC 的诊断率。