达州市家禽高致病性禽流感免疫抗体检测及分析——以2021年为例

张蕾 徐倚天 刘俐君 赵小波 杨青 李清竹 李成 高嵩 黎丁箕

(达州市动物疫病预防控制中心，四川 达州 635000)

禽流感(Avian influenza，AI)是由A型流感病毒引起的多种禽类易感的传染病。禽流感病毒(Avian Influenza Virus，AIV)根据血凝素(HA)抗原性的不同可分为H1～H18亚型，其中由H5和H7亚型毒株引起的称之为高致病性禽流感(Highly pathogenic avian influenza，HPAI)，病死率可达100%，被世界动物卫生组织(OIE)列为须报告动物疫病[1]，被我国列为优先防控和重点防范的一类动物疫病[2]，并采取强制免疫的预防措施。1997年香港首次出现禽流感感染人并致人死亡的事件[3]，此后AIV感染人的事件时有发生，表明AIV除了可以感染禽类，还可以跨越种间屏障对人类的生命安全造成威胁[2]。近年来，HPAI病毒毒株变异加快，疫情形势严峻复杂[4]，四川省境内也有报道发生高致病性禽流感疫情[5]，严重威胁着达州市养禽业。为及时掌握达州市家禽高致病性禽流感免疫效果，达州市动物疫病预防控制中心随机采集了全市124个场点的1316份鸡血清和480份水禽(鸭、鹅)血清进行高致病性禽流感免疫抗体监测，为科学防控达州市高致病性禽流感提供可靠依据。

1 材料与方法

1.1 样本

收集2021年来自达州市124个场点(包括规模场、散养户、市场)的1796份家禽血清，其中鸡血清1316份，水禽血清480份。

1.2 主要试剂

禽流感病毒H5亚型(Re-11株)、H5亚型(Re-12株)以及H7(Re3株)亚型血凝抑制试验抗原，均来自哈尔滨国生生物科技有限公司。

1%鸡红细胞悬液，无菌采集3只无禽流感抗体的健康公鸡心脏血，与等体积阿氏液混匀后按常规方法制备。

1.3 检测方法

参照《高致病性禽流感诊断技术》(GB/T 18936-2020)中的血凝试验和血凝抑制试验(HA-HI试验)进行操作。

1.4 结果判定

根据《国家动物疫病监测与流行病学调查计划(2021—2025年)》要求，免疫合格个体的判定标准为抗体滴度≥24，免疫合格群体的判定标准为免疫合格个体数量占群体总数的70%(含)以上。

2 结果

2.1 不同毒株HPAI免疫抗体检测结果

2021年，全市共检测场点124个，3种毒株免疫抗体均合格的场点105个，合格比例为84.68%，其中H5亚型(Re-11株)、H5亚型(Re-12株)、H7亚型(Re3株)免疫合格场点的比例分别为86.29%、93.55%、97.58%。共检测血清1796份，H5亚型(Re-11株)、H5亚型(Re-12株)、H7亚型(Re3株)免疫抗体合格率分别为91.09%、94.82%、97.55%。3种毒株的免疫合格场点比例和免疫合格率均为H7亚型(Re3株)最高，H5亚型(Re-12株)次之，H5亚型(Re-11株)最低。

2.2 不同场点类型HPAI免疫抗体检测结果

由表1可知，规模场、散养户、市场分别检测场点54个、47个、23个，免疫合格场点的比例分别为88.89%、76.60%、91.30%，其中H5亚型(Re-11株)免疫合格场点的比例分别为88.89%、80.85%、91.30%，H5亚型(Re-12株)免疫合格场点的比例分别为94.44%、89.36%、100%，H7亚型(Re3株)免疫合格场点的比例分别为98.15%、95.74%、100%。由表2可知，规模场、散养户、市场分别检测血清样品1100份、531份、165份，其中H5亚型(Re-11株)免疫抗体合格率分别为91.55%、89.27%、93.94%，H5亚型(Re-12株)免疫抗体合格率分别为95.09%、93.79%、96.36%，H7亚型(Re3株)免疫抗体合格率分别为98.00%、96.42%、98.18%。

表1 不同场点类型HPAI免疫抗体合格场点比例

表2 不同场点类型HPAI免疫抗体合格率

3种毒株的免疫合格场点比例和免疫合格率从高到低均为市场、规模场、散养户。而相同场点类型的免疫合格场点比例最低的均为H5亚型(Re-11株)，免疫抗体合格率从高到低均为H7亚型(Re3株)、H5亚型(Re-12株)、H5亚型(Re-11株)。

2.3 不同动物种类HPAI免疫抗体检测结果

由表3可知，鸡、水禽分别检测场点86个、38个，免疫合格场点的比例分别为87.21%、78.95%，其中H5亚型(Re-11株)免疫合格场点的比例分别为88.37%、81.58%，H5亚型(Re-12株)免疫合格场点的比例分别为95.35%、89.47%，H7亚型(Re3株)免疫合格场点的比例分别为97.67%、97.37%。由表4可知，鸡、水禽分别检测血清样品1316份、480份，其中H5亚型(Re-11株)免疫抗体合格率分别为92.10%、88.83%；H5亚型(Re-12株)免疫抗体合格率分别为95.52%、92.92%；H7亚型(Re3株)免疫抗体合格率分别为97.95%、96.46%。

表3 不同动物种类HPAI免疫抗体合格场点比例

表4 不同动物种类HPAI免疫抗体合格率

3种毒株的免疫合格场点比例和免疫合格率均为鸡高于水禽，相同动物种类的免疫合格场点比例和个体合格率从高到低均为H7亚型(Re3株)、H5亚型(Re-12株)、H5亚型(Re-11株)。

3 讨论

目前，我国尚未有治疗禽流感的特效药物[6]，因此，禽流感的预防环节显得尤为重要。做好家禽免疫是防控禽流感最有效的措施，而反映免疫情况的重要依据是抗体检测[5]。因禽流感主要流行毒株发生变化，2021年达州市开始使用重组禽流感病毒(H5加H7)三价灭活疫苗(H5N1 Re-11株加Re-12株，H7N9-Re3株)疫苗进行免疫。本次研究从检测总体结果上看，达州市高致病性禽流感H5亚型(Re-11株)、H5亚型(Re-12株)和H7亚型(Re3株)免疫合格场点比例均超过85%，免疫抗体合格率均在90%以上，表明2021年达州市高致病性禽流感总体上已建立较好的免疫保护屏障。

从毒株上来看，高致病性禽流感免疫合格场点比例和免疫抗体合格率均为H7亚型(Re3株)最高，H5亚型(Re-12株)次之，H5亚型(Re-11株)最低。这可能与不同疫苗毒株有不同的免疫原性有关[7]。

从场点类型上看，无论是免疫合格场点比例还是免疫抗体合格率，都是市场最高，规模场次之，散养户最低。造成此现象的原因可能是规模场生物安全意识较高，饲养管理规范，专业技术水平较高，大多数坚持程序化免疫[4]，而农村散养户的防疫意识还相对较为淡薄，饲养管理水平欠缺，不能按规定的日计划免疫等[8]。

从动物种类上看，鸡的免疫抗体水平高于水禽，这可能是由于养殖户对水禽的重视免疫程度不够强[5]、水禽本身对禽流感疫苗的免疫应答反应性稍低等原因造成[9]，也有可能是水禽体内含有一些非特异性凝集因子，对鸡红细胞有非特异性凝集的作用，导致检测结果偏低[10]。

4 建议

达州市家禽高致病性禽流感整体免疫效果良好，但有个别场点免疫抗体不达标，存在零星散发禽流感疫情的风险。在今后的高致病性禽流感防控工作中，重点关注水禽、散养户的免疫和抗体水平监测，对群体免疫不达标场点要及时加免和补免，强化免疫屏障；加大高致病性禽流感防控的宣传培训和技术指导，增强防疫意识，提升生物安全管理水平；增加水网密集地、活禽贩运户、活禽宰杀点等重点区域HPAI的监测频次和数量，进一步扩大风险监测点。同时，达州市处在候鸟迁徙线路的辐射范围内，野生鸟类资源丰富，作为禽流感病毒的天然储存库，野生鸟类在禽流感防控中的地位不容小觑[11]，要重视养殖场内防鸟设施的配备，加强野鸟栖息地等鸟类的监测力度[12]，有效降低疫情发生风险。