2021年无锡市部分猪场口蹄疫免疫情况调查

毛爱民 周丽 郑砚超 李花 杨芝芬 周虹妤 金嘉旻

摘要：为了解生猪养殖场猪口蹄疫免疫情况及抗体水平变化规律，对无锡4个生产县区随机抽取7个猪场通过3、5、7、9、11月定期监测方式，随机采取不同年龄猪血样，通过ELISA方法对样品进行猪口蹄疫免疫抗体检测。检测结果表明所抽猪场猪口蹄疫的平均抗体合格率为89.44 %，达到国家免疫合格率要求。但从个体看，部分猪场存在免疫合格率偏低情况。本文通过对监测结果进行分析，并从生物安全、防疫制度、人员培训等方面提出相关建议，科学、合理制定综合防制方案，减少猪口蹄疫的发生和流行。

关键词：口蹄疫 抗体 免疫效果

【中图分类号】 S851 【文献标识码】 A      【文章编号】2107-2306（2022）12--01

口蹄疫是口蹄疫病毒引起偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性传播速度极快的烈性传染病，也是世界上危害最严重的动物传染病之一。主要特征是在口腔粘膜、蹄部、乳房、皮肤出现水疱，继而发生溃疡的一类传染病[1]。口蹄疫病毒为小DNA病毒科口蹄疫病毒属，共有7个血清型，分别为O型、A型、C型、SAT1（南非1型）、SAT2（南非2型）、SAT3（南非3型）、Asia1（亚洲1型），该病感染性强、传播途径多、速度快、不易控制和消灭，曾多次在世界范围内暴发流行，造成巨大政治、经济损失。鉴于此，世界动物卫生组织（OIE）将其列为A类传染病之首，我国规定为一类动物疫病。该病最主要的直接传染源是病猪、带毒猪，尤以发病初期的病猪最为危险，主要通过消化道、呼吸道、破损的皮肤、黏膜、眼结膜、人工输精直接或间接传播。口蹄疫病毒型多且易变异，型与型之间的抗原性不同，血清型间无血清学交叉反映和交叉免疫现象，且同一血清型内不同病毒间抗原性亦有变化[2]，给防疫工作带来很大困难。

目前，我国口蹄疫防控主要靠免疫为主，为了解无锡地区部分猪场口蹄疫免疫情况和抗体水平，更好地指导实际疫病防控工作，2021年，对辖区内4个生猪生产县区A、B、C、D随机抽取了7个猪场，分别于3、5、7、9、11月采集血清样本进行猪口蹄疫抗体检测，分析免疫效果，提出相关建议，为提升无锡市猪口蹄疫防控水平提供一定参考依据。

1 材料与方法

1.1样品来源

从无锡市4个生产县区随机抽取7个猪场采集血清样品，共360份。其中，A区100份、B区110分、C区50份、D区100份。

1.2检测试剂与器材

我市生猪口蹄疫免疫主要为O型口蹄疫合成肽疫苗、O型口蹄疫灭活疫苗，根据使用疫苗品种的不同，选择相应的抗体检测试剂盒。

O型口蹄疫合成肽疫苗抗体检测盒，产品名称：猪O型口蹄疫合成肽结构蛋白ELISA抗体检测试剂盒，生产厂家：深圳芬德，生产批号：21002;O型口蹄疫灭活疫苗抗体检测盒，产品名称：O型口蹄疫ELISA诊断试剂盒，生产厂家：法国ID-VET，生产批号：F90。检测仪器主要包括酶标仪、离心机、洗板仪器、微量移液器等。

1.3检测原理与方法

猪O型口蹄疫合成肽结构蛋白ELISA抗体检测试剂盒应用ELISA原理检测猪血清、猪血浆样本中猪口蹄疫病毒O型抗体。实验室在酶标板中加入对照血清和代检样本，经温育后若样品中含有猪口蹄疫病毒O型抗体，则将与酶标板上抗原结合，经洗涤除去未结合的其他成分后，再加入酶标记物，与酶标板上抗原抗体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物，在孔中加TMB底物液，与酶反应形成蓝色产物，显色深浅与样品中的特异性抗体含量成正相关;加入终止液终止反应后，产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值，可知样品是否含有口蹄疫病毒O型抗體。

按照说明书操作方法进行检测，当样品A值≥0.38为阳性，样品A值在0.2到0.37之间为可疑，样品A值<0.2为阴性。

O型口蹄疫灭活疫苗抗体检测盒原理为反应板微孔由非传染性O亚型口蹄疫病毒抗原FMDV包被。在反应板微孔加入待测样本和对照，如果存在抗O亚型FMDV抗体，将形成抗原-抗体复合物从而覆盖病毒表位。洗涤后，向微孔中加入抗O亚型-辣根过氧化物酶HRP标记抗体，它与剩余的游离表位结合，形成抗原-美标抗体复合物。通过洗涤去除过量的酶标抗体后，加入底物溶液TMB。显色反映取决于待测样本中特异性的量。

2 结果与分析

2.1总体检测情况

无锡市各地区猪口蹄疫抗体检测结果见表1。总体来看，无锡市抽检的360份血清样品中，有322份样品猪口蹄疫抗体免疫合格，抗体合格率为89.44%，表明全市整体猪口蹄疫抗体免疫效果较好，猪群具有较强的群体免疫力。从每个地区抗体合格率来看，猪口蹄疫免疫抗体检测合格率都在80%以上，且A区抗体检测合格率相对较高，达到99.00%。

2.2各时间段检测情况

无锡市各时间段猪口蹄疫抗体检测结果见表2。3、5、7、9、11月份猪口蹄疫免疫抗体检测合格率分别为74.29%、90%、98.75%、98.57%、85%，表明除了3月份，其他月份猪口蹄疫免疫效果整体处于较高于水平。

从检测的数据看，虽然猪口蹄疫总体抗体水平高于80%，但从单个场来看，不同地区不同场之间抗体水平差异较大，个别猪场抗体水平偏低，说明有部分地区猪场防疫工作仍有待提升。经分析，抗体水平偏低的原因可能是：1、抽检的部分样品不符合采样要求，存在未及时开展免疫或未达到免疫保护期限。2、猪品种问题，自身对疫苗应答水平偏低。3、因疫苗保存条件、使用剂量、注射方式等不够科学、规范，导致免疫效果较差。

2.3不同疫苗检测情况

对使用O型口蹄疫合成肽疫苗、O型口蹄疫灭活疫苗产生的抗体进行对比检测结果见表3。从表中可以看出猪场使用O型口蹄疫合成肽疫苗产生的抗体水平要高于O型口蹄疫灭活疫苗产生的抗体，且保持较高的合格率。经分析，除了和疫苗本身有关系，还和养殖场及时、科学开展O型口蹄疫免疫工作有较大关系。

3 结论

目前，口蹄疫病种被列入国家强制免疫病种之一，通过每年开展口蹄疫强制免疫工作，为口蹄疫科学防控夯实了基层，近年来，无锡总体疫情态势平稳。从2021年全市监测的结果来看，总体水平较高，且处于相对稳定状态，无论使用O型口蹄疫合成肽疫苗还是O型口蹄疫灭活疫苗，都能获得较好的保护率，但从个体来看，经调查存在防疫主体意识有所淡化、免疫不及时、免疫不科学等问题，需加以重视，重点做好以下几点工作：一是建立健全生物安全管理制度。一般情况下FMD 不像猪瘟、猪链球菌、大肠杆菌那样，病原隐匿在各场的猪群中，而是从场外传入。因此，限制乃至拒绝来自FMD一区的易感动物及其副产品进入非疫区，是控制FMD最有效的预防措施[1]。因此需要制定完善各项生物安全制度，做好防鸟、防鼠、防虫以及消毒、人物料管控等工作，切断传染源和传播途径。二是制定科学规范的免疫制度。包括免疫程序、疫苗保管、定期监测等，及时、科学掌握养殖场内免疫状况，做到心中有数。特别近几年来，国家、省市县大力推行“先打后补”工作，当前乃至今后更需要养殖场提高免疫意识和免疫水平。三是加强饲养、管理、技术人员培训工作。再好的制度没有掌握要点的人去实行都是一纸空文，因此，有必要加强饲养、管理、技术等各岗位的人员培训，熟悉各项政策、规章制度并严格执行，才能形成合力防范未然。

参考文献：

[1]宣长和，马春全，陈志宝等. 猪病学.中国农业大学出版社， 2002， 199-207.

[2]宣长和，张桂红，于长江等. 规模化猪场疾病信号监测诊治辩证法一本通图谱.中国农业科学技术出版社， 2013， 219.