白酒原酒中总酯皂化回流时间对总酯测定结果的影响分析

王 慧，陈 宇，王海英，越祖梅，刘 婷

（内蒙古河套酒业技术中心，内蒙古巴彦淖尔 015400）

白酒中的呈香呈味物质种类较多，呈香物质主要为酯类物质。酯类物质主要包括乙酸乙酯、丁酸乙酯、己酸乙酯、醋酸戊酯、丁酸戊酯和乳酸乙酯等等，统称为白酒中的总酯。通常情况下，每个酒企都要对原酒进行总酯的检测，来判定在发酵过程中呈香物质含量是否达标。一般情况下是采用国标GB/T 10345—2007 8.1 指示剂法来检测白酒中的总酯，在检测步骤中回流皂化30 min，由于酯类皂化不完全，影响检测结果的准确度和稳定性。

本研究对该项方法进行优化和改进，延长酯类皂化反应回流时间，同时设计加标回收实验，检测结果稳定性与准确度较好。

1 材料与方法

1.1 材料、试剂及仪器

酒样：本公司车间生产的白酒原酒样品。

试剂：NaOH标准滴定溶液c（NaOH）=0.1 mol/L；NaOH 标准滴定溶液c（NaOH）=3.5 mol/L；HSO标准滴定溶液c（HSO）=0.1 mol/L；乙醇溶液（无酯）40%（v/v）；酚酞指示剂（10g/L）；乙酸乙酯。

仪器设备：全玻璃蒸馏器；全玻璃回流装置；碱式滴定管；酸式滴定管。

1.2 试验方法

1.2.1 检测原理

用碱中和样品中的游离酸，再加入一定量的碱与酯类发生皂化反应，最后用硫酸标定剩余的碱。通过碱消耗量计算总酯的含量。

1.2.2 检测方法

取白酒原酒样品50 mL 于250 mL 圆底烧瓶中，加1 滴酚酞指示剂，以NaOH 标准滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]滴定至粉红色，记录数据。再准确加入NaOH 标准滴定溶液[c（NaOH）=0.1 mol/L]25 mL（若样品总酯含量高时，可加入50 mL），放入沸石，装上冷凝管（冷却水温度宜低于15 ℃），沸水浴，冷凝回流30 min，冷却，用HSO标准滴定溶液[c（HSO）=0.1 mol/L]标定多余的NaOH，记录数据。

取乙醇溶液（无酯）[40%（v/v）]50 mL于250 mL圆底烧瓶中，按上述方法同样操作做空白试验，记录数据。白酒原酒样品中总酯含量的计算：

式中：X——样品中总酯的质量浓度，以乙酸乙酯计，g/L；

在《傲慢与偏见》这部小说的话语分析当中，可以找到很多真实语料进行语义学和语用学意义分析的对比研究。笔者从下面三个原文的语料片段入手进行研究。

C——硫酸标准滴定溶液的实际浓度，mol/L；

V——空白实验样品消耗硫酸标准滴定溶液的体积，mL；

V——样品消耗硫酸标准滴定溶液的体积，mL；

88——乙酸乙酯的摩尔质量的数值，g/mol；

50.0——吸取样品的体积，mL。

1.2.3 试验方案设计

1.2.3.1 酯类皂化时间设计

按照检测方法进行样品处理，在检测步骤中准确加入25 mL 的0.1 mol/L 氢氧化钠溶液后这一环节，设计皂化回流时间梯度，考察酯类皂化是否完全。在实验的过程中每个样品至少做1 个平行样。具体设计方案见表1。

表1 皂化时间实验设计

1.2.3.2 加标回收实验

按照检测方法进行样品处理，在检测步骤中酯类皂化这一环节中加入标准物质，设计加标回收实验，考量酯类皂化时间的不同是否对标准物质有损失，通过回收率来验证最佳的皂化时间，具体设计见表2。

表2 加标回收设计

1.2.3.3 精密度和准确度

采用相对标准偏差RSD 值来表示精密度，相对标准偏差值越低表明检测值精密度越好，检测结果的重现性越好。在重复条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值，不应超过平均值的2%。采用相对误差来表示准确度，相对误差越低表示检测结果越准确。

2 结果与分析

2.1 皂化时间对总酯含量测定结果的影响

取多个样品按照本文标注检测方法检测，在酯类皂化回流阶段根据设定的实验方案进行回流皂化，在14 ℃温度下，不同皂化时间下总酯含量测定结果见表3和表4。

由表3、表4 可知：皂化时间对原酒总酯含量测量结果有一定的影响，在皂化30 min时相对误差和RSD 值均偏大，随着皂化时间的延长相对误差和RSD值逐渐降低，当皂化时间达到45 min时相对误差和RSD 值处于最低状态，RSD 值几乎为零，说明样品多次测定重复性较好；相对误差在0 %～2 %范围之内，说明检测准确度更高。之后随着皂化时间的增加趋于稳定状态。通过皂化时间对检测结果影响的分析实验，得出45 min 可以达到皂化完全，相对误差和RSD 值最低，测定结果几乎不再随皂化时间延长而改变。

表3 不同皂化时间原酒中的总酯含量

表4 不同皂化时间测定原酒总酯结果的精密度和准确度

2.2 回收率对皂化时间确定的验证试验

在探索皂化时间时检测的样品中任意选择2份原酒样继续设计加标回收实验，验证已经确定的皂化时间是否可行、准确。在加标回收实验中，每个样品做2个平行样，具体见表5。

表5 回收率对皂化时间验证

根据表5 可知，本文设定的皂化时间，在做加标回收实验中回收率均较高，在93%～103%范围内，在皂化时间为45 min 时回收率达到最高，接近100%，说明在皂化45 min时，被测物质几乎没有损失，验证了检测结果的准确度。

3 结论

原酒总酯的检测中冷凝回流皂化过程按照国标GB/T 10345—2007 8.1 指示剂法中所规定的皂化时间30 min是不能完全皂化的，影响到了检测结果的准确程度和精密度。本文通过多种实验，探寻到检测结果更加准确和精密度更高的最佳皂化时间为45 min，即可皂化完全，RSD 值几乎为零，相对误差在0 %～2 %，回收率可达100 %，准确程度更高。

原酒酒样中含有许多微量成分，包括酸、酯、醛、醇、酮、酚等，基质较为复杂，检测时影响因素较多。本研究对国标方法进行改进，提出在原酒实验中，延长皂化时间。改进后的方法用于白酒原酒中总酯的测定，检验结果稳定性好，更加方便于企业的生产。