西洋参 枸杞子抗氧化护肤乳液的制备

张立秋， 黎西雅， 韩美子， 陈煜， 朴敏艳， 施溯筠

( 延边大学 药学院， 吉林 延吉 133002 )

氧化损伤是皮肤损害及衰老的主要原因之一，因此具有抗氧化和延缓皮肤衰老的护肤品受到人们的青睐[1-2].西洋参(Panaxquiquefolium)为五加科人参属多年生草本植物，中医常用于治疗失眠烦躁、干咳无痰、肢体乏力等症状[3].枸杞子(Lyciumbarbarum)为茄科枸杞的成熟果实，中医常用于治疗虚劳精亏、腰漆酸软、眩晕、耳鸣、血虚、目昏不明等症状[4].研究显示，西洋参和枸杞子复配具有增强免疫、降血脂和抗疲劳等功效[5-6].目前，市场大多是将这2种中药制成口服用药或保健品[7]，而将二者复配制成抗氧化乳液的文献鲜有报道.为此，本文将西洋参、枸杞子提取液复配作为活性成分制备了一种护肤乳液，并对该护肤乳液的感官指标、理化性质、抗氧化性能以及保湿效果进行了评价.

1 实验部分

1.1 仪器

752N紫外分光光度计(日立科学仪器有限公司)； 80 - 2电动离心机(河南三顺教学仪器有限公司)； FA - 2004电子天平(上海精天电子仪器有限公司)； KQ5200E超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)； R20ID旋转蒸发器(上海豫康科教仪器设备有限公司)； HH - 6恒温水浴锅(金坛市科析仪器有限公司)； SHB - IIIA循环水式多用真空泵(上海豫康科教仪器设备有限公司)； ST210 pH计(上海奥豪斯仪器有限公司)； DHG - 9023A型电热恒温鼓风干箱(常州诺基仪器有限公司)； ZF - SK01A本草精华萃取仪(颍上卓越电子商务有限公司)； SKIING数字皮肤水分测试仪(深圳凯尔电子有限公司)；高压蒸汽灭菌锅(山东博科有限公司)；冰箱(合肥美菱股份有限公司)；电热恒温培养箱(江苏新春兰科学仪器有限公司).

1.2 材料

椰子油(丹东安康有限公司)；十八醇(天津市科密欧化学试剂有限公司)；卡波姆、棕榈酸异辛酯、丙三醇、三乙醇胺、1,2-丙二醇(山东优索化工科技有限公司)；苯氧乙醇(浙江圣效有限公司)；聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯(沈阳市新化试剂厂)；乙基己基甘油(北京化学试剂公司)(上述试剂均为日化级)； 1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH，北京华越洋生物科技有限公司，生化试剂)；卵磷脂吐温80营养琼脂培养基(招远拓普生物工程有限公司，工业级)；无水乙醇(北京北化精细化学品有限责任公司，分析纯)；枸杞子、西洋参(经延边大学李镐教授鉴定).

1.3 药材的提取

1.3.1西洋参粗提液的提取

采用超声提取法[8]提取西洋参粗提液.称取5 g干燥西洋参粉末，以超纯水为提取溶剂，物料溶液质量比为1∶10提取3次(每次超声提取1 h)，合并提取液后过滤即得西洋参粗提液.

1.3.2枸杞子粗提液的提取

采用文献[9]中的方法提取枸杞子粗提液.称取5 g干燥枸杞子粉末，以超纯水为提取溶剂，物料溶液质量比为1∶40提取2次(每次提取40 min)，合并提取液后过滤即得枸杞子粗提液.

1.4 体外自由基清除活性的测定

采用DPPH自由基清除法[10]筛选西洋参与枸杞子提取液的使用浓度和复配比例.

1.5 护肤乳液的制备

参考文献[11]的方法制备护肤乳液.将护肤乳液按性质及作用分为油相(棕榈酸异辛酯、椰子油、十八醇)、水相(丙三醇、三乙醇胺、卡波姆、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、1,2-丙二醇)、活性成分(西洋参-枸杞子复配液)和防腐剂(苯氧乙醇、乙基己基甘油).将油相和水相分别置于70 ℃的水浴中加热，溶解后将油相加入水相中搅匀，待温度降至50 ℃时加入活性成分和防腐剂，混匀后即得护肤乳液.

1)基质添加量的筛选.利用模糊评价法[12]对基质的外观、离心稳定性、耐寒性、耐热性和涂抹效果进行综合评价.评价总分为100分，其中外观为30分，离心稳定性为20分，耐热、耐寒性为20分，涂抹效果为30分，每个指标分数分为A、B、C 3个层次，如表1所示.

为观察在不加入活性成分和防腐剂时各因素(棕榈酸异辛酯、椰子油、十八醇、丙三醇、卡波姆、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、1,2-丙二醇)的不同添加量对基质的影响大小，分别选择不同因素的5个不同水平分别制备基质(其他因素不变)，并按照表1的评价方法进行评分和分析，以此确定最佳的基质配方.

表1 评价指标及标准

2)活性成分添加量的筛选.选择对DPPH自由基清除率最高的西洋参-枸杞子复配液作为活性成分.采用单因素试验法确定复配液的添加量，并按照表1的评价方法进行评分和分析.

1.6 护肤乳液的指标及效果评价

1.6.1护肤乳液的感官、理化评价

参考GB/T 29665—2013中的标准[13]评价护肤乳液的外观、pH、离心稳定性及耐热、耐寒性.

1.6.2护肤乳液的卫生指标评价

利用卵磷脂吐温80营养琼脂培养基评价菌落总数.向平皿中分别加入1 mL稀释度为1∶10和1∶100(样品∶蒸馏水)的检液，然后再分别注入15 mL灭菌后的卵磷脂吐温80营养琼脂培养基，混匀.每个稀释度下的检液均做两组.以相同的方法制作未加检液样品的灭菌平皿作为空白对照组.将平皿置于(36±1) ℃培养箱内分别培养(48±2) h， 48 h后观察培养基的菌落总数.培养基菌落总数小于10 cfu·g-1即表明所制备的乳液符合GB/T 29665—2013中的卫生标准.

1.6.3护肤乳液的抗氧化效果评价

将乳液成品与蒸馏水按质量比1∶10稀释后将其作为待测液.将待测液离心后取上清液，并采用2.2中的方法测量室温下制备的乳液和市售乳液对DPPH自由基的清除率.各乳液均测定3次并取平均值，以此评价各乳液的抗氧化性能.

1.6.4护肤乳液的保湿效果评价

通过测定皮肤角质层水分的增长率对护肤乳液的保湿效果进行评价，测定方法参考文献[14]的方法并略作改动.测试前首先让受试者(受试者为5名，身体健康，年龄为20～40岁)在温度为(20±2) ℃和相对湿度为(32±2)%的环境中静坐30 min，然后让受试者将前臂屈侧暴露20 min，并同时在前臂屈侧处标记2个3 cm×3 cm的区域作为空白对照区和涂抹区.区域间隔为1 cm，涂抹用量为(2.0±0.1) mg·cm-2.涂抹后分别在第1、2、3、4 h测定涂抹区和空白对照区的皮肤水分含量(记为Mi、M0).各区域平行测定3次并取平均值.计算皮肤水分变化率M的公式[15]为M=[(Mi-M0)/M0]×100%.

2 结果与分析

2.1 体外自由基清除活性的测定

图1为西洋参、枸杞子提取液及两者复配时对DPPH自由基的清除率.由图可以看出，西洋参-枸杞子复配液在体积比为1∶1时其对DPPH自由基的清除率高于其他复配比或单独使用西洋参、枸杞子提取液，且当浓度为0.5 mg/mL时其对自由基的清除率达到78.4%，清除效果良好.因此本文选择0.5 mg/mL的西洋参 - 枸杞子复配液(1∶1)作为活性成分.

图1 西洋参、枸杞子提取液及两者的复配液对DPPH自由基的清除率

2.2 基质添加量的筛选

图2为棕榈酸异辛酯、椰子油、十八醇的不同添加量对基质综合评分的影响.由图2可以看出：当棕榈酸异辛酯、椰子油的添加量分别超过4.0%和3.0%(质量分数)时乳液的综合评分趋于稳定，因此本文选择棕榈酸异辛酯和椰子油的添加量为4.0%和3.0%；当十八醇添加量为2.0%时乳液的综合评分最高，因此本文选择十八醇的添加量为2.0%.

图2 不同原料添加量对基质综合评分的影响

图3为丙三醇、卡波姆、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、1,2-丙二醇的不同添加量对基质综合评分的影响.由图3可以看出：当卡波姆、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯的添加量分别为0.3%、0.5%(质量分数)时乳液的综合评分最高，因此本文选择卡波姆和聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯的添加量为0.3%和0.5%；当丙三醇、1,2-丙二醇的添加量分别超过2.0%(质量分数)时乳液的综合评分趋于稳定，因此本文选择丙三醇、1,2-丙二醇的添加量为2.0%.

图3 不同原料添加量对基质综合评分的影响

根据上述单因素试验结果选取卡波姆、十八醇、聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯的3个水平进行试验.表2为正交试验的因素水平表，表3为正交试验结果.由表3可知，当配方为A2B3C1时(0.3%卡波姆、 3.0%十八醇、0.4%聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯)基质评分结果最优；因此，本文将基质的配方确定为： 4.0%棕榈酸异辛酯、 3.0%椰子油、 3.0%十八醇、 2.0%丙三醇、 0.3%三乙醇胺、0.3%卡波姆、0.4%聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、2.0% 1,2-丙二醇、0.45%苯氧乙醇、0.05%乙基己基甘油.

表2 正交试验因素水平表

表3 正交试验结果

图4为不同西洋参-枸杞子复配液(体积比为1∶1)的添加量对乳液综合评分的影响.由图可以看出，分数呈先增加后降低的趋势，且添加量为10.0%和12.0%(质量分数)时评分最高，因此本文选取西洋参 - 枸杞子复配液的添加量为10.0%.

图4 复配液添加量对乳液综合评分的影响

2.3 护肤乳液的功效评价

护肤乳液的感官、理化指标评价结果见表4.由表4可以看出，制得的护肤乳液的外观、pH、耐热性、耐寒性、离心稳定性、菌落总数符合GB/T 29665—2013中的相关标准.试验测定显示，制备的乳液对DPPH自由基的清除率达到68.3%，高于市售某品牌护肤乳液对DPPH自由基的清除率(42.9%).

表4 护肤乳液的感官和理化指标的评价结果

图5为使用护肤乳液后皮肤水分含量随时间的变化率.由图5可以看出，在4 h内，西洋参-枸杞子乳液的保湿效果优于某市售样品，这表明本文制备的护肤乳液具有良好的保湿效果.

图5 不同乳液对皮肤水分含量的影响

3 结论

本文用西洋参-枸杞子复配提取液制备了一种抗氧化护肤乳液，该乳液的最佳配方为：4.0%棕榈酸异辛酯、3.0%椰子油、3.0%十八醇、2.0%丙三醇、0.3%三乙醇胺、0.3%卡波姆、0.4%聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯、2.0% 1,2-丙二醇、0.45%苯氧乙醇、0.05%乙基己基甘油、10.0%西洋参-枸杞子复配液(体积比为1∶1)、74.5%超纯水.经测定显示，该乳液的各项指标均符合国家标准，且具有良好的保湿效果和抗氧化性能，因此该西洋参-枸杞子乳液可作为一种良好的护肤类产品进行开发利用.