ERK2、nm23、MMP9的表达在乳腺病变中的意义*

邱 鹏 河北省邢台市人民医院肿瘤内一科 054031

乳腺癌发病率逐年上升，且有年轻化趋势，严重危害女性生命安全[1]。近年随着乳腺病变分子生物学研究逐渐深入，多种基因蛋白对乳腺癌的发生、发展、侵袭、转移作用机制逐渐清晰，对乳腺癌的诊断、治疗、预后提供更深层次评估。细胞外信号调节激酶-2(Extracellular signal-reg-ulated kinase 2，ERK2)是促分裂原活化蛋白激酶家族成员之一，在细胞增殖、凋亡或分化等方面传递调控信号，可促进恶性肿瘤发生、浸润、转移[2]。nm23基因是一种肿瘤转移抑制基因，在恶性肿瘤细胞的植入和转移过程中具有重要抑制作用，其低表达时可促进肿瘤进展和转移[3]。基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinases 9，MMP9)可参与肿瘤新生血管形成，且可破坏基底膜，促进肿瘤细胞的浸润和转移[4]。因此，推测ERK2、nm23、MMP9基因蛋白异常表达可能与乳腺良、恶性病变有关。本文旨在观察ERK2、nm23、MMP9的表达在乳腺病变中的意义，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年1月—2020年10月本院收治的95例乳腺病变患者为研究对象，患者及家属均签署知情同意书，年龄26～58岁，平均年龄(41.36±4.58)岁。(1)纳入标准：①影像学检查发现乳腺病变，首次发现病变；②入组前未接受系统治疗；③在本院拟行手术治疗。(2)排除标准：①合并其他部位良、恶性肿瘤者；②合并全身性感染疾病；③合并凝血功能障碍。本研究经本院医学伦理委员会审核批准。

1.2 方法 病理组织学及ERK2、nm23、MMP9表达检查方法：(1)病理组织学检查：取患者术后病理组织为标本，每例标本分为两部分，一部分术后行病理组织学检查，依据病理组织学检查结果参照《中国抗癌协会乳腺癌诊治指南与规范(2015版)》[5]中相关标准判定病变良、恶性以及淋巴结转移情况。(2)ERK2、nm23、MMP9表达检查：将另一部分标本采用4%中性甲醛固定液固定保存，行苏木素—伊红(hematoxylin-eosin staining，HE)和免疫组化染色；ERK2、nm23、MMP9基因蛋白表达检测均采用免疫组织化学法，其中兔抗人ERK2单克隆抗体购自NeoMarker Fremont公司，鼠抗人nm23和MMP9单克隆抗体、免疫组织化学检测试剂盒、二氨基联苯胺(Diaminobenzidine staining，DAB)酶底物显色试剂盒均购自福州迈新生物技术开发公司。工作浓度为1∶50，ERK2、nm23、MMP9均以DAB显色，采用磷酸盐缓冲液冲洗，光学显微镜下观察。判定标准：ERK2、nm23、MMP9蛋白均表达于细胞质，染色结果根据着色强度无、浅黄/黄色、棕黄色分别记0、1、2分；阳性细胞数<10%计0分，10%～50%计1分，>50%计2分；两项相乘>0分为阳性，反之为阴性。

2 结果

2.1 乳腺病变情况 经病理组织学检查结果显示，95例乳腺病变患者中，恶性病变32例，其中淋巴结转移13例，淋巴结未转移19例；良性病变63例，其中乳腺纤维瘤28例，乳腺增生35例。

2.2 不同乳腺病变类型患者ERK2、nm23、MMP9表达阳性率比较 乳腺癌患者ERK2、MMP9表达阳性率均高于乳腺纤维瘤、乳腺增生患者，nm23表达阳性率低于乳腺纤维瘤、乳腺增生患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 不同乳腺病变类型患者ERK2、nm23、MMP9阳性率比较[n(%)]

2.3 淋巴结转移与未转移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9阳性率比较 淋巴结转移乳腺癌患者ERK2、MMP9阳性率均高于淋巴结未转移患者，nm23阳性率低于淋巴结未转移患者，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 淋巴结转移与未转移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9阳性率比较[n(%)]

3 讨论

乳腺病变是女性多发病，可分为良性病变和恶性病变，其中乳腺癌是常见的乳腺恶性病变，若治疗不及时，肿瘤细胞进一步扩散，可导致不良预后。因此，准确评估乳腺病变尤为重要。

研究显示，乳腺良、恶性病变患者中多种相关基因蛋白表达明显不同，如蛋白水解酶、信号转导因子等，且随恶性病变进展相关基因蛋白表达随之出现变化，与患者预后密切相关[6]。本文结果中，乳腺癌患者ERK2、MMP9阳性率均高于乳腺纤维瘤、乳腺增生患者，nm23阳性率低于乳腺纤维瘤、乳腺增生患者；进一步对比淋巴结转移与未转移乳腺癌患者ERK2、nm23、MMP9阳性率发现，淋巴结转移乳腺癌患者ERK2、MMP9阳性率均高于淋巴结未转移患者，nm23阳性率低于淋巴结未转移患者，说明ERK2、MMP9、nm23基因蛋白异常表达与乳腺良、恶性病变以及乳腺癌淋巴结转移有关。分析原因可能为，ERK2是一类丝氨酸蛋白激酶，主要在细胞质内，可通过旁分泌或自分泌促进细胞增殖和恶变，刺激肿瘤细胞DNA合成，其阳性表达率高可促进细胞恶性转化，诱发癌变及肿瘤转移[7]。nm23基因是目前研究较多的转移抑制基因，由结构功能密切相关的基因族构成，研究显示，nm23基因低表达与恶性肿瘤转移和预后不良密切相关[8]。肿瘤浸润转移与转移抑制基因失活有关，肿瘤转移抑制基因可抑制肿瘤细胞的转移表型，从而抑制肿瘤浸润转移。nm23可通过抑制ERK信号转导系统活性，进而减少乳腺癌细胞增殖能力，因此nm23基因阳性表达率高对乳腺癌的侵袭和转移具有一定抑制作用。MMP9是一类蛋白水解酶，可降解细胞外基质中胶原和弹力蛋白，促进肿瘤细胞穿过基底膜屏障，从而使肿瘤浸润和转移[9]。另外，MMP9除降解细胞外基质，还参与肿瘤新生血管形成，可促进肿瘤细胞浸润和转移灶形成[10]。故通过检测乳腺病变患者ERK2、MMP9、nm23基因蛋白表达情况，可能有助于对乳腺癌的诊断、转移和预后综合判断。

综上所述，ERK2、MMP9、nm23基因蛋白异常表达与乳腺良、恶性病变有关。