外周血SFRP4、S100A12水平与老年重症胰腺炎患者急性期预后的关系

张进进，唐昊，李冉

安徽医科大学第一附属医院急诊内科，安徽合肥 230000

重症胰腺炎病情发展迅速，多数患者急性期病死率较高。研究［1］指出，重症胰腺炎的发生可能与年龄和生活饮食习惯有极大关联，目前我国老年重症胰腺炎发生率逐年升高。与非老年患者相比，老年患者机体各器官功能退化、抵抗外界侵袭的能力减弱，因此老年重症胰腺炎患者急性期预后往往不理想，急性期死亡率处于较高水平［2］。因此如何早期预测老年重症胰腺炎患者急性期预后是目前广泛关注的问题。分泌型卷曲相关蛋白4（Secreted frizzled-associated protein 4，SFRP4）属SFRP 家族成员之一，在临床上又被证实参与多种疾病的发生，其参与胰腺氧化应激［3］。S100 钙 结 合 蛋 白A12（S100 Calbindin A12，S100A12）则被认为参与细胞生长、凋亡、机体炎症等多个生理病理过程。研究［4］显示，S100A12 经介导局部炎症而促进胰腺炎进展。在上述背景下，本研究为了寻找早期预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的敏感指标，探讨老年重症胰腺炎患者血清SFRP4 和S100A12 表达水平，并分析其与患者急性期预后的关系，具有较好的临床意义。

1 资料与方法

1．1 一般资料选择2017年8月—2021年10月于安徽医科大学第一附属医院急诊内科治疗的132 例老年胰腺炎患者，依据《中国急性胰腺炎诊治指南》［5］中对急性胰腺炎疾病程度的分类标准，将老年胰腺炎患者分为重症胰腺炎组（n＝80）和轻症胰腺炎组（n＝52）。重症胰腺炎组中男性患者42 例，女性患者38 例；年龄61～78 岁，平均年龄（70.1 ±5.7）岁；体质量指数20～25 kg/m2，平均体质量指数（23.12 ±2.78）kg/m2。轻症胰腺炎组中男性患者30 例，女性患者22 例；年龄61～77 岁，平均年龄（70.0 ±4.3）岁；体质量指数20～26 kg/m2，平均体质量指数（23.44 ±2.64） kg/m2。并以同时期于本院进行健康体检性别、年龄匹配的符合纳入标准的30 名体检健康者作为健康对照组，其中男性15 名，女性15 名；年龄61～80 岁，平均年龄（70.7 ±6.3）岁；体质量指数20～24.5 kg/m2，平均体质量指数（23.00 ±2.53） kg/m2。3 组上述一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。本研究已获得本院伦理学备案（批号为YTL201906159）。

1．2 纳入和排除标准病例纳入标准： （1）符合《中国急性胰腺炎诊治指南》［5］中关于疾病的诊断标准，轻症胰腺炎组患者以急性、持续性腹痛为主要特征，血清淀粉酶活性高于正常值上限3 倍，影像学提示胰腺有或无形态改变，无器官功能障碍或局部并发症，对液体补充治疗反应良好，或急性生理学与慢性健康状况系统Ⅱ（APACHE Ⅱ）［6］＜8 分。重症胰腺炎组患者以急性、上腹部持续性疼痛为主要特征，血清淀粉酶活性高于正常值上限3 倍，累及一个或者多个胰腺外器官，APACHE Ⅱ评分≥8 分。（2）首次发病，发病24 h 内入院；（3）年龄≥60 岁；（4）所有研究对象对本研究的内容知情，签署知情同意书。符合以上全部标准的病例纳入本研究。排除标准： （1）慢性胰腺炎；（2）入院72 h 内死亡；（3）近4 周内有手术或者外伤史；（4）恶性肿瘤；（5）长期使用免疫、激素类药物；（6）存在重要脏器慢性疾病；（7）存在精神障碍性疾病或沟通不利，影响研究。具备上述标准中的任意1 项者不纳入本研究。

1．3 样本量估算依据《卫生统计学》完全随机化病例对照设计的样本量计算公式估算本研究样本量，公式为：

依据公式计算本研究所需样本量应为148 例，在剔除资料不完整、不符合纳入和排除标准的病例后最终纳入132 例老年胰腺炎患者，并以分组样本等同的原则纳入同时期于本院进行健康体检的132 例健康人，但考虑年龄因素以及纳入本研究标准最终以30 例体检健康人作为健康对照。

1．4 治疗方法轻症胰腺炎组和重症胰腺炎组患者均于入院后参照《中国急性胰腺炎诊治指南》［5］进行规范化治疗，包括禁食水、胃肠减压、生长抑素抑制胰酶分泌、营养支持、维持水电解质平衡、抗感染等，必要时行穿刺引流和手术治疗。

1．5 血清SFRP4 和S100A12 水平测定于健康对照组入组当日、重症胰腺炎组和轻症胰腺炎组患者入院后第1、3、5、7 天采集外周血，室温下静置120 min后离心，离心后的上清液放置于－80 ℃冰箱中保存。使用DECCA 德卡全自动多功能酶标检测仪测定血清SFRP4 和S100A12 水平。

1．6 重症胰腺炎组患者不同急性期预后分组及资料采集根据重症胰腺炎组急性期预后情况分为预后存活亚组和预后死亡亚组，采集2 个亚组基础资料，包括性别、年龄、体质量指数、合并症（高血压、糖尿病、冠心病）、原发疾病（胆源性、非胆源性）、胸腔积液、早期合并腹水、早期合并休克、早期合并单或多器官功能衰竭、APACHE Ⅱ评分以及胰腺损伤指标（血淀粉酶、CTSI 评分［7］、改良CT 严重指数评分（MCTSI）评分［7］、Ranson 评分［8］）等，血淀粉酶使用博科BK-200型全自动化生化分析仪测定。

1．7 统计学分析采用SPSS 22.0 进行数据分析。应用Kolmogorov-Smirnov 检验数据是否符合正态分布，符合正态分布的计量资料采用均数±标准差（±s）描述，多组间比较采用方差齐性检验，进一步两两比较采用Bonferroni 法；不符合正态分布的计量资料2组间比较采用Mann-Whitney U 检验，多组间比较采用Kruskal-Wallis H 检验。计数资料用例（%）表示，组间比较采取χ2检验。Logistic 回归分析影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的因素。采用Pearson 相关性分析血清SFRP4 和S100A12 水平与老年重症胰腺炎患者急性期预后的关系。采用受试者工作曲线（ROC）分析血清SFRP4 和S100A12 水平对老年重症胰腺炎患者急性期预后的早期预测价值，曲线下面积（AUC）＞0.7说明具有一定的预测价值。P＜0.05 表示差异有统计学意义。

2 结果

2．1 3 组血清SFRP4 和S100A12 水平比较重症胰腺炎组和轻症胰腺炎组SFRP4、S100A12 水平均高于健康对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）；重症胰腺炎组和轻症胰腺炎组患者入院后SFRP4 和S100A12 水平变化趋势相同，以第3 天水平最高，第7 天水平最低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；重症胰腺炎组各时间点SFRP4 和S100A12 水平均高于轻症胰腺炎组同时间点，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 3 组血清SFRP4 和S100A12 水平比较（±s，ng／mL）

表1 3 组血清SFRP4 和S100A12 水平比较（±s，ng／mL）

注： 与健康对照组相比，△P＜0.017；与轻症胰腺炎组相比，▲P＜0.017。

_指标 住院时间 重症胰腺炎组（n＝80） 轻症胰腺炎组（n＝52） 健康对照组（n＝30） F/t P SFRP4 第1 天 2.16 ±0.52△▲ 1.53 ±0.12△ 1.00 ±0.24 17.595＜0.001第3 天 4.53 ±0.89△▲ 3.01 ±0.23 — 32.067＜0.001第5 天 2.24 ±0.25△▲ 1.86 ±0.43 — 35.124＜0.001第7 天 1.45 ±0.14△▲ 1.23 ±0.21 — 18.263＜0.001 S100A12 第1 天 461.92 ±90.73△▲ 243.52 ±26.74△ 125.63 ±38.96 29.385＜0.001第3 天 557.83 ±99.41△▲ 354.75 ±46.91 — 34.653＜0.001第5 天 322.68 ±34.72△▲ 220.61 ±23.44 — 38.449＜0.001第7 天 231.54 ±27.84△▲ 167.84 ±14.52 — 23.771＜0.001

2．2 血清SFRP4 和S100A12 水平在老年重症胰腺炎患者不同急性期预后中的差异分析预后存活亚组患者入院后SFRP4 和S100A12 水平以第3 天水平最高，第7 天水平最低，差异具有统计学意义（P＜0.05）；预后死亡亚组患者入院后SFRP4 和S100A12水平持续升高，以第7 天最高，差异具有统计学意义（P＜0.05）；入院后第1 天、第3 天、第5 天、第7 天预后死亡亚组SFRP4 和S100A12 水平均高于预后存活亚组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。进一步经Pearson 相关性分析发现，SFRP4、S100A12 水平与老年重症胰腺炎患者急性期预后呈正相关（r＝0.559、0.627，P 均＜0.05）。见图1。

表2 预后存活亚组和预后死亡亚组SFRP4 和S100A12 水平比较（±s，ng／mL）

表2 预后存活亚组和预后死亡亚组SFRP4 和S100A12 水平比较（±s，ng／mL）

_指标 时间点 预后存活亚组（n＝48） 预后死亡亚组（n＝32） t P SFRP4 第1 天 1.87 ±0.23 2.45 ±0.31 9.601＜0.001第3 天 3.76 ±0.89 4.98 ±0.42 7.225＜0.001第5 天 1.43 ±0.12 5.74 ±0.34 80.810＜0.001第7 天 1.03 ±0.19 6.89 ±0.21 129.600＜0.001 S100A12 第1 天 412.42 ±49.05 487.09 ±51.32 6.548＜0.001第3 天 509.07 ±55.63 539.87 ±66.75 2.238 0.028第5 天 278.06 ±30.31 588.12 ±45.63 36.560＜0.001第7 天 250.56 ±23.41 676.97 ±32.41 68.330＜0.001

图1 血清SFRP4 和S100A12 水平与老年重症胰腺炎患者急性期预后相关性分析图

2．3 影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的单因素分析预后存活亚组和预后死亡亚组性别、年龄、BMI、合并症、胸腔积液、早期合并腹水等资料比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）；预后存活亚组和预后死亡亚组原发疾病、早期合并休克、早期合并器官功能衰竭、入院48 h 内APACHE Ⅱ评分、血淀粉酶、Ranson 评分、CTSI 评分、MCTSI 评分等资料差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的单因素分析

2．4 影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的多因素分析以老年重症胰腺炎患者急性期预后作为因变量（预后死亡＝1，预后存活＝0），将表2～3 中差异具有统计学意义的变量作为自变量，行Logistic 回归分析，结果显示，除早期合并休克、早期合并多器官功能衰竭、入院48 h 内APACHE Ⅱ评分、血淀粉酶外，血清SFRP4 和S100A12 也是影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的因素。见表4。

表4 影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的多因素分析

表4（续）

2．5 血清SFRP4 和S100A12 水平预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的价值分析ROC 曲线显示，血清SFRP4 和S100A12 水平预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的AUC 均高于0.7，说明二者均可用于预测老年重症胰腺炎患者急性期预后，其中血清SFRP4水平预测价值高于血清S100A12（P＜0.001）。见表5、图2。

表5 血清SFRP4 和S100A12 水平预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的效能

图2 血清SFRP4 和S100A12 水平预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的ROC 曲线

3 讨论

据统计，大约有20%的胰腺炎患者可进一步恶化形成重症胰腺炎，此阶段一部分患者胰腺酶类产生异常导致机体自身正常组织被水解，产生机体严重炎症反应，器官功能衰竭引起一系列严重并发症，危及生命［9］。虽然目前临床上对于重症胰腺炎的治疗已经取得良好的成效，但仍有部分患者预后不良，疾病死亡率较高，因此寻找特异性指标预测患者预后结局，以根据所预测的结局进行早期干预，对改善患者预后具有重要的意义。

研究［10-11］发现，老年重症胰腺炎的发生与多因素共同作用有关，但具体发生机制尚不完全明确，部分学者认为此病的发生与氧化应激和局部炎症有关。SFRP4定位于染色体7p14.1 上，其作为分泌卷曲相关蛋白家族中最大的成员，含有特殊性的半胱氨酸结构域，参与Wnt 信号的调控，研究认为［12-13］，SFRP4 作为Wnt信号的抑制剂，其可竞争性的阻碍Wnt 信号传递和细胞膜上的卷曲蛋白受体结合，进而参与多种疾病的发生。就目前研究发现［14-16］，SFRP4 作为一种炎症相关因子，恶性肿瘤、糖尿病、胰腺病变等多种疾病的发生，在胰腺病变发生过程中，其经促进脂肪因子的合成分泌，增加胰腺氧化应激。本研究结果显示，与健康人相比，老年胰腺炎患者外周血SFRP4 水平明显升高，且进一步分析轻症胰腺炎患者和重症胰腺炎患者SFRP4 水平发现，虽然重症胰腺炎组、轻症胰腺炎组患者入院后SFRP4 水平变化趋势相同，但在各时间点重症胰腺炎组SFRP4 水平均明显高于轻症胰腺炎组，此结果说明，SFRP4 可能参与胰腺炎的重症化。彭俊夫等［17］研究认为，SFRP4 在重症急性胰腺炎患者外周血中水平升高，与患者预后密切相关。进一步分析SFRP4 水平与重症胰腺炎患者急性期预后的关系显示，预后存活组患者SFRP4 水平在入院后第5 天逐渐降低，但预后死亡组患者入院后SFRP4 水平持续升高，与患者急性期预后正相关，此结果提示着，SFRP4水平异常升高可能是导致老年重症胰腺炎患者急性期预后不良的机制之一，分析其原因可能与在重症胰腺炎急性期SFRP4 作为炎症因子，抑制Wnt 促进胰岛β 细胞增殖，导致胰岛β 细胞凋亡，而加重疾病进展有关。

S100A12 主要由中性粒细胞合成分泌，在疾病发生早期，中性粒细胞受到外界多种因素的刺激后活化，此时大量的S100A12 产生，经增强血管内皮细胞黏附因子的表达而促进炎症级联［18-19］。研究［20］表明，当S100A12 与钙离子结合或者在白细胞介素等炎症介质的激发下出现蛋白构象变化，目标蛋白位点显露，随即与自身受体相结合而发挥炎症促进作用。在本研究中，对比健康人和老年重症胰腺炎患者外周血S100A12 变化差异，结果发现，S100A12 在老年重症胰腺炎中表达明显升高，此结果说明S100A12 可能参与老年重症胰腺炎的发生，此结果与张红英等［21］报道一致。临床一项研究认为［22］，外周血S100A12 水平与重症急性胰腺炎患者预后死亡相关，其水平越高患者死亡率越高，属于影响患者预后的独立危险因素。本研究亦发现S100A12 在急性期预后死亡患者中高表达，且与患者急性期预后正相关，此结果提示着，S100A12 可能参与患者急性期不良预后的发生过程，分析其原因可能与在急性期中性粒细胞异常激活，大量的S100A12 产生，在血管内皮细胞黏附因子的作用下，局部炎症扩大，进而导致不良预后有关，宁书蔚等［23］研究结果与本研究一致。

本研究结果发现，除了早期合并休克、早期合并多器官功能衰竭、入院48 h 内APACHE Ⅱ评分、血淀粉酶外，外周血SFRP4、S100A12 同样是影响老年重症胰腺炎患者急性期预后的主要因素，此结果说明外周血SFRP4、S100A12 表达升高可导致患者急性期预后不良。且ROC 曲线分析发现血清SFRP4 和S100A12 水平均可作为预测老年重症胰腺炎患者急性期预后的敏感指标。

虽然本研究重点分析了血清SFRP4 和S100A12水平与老年重症胰腺炎患者急性期预后的关系，但仍存在以下不足： （1）未深入分析两者影响患者急性期预后的具体途径，且并未进一步分析两者之间在此病中关联；（2）本次研究纳入样本较少，因此对后续研究还需深入探讨。

综上所述，老年重症胰腺炎患者急性期预后与血清SFRP4 和S100A12 水平变化密切相关，当SFRP4水平＞2.56 ng/mL，S100A12 水平＞453.61 ng/mL 时则说明患者急性期预后死亡风险较高，临床可根据患者血清SFRP4 和S100A12 水平早期评估急性期预后，以改变患者预后结局。