发酵构树饲料对肉兔生产性能、肉品质、血液生化指标及肠道形态的影响

张 邦，王瑞华，朱龙龙，颜 颜，王 军，王占彬*

（1.河南科技大学动物科技学院，河南洛阳 471003；2.禾佳农业科技有限公司，河南宜阳 471600）

我国蛋白饲料原料以豆粕、菜粕、苜蓿等草本饲料为主，且对进口原料依存度很高。2016 年全国大豆进口量约为8 400 万t，2020 年超过1 亿t[1-2]。国务院颁布的《关于促进畜牧业高质量发展的意见》中指出要健全饲草供应体系，开发利用杂交构树、饲料桑等新饲草资源。杂交构树在营养期适时收割，营养价值丰富，能值和粗蛋白质含量等均可与传统饲料相媲美[3]。构树也是一种传统中草药，含有多种黄酮类化合物、生物碱和多糖等活性成分，具有抗菌、增强免疫力、延缓衰老等药理活性[4-5]。我国大面积的丘陵山地具有充足的开发构树资源的潜力[6-8]。宋博等[9]研究发现，在育肥猪饲粮中添加10%全株发酵构树饲料对育肥猪生产性能无显著影响，可以提高肌肉中游离氨基酸和肌内脂肪含量，改善肉品质。邓铭等[10]研究表明，将发酵构树饲料用于断奶仔猪可显著降低仔猪腹泻率，且无不利影响。向凌云等[11]使用30%杂交构树饲料替代肉兔饲粮中的花生秧与花生壳，显著提高了肉兔平均日增重，也显著降低了肉兔发病率与死亡率。构树叶经发酵后所含的营养物质较发酵前有不同程度提高，但对肉兔的研究鲜有报道。因此，本试验旨在研究发酵构树饲料对肉兔生长发育的影响，为发酵构树饲料在肉兔养殖中的应用提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 试验设计 选取体重接近的30 日龄断奶伊普吕幼兔144 只，随机分为4 组，每组6 个重，每重复只，每笼3 只兔。试验于夏季在义马市金地牧业科技有限公司开展。对照组饲喂玉米-豆粕型基础饲粮，参照NRC（1994）营养需要配制颗粒饲粮。试验组分别添加3%、6%、9%发酵构树饲料。在第2 茬杂交构树生长至1.2 m，离地30 cm 收割枝叶。添加适量发酵益生菌（乳酸菌2×1010CFU/g）和酶制剂（纤维素酶、甘露聚糖酶、木聚糖酶、β-葡聚糖酶11 000 U/g）按比例混合加工，打包装袋密封发酵20 d。益生菌与酶制剂均为洛阳市洛丹生物科技有限公司产品。发酵构树饲料（洛阳禾佳农牧有限公司）营养成分见表1（重复测定3 次取其均值），饲粮组成及营养成分见表2。预试期7 d，正试期28 d。

表1 发酵构树饲料化学成分（风干基础）

表2 饲粮组成及营养成分（风干基础）

1.2 饲养管理 幼兔饲养于同一兔舍，采用欧式笼同层饲养，按照每个笼幼兔平均体重的8%定量饲喂，每只兔每隔3 d 增加10 g。自由饮水，免疫程序按常规进行。每天清扫兔舍，定期清洗饮水管道和粪盘。

1.3 生产性能 在试验第1、28 天按重复进行空腹称重，并统计死淘情况，计算平均日增重、平均日采食量、耗料增重比、死亡率和腹泻率。

1.4 屠宰性能 在试验结束前12 h 对肉兔停料不停水。每个重复随机选择1 只兔共24 只屠宰，耳缘静脉注射空气致死。记录活体重、全净膛重、半净膛重、心脏、肝脏、肾脏、肺脏、脾脏等重量，并计算全净膛率、半净膛率和器官指数。

全净膛率=全净膛重/活体重×100%

半净膛率=（全净膛重+心脏+肝脏+肾脏+肺脏）/活体重×100%

器官指数=（器官重量/体重）×100%

1.5 肉品质 屠宰完成后采集背腰最长肌取2 cm×1 cm×1 cm 肉样背腰最长肌样品，去除结缔组织，测定质量m1（g）置于自封袋内，密封悬挂于在4℃冰箱内，24 h后将肉样取出，滤纸吸干样品表面水分后称重m2（g），计算24 h 滴水损失。48 h 滴水损失测定方法相同。滴水损失的计算公式：

滴水损失=100%×（m1-m2）)/ m1

采用便携式手持专用pH 计（pH-STAR，德国）测背腰最长肌第5 肋骨处的pH，将探头插入肌肉3 mm 读数，读数稳定5 s 后记录pH，每个肉样测定3次不同位置。分别记录pH45min与pH24h的数值。

用日本产CR-10 型号便携式色差仪，利用CIELab 输出模式，在兔宰后45 min 时在背最长肌第5 腰椎处横断面表面切开3 个切面记录数值，分别求平均值，得出亮度值（L*）、红色度值（a*）和黄色度值（b*）。

1.6 血液生化指标 在屠宰试验当天，进行心脏采血，3 500 r/min 离心取得血清于-20℃冰箱保存备用。用全自动生化分析仪（库贝尔 IMagic-V7，中国）测定血清中的葡萄糖（GLU）、尿素氮（BUN）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、甘油三酯（TG）、胆固醇（CHO）、葡萄糖（GLU）、血钙（Ca）与血磷（IP）含量及丙氨酸氨基转移酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）活性。

1.7 肠道形态 饲养试验结束，每个重复选1 只试验兔，剖开腹腔后，分离小肠，于空肠中段采集3 cm 左右，用生理盐水洗涤内容物后，放置于多聚甲醛中固定48 h，经过修整、脱水、透明、浸蜡和包埋，采用旋转切片机进行连续切片，然后使用苏木素-伊红（H-E）染液染色并封片。在各个切片中选取5 个较为完整的绒毛，在电子显微镜下测量绒毛高度和隐窝深度，并计算其绒隐比。

1.8 统计分析 试验数据采用SPSS 22 统计软件的ANOVA 程序进行单因素方差分析，组间差异用Duncan's 法进行多重比较。数据以平均值±标准误表示。设定P＜0.05 为差异显著，P＜0.01 为差异极显著。

2 结果

2.1 发酵构树饲料对肉兔生产性能的影响 如表3 所示，试验肉兔初始体重差异不显著，构树组生产性能与对照组无显著差异。

表3 发酵构树饲料对肉兔生产性能的影响

2.2 发酵构树饲料对肉兔屠宰性能和器官指数的影响由表4 可见，构树组全净膛重、半净膛重、全净膛率、半净膛率与对照组均无显著差异；且肉兔各项器官指数与对照组无显著差异。

表4 发酵构树饲料对肉兔屠宰性能和器官指数的影响

2.3 发酵构树饲料对肉兔背腰最长肌肉品质的影响 如表5 所示，6%、9%构树组兔肉亮度均高于对照组、3%构树组（P＜0.05）；3%、6% 构树组滴水损失24 h 均低于对照组（P＜0.05），9%构树组低于对照组和3%、6%构树组（P＜0.01）；构树组兔肉的pH、红度与黄度与对照组无显著差异。

表5 发酵构树饲料对肉兔背腰最长肌肉品质的影响

2.4 发酵构树饲料对肉兔血液生化指标的影响 由表6所示，构树组TP 和ALB 含量高于对照组（P＜0.01）；9%构树组GLO 含量、6% 和9% 构树组GLU 含量均高于对照组（P＜0.05）；6%和9%构树组IP 含量高于对照组、3%构树组（P＜0.01）；各组其他指标无显著差异。

表6 发酵构树饲料对肉兔血液生化指标的影响

2.5 发酵构树饲料对肉兔肠道形态的影响 由表7 和图1 可知，9%构树组肠道绒毛高度高于对照组（P＜0.05）；构树组肠道隐窝深度和绒隐比与对照组无显著差异。

图1 发酵构树饲料对肉兔肠道形态的影响（9×）

表7 发酵构树饲料对肉兔肠道形态的影响

3 讨 论

3.1 发酵构树饲料对断奶幼兔生长性能的影响 幼兔因其机体生长发育过快，消化系统发育不能及时完善，导致胃酸和消化酶分泌不足，进而引起腹泻最终面临死亡，是肉兔生产中常见的难题[12]。构树饲料经发酵过后，产生多种芳香类的物质[13]，可降解构树中所含的一些抗营养因子，还会产生乳酸菌等有益菌，刺激幼兔采食促进营养物质的消化吸收[14]。一定量的构树饲料可以提升兔的胃容积，促进肠道发育，并在消化过程中增强消化器官蠕动，增加消化液的分泌[15]。而本试验中构树组肉兔平均末重和平均日增重较对照组均有所增加，但其生产性能无显著变化，这可能与限饲有关，肉兔的腹泻率和死亡率在饲喂发酵构树后有所改善，但并未达到统计学上的显著性差异。邓铭等[10]和Chen 等[16]均报道，构树饲料可以显著降低断奶仔猪腹泻率，因此肉兔在自由采食模式下可能产生显著效果。在育肥猪饲粮中添加10%发酵构树饲料不产生负面影响[7,17]，而生长猪饲粮中发酵构树饲料比例达到20% 时就会产生负面影响[18]。本试验中，发酵构树添加量最高比例为9%，并未对肉兔的生长性能造成负面影响。此外，发酵构树来源、饲喂方式以及添加量不同都会产生不同影响。相对豆粕或鱼粉而言，木本植物饲料提供的粗蛋白质成本比较低廉。因此，在小型草食动物的饲料原料选择上，构树饲料具有很好的发展潜力，在饲喂发酵构树饲料时，根据实际条件确定适宜饲喂方式与饲用量，才能更好地发挥发酵构树饲料的优势。

3.2 发酵构树饲料对肉兔屠宰性能、器官指数与肉品质的影响 屠宰性能是衡量肉兔生产性能的重要指标，可反映畜禽产肉率。本试验结果表明，发酵构树饲料对肉兔屠宰性能无显著影响。张兴等[19]研究也发现，使用30%发酵构树饲料饲喂湘沙猪对其屠宰性能未见显著差异。内脏器官是机体生理功能的物质基础，其发育状况可反映机体的器官能力。王小平等[20]研究发现，添加不同比例青贮构树饲料的各试验组间肉羊的心、肝、脾、肺、肾的器官指数无显著变化。本试验中，发酵构树饲料对肉兔的心、肝、脾、肺和肾的器官指数也均无显著影响。目前，有关发酵构树饲料对肉兔的屠宰性能和器官指数影响的研究不多，其可能存在的机制尚待进一步研究。

肉品质是畜禽生产中的重要经济性状，其评价指标包括肉色、系水力、pH 等[21]。熊罗英等[22]发现，在AA 肉仔鸡饲粮中添加6.75%发酵构树饲料对肉仔鸡的屠宰率无显著影响，但可以显著降低胸肌和腿肌的滴水损失，这表明发酵构树饲料可以提高鸡肉系水力和多汁性。本试验中，发酵构树饲料显著降低了肉兔背腰最长肌的滴水损失。肌肉水分流失会带走其中的营养物质、风味物质和血红素等，对肉的营养价值、风味和肉色造成损害[23]。相关研究表明，发酵构树饲料可以提高育肥猪瘦肉率、降低背膘厚度、增加肉色和系水力，进而改善猪肉质量及风味[17,24]。在反刍动物中使用发酵构树饲料也可显著提高其屠宰率和肉品质[25]。这可能是因为构树中含有较多黄酮类、葡萄糖苷类、生物碱类等活性成分，可减少自由基对肌肉蛋白的损伤，从而改善肉品质[26]。因此，在肉兔饲养中使用发酵构树具有一定优势，但本次试验仅探索发酵构树饲料使用的可行性，并未针对其肉品质做详细探究，后续可以深入研究。

3.3 发酵构树饲料对肉兔血液生化指标的影响 动物血清生化各项指标可反映动物机体生理机能代谢状况[27]。血清中BUN 含量减少，反映了机体对BUN 的沉积量增加，氮的利用率提高。AST 和ALT 活性可反映肝脏对蛋白质和氨基酸的代谢能力。本试验中，AST 和ALT 有所上升，可能因为发酵构树饲料中含有黄酮、糖苷类等药用成分能提高肝脏代谢能力[28-30]。TC 和TG含量能反映机体脂肪代谢情况[31]。本研究中，构树组TC 含量相较于对照组有一定减少，表明发酵构树饲料具有有一定降血脂作用。有研究发现发酵桑叶饲喂蛋鸡可以降低血脂[32]。而构树与桑树中有类似的生物碱等活性成分可以调节脂质代谢。GLU 是细胞的能量来源和新陈代谢中间产物，是单胃动物最直接的能量来源。本试验中，6% 构树组与9% 构树组GLU 含量极显著高于对照组，表明发酵构树饲料对断奶幼兔的能量代谢有显著影响。TP 含量是衡量机体对蛋白质吸收能力、利用能力以及机体免疫水平的指标。动物的代谢系统可以调控血浆蛋白质、氨基酸和组织蛋白以保证内环境稳态[33-34]。王玉田等[35]发现，饲喂含枯草芽孢杆菌等复合益生菌的发酵饲料能提高断奶仔猪血清中TP 含量。本试验中，构树组血清中TP 含量极显著高于对照组，这可能因为发酵构树饲料也含有较多种类的益生菌，改善了幼兔肠道健康，进而影响了蛋白的消化利用。在本试验中，6%构树组和9%构树组IP 含量极显著高于对照组。血液中磷含量主要由肠道吸收，说明发酵构树饲料能促进兔肠道上皮细胞的吸收[36]。以上结果表明，发酵构树饲料具有一定提高幼兔小肠吸收能力的作用，具体机制有待探究。

3.4 发酵构树饲料对肠道形态的影响 肉兔对饲粮中营养成分吸收量，很大程度上依赖于肠道的发育情况。因此，肠道组织健康状况是动物机体能否最大程度消化吸收饲粮的关键。绒毛和隐窝是肠道重要的生理结构，分别影响营养物质与肠道的接触面积和肠绒毛上皮细胞的分泌功能[37]。绒毛高度可以直观反映肠道吸收能力，隐窝深度为肠腺离黏膜表面的最近距离[38]。本试验中，9%构树组肉兔的空肠绒毛长度显著高于对照组，虽然3%构树组和6%构树组绒毛长度没有提高，但隐窝深度有一定降低，进而提高了绒隐比。而饲喂玉米皮饲粮显著提高了生长肉兔十二指肠绒毛高度，改善了其肠道形态结构，认为可能是由于谷物麸皮类饲料原料纤维组成结构与基础饲粮不同[39]；相关研究也表明，不同来源纤维，不同纤维成分均可影响兔肠道组织形态[40-41]。在生长兔饲粮中使用不同来源的纤维饲料，对生长肉兔的肠道发育会产生不同效果。相对于传统草本饲料，发酵构树饲料属于木本饲料可能在小肠中停留更长时间，进而改善了肠道消化吸收能力。

4 结 论

本研究结果表明，使用发酵构树饲料可以提高兔肉背腰最长肌亮度、降低其滴水损失，提高空肠绒隐比，且对血液生化指标有一定提高作用，使用9%发酵构树饲料未见不良影响，可继续探究其在实践生产中的使用。