规模场非洲猪瘟综合防控技术的应用

蔡国忠

（重庆长寿温氏畜牧有限公司，重庆 401231）

非洲猪瘟（Africa swine fever，ASF）是1921年在非洲东部的肯尼亚被发现，1957年前一直在撒哈拉以南的国家传播，1957年后葡萄牙发现后传入欧洲国家，随后又传入拉美、北美地区的国家。2018年传入我国并被列为重点防范的一类动物疫（王华等2008）。非洲猪瘟主要传染源是患病猪，健康猪与患病猪直接接触后1～9d即可被感染。当有围栏相隔时，可延迟6～15d(Niederwerder,et al，2019)。此外，由于ASF的致死率高，若扑灭延迟，可导致该病致死性发生改变并下降，康复猪增多且这些康复猪也有传染性（王华等2008）。ASF的生物传播媒介主要是蜱虫，蜱虫通过吸血来传播病毒，蜱虫可通过野猪和人类活动来感染家猪，因此蜱虫也是非洲猪瘟在饲养和野外环境间传播的重要媒介（张睿等2019）。ASFV在外界环境的抵抗力较强，健康猪也可通过感染猪的排泄物、栏位、水槽及受污染运输车辆和食入污染的饲料、饮水等途径感染该病。

自2018年非洲猪瘟传入我国以来，已经给我国养猪产业造成巨大损失，虽然已得到基本控制，但由于没有有效疫苗和药物，非洲猪瘟仍是危害我国养猪产业最为严重的疾病，猪场只能过严密防控，及时监测来预防非洲猪瘟，因此在尚未有疫苗与特效药物问世前，综合防控技术是最有效的手段，本研究主要以某猪场为例，通过对该猪场非洲猪瘟期间的人员管理、消毒采样以及分析研究，总结了一些关于规模化猪场防控非洲猪瘟的对策及方法。

1 人员管理

1.1 猪场的基本情况猪场建立在空旷、排风通畅远离居民生活的郊区。厂区内主要分为生活区和生产区，生活区主要是包括食堂、仓库、人员休息区等。生产区分为A区和B区，每区各5个栋舍，生产人员住在栋舍里的休息区，栋舍分为产房和配怀舍，产房含有5个房间，每个房间有56头猪，配怀舍为一个整体，一共可容纳1152头猪。

1.2 人员管理

1.2.1 人员进出猪场的管理 人员需要规定日期进场或出场，进场前3d不要食入猪肉，不要到菜市场或超市的生鲜区，进场前还需要到隔离点采样，阴性后才可以洗澡换工作服进入隔离区，携带的物品也应经过消毒后带入隔离区，携带的物品只能是生活必需品（手机、充电器等），进入隔离区后仍需要采样为阴性才可进入猪场生活区，进入后仍需要洗澡换衣服采样，阴性后进入栋舍，流程仍是洗澡换衣服。从隔离点到猪场的路上以及生活区到生产区的路上均需要穿隔离服戴鞋套。与出场流程基本相似，但不需要采样。

1.2.2 生活区人员管理 一般情况下，送饭和物资人员、收死猪、维修设施的工人外其余人不能进入生产区，生活区人员进入生产区要先穿好防护服才可进入，生产区出入口设有垃圾桶，出生产区前要脱下防护服。送饭与送物资人员不能进入栋舍里面，物资与饭菜放入栋舍耳房里后需立即离开。维修栋舍里设施的工人进入栋舍前需要再穿上一层防护服才可进入，出栋舍时需脱下。

1.2.3 生产区人员管理 进入生产区的人员无特殊情况不能离开生产区，生产区人员每次进入产房或配怀舍均需要穿防护服，鞋套，出来后需要脱下。管理产房人员在进入每间产房前需要在火碱水溶液中站15s，才可进入产房。每次工作完从产房或配怀舍回到休息区，需要换衣服洗澡，衣服需要用卫可水浸泡0.5h后才可以用洗衣机清洗。人员除工作需要外不得随意打开栋舍联通外界的门，丢垃圾时不得踏出门外。生产区人员调整栋舍，除自己从场外带来的物品外其余物品不能带走，离栋和进入新栋舍都需要洗澡更衣。

2 消毒、采样与检测

2.1 非洲猪瘟严重期间消毒

2.1.1 制定合理的消毒制度 消毒可以有效的杀灭病原微生物，切断的传播。消毒可分为物理性、化学性以及生物热性消毒。物理性消毒在猪场主要是通过打扫来保持猪舍的干净，及时清除掉落的饲料和粪便一方面有利于处理掉病原微生物，一方面防止因长时间不清理遇水后粘连在地上难以清除，导致病原微生物滋生。必要时可采用高压水枪冲洗。化学消毒主要有喷洒、浸泡、熏蒸、擦拭。喷洒为最常用、最方便的一种消毒方法，主要适用于休息区和生活区的环境、猪舍地面以及栏位，浸泡法可用来消毒携带进入猪场的非电子类产品、工具、饮料及带皮的水果等，熏蒸主要消毒食物，擦拭可用于消毒电子产品。人员调整栋舍所携带的物品进入新栋舍也要消毒，防止带入。生物法主要用于处理粪便以及废物。

消毒要做到不留死角，风机、料槽口等地方也要消毒。有效的消毒需要明确不同消毒剂的适用范围、规范消毒周期、消毒剂量和消毒时间，根据消毒剂性合理保存消毒剂健全消毒制度（王巍等2021）。例如，人员进出通道可选择1：400倍稀释的过硫酸氢钾化合物；宿舍内的地面或墙壁可选择1：400倍稀释的过氧乙酸或过氧化氢；贩猪和运输饲料车辆可先用碱性清洁剂清洗，再用1：400倍稀释的过氧乙酸或过氧化氢。根据消毒剂性合理保存消毒剂健全消毒制，福尔马林、戊二醛、次氯酸盐、过氧化物、臭氧水和苯酚均是ASFV的高效消毒剂。不同的猪场由于气温、潮湿程度、气压等有所不同，这也使消毒剂对非洲猪瘟病毒的灭活效果不同，因此猪场在制定消毒制度时也需要根据本场环境选择消毒剂以及使用的剂量。

2.1.2 不同区域的消毒 （1）生活区消毒与生产区人员休息区的消毒：采用1：200的卫可消毒液进行消毒，每次消毒需要保证任何地方都喷洒到卫可水。进入猪场的车辆要消毒后才可进入。（2）产房与配怀舍的消毒：产房与配怀舍消毒2次/d，产房与配怀的过道用3%的火碱溶液消毒，地面全部要喷洒到并且要保持湿润，喷洒的同时要保持地面清洁，及时扫除掉落到地面的饲料以及粪便。过道消毒完毕后，用1：200的卫可对墙壁及栏位进行消毒，每个栏位要保证消毒到栏杆有水滴滴露的程度。每天消毒完毕后才可喂食。（3）物资、食物的消毒：食物需要先高温消毒0.5h后可送入栋舍，送入栋舍后用卫可喷洒外包装袋后才可食用，物资类可浸泡的需要用卫可水浸泡0.5h后使用，不可浸泡得如防护服、大件物资可采用喷洒卫可，电子产品类主要采用擦拭的方法。（4）处理死猪的消毒：处理死猪也需消毒后才可放到门外，处理死猪的人员需要穿着两层隔离服，处理死猪前需要用卫可喷洒死猪的栏位以及死猪两边的栏位，死猪包裹透明塑料布后才可放置到室外，处理死猪的人员需要脱下一层防护服并用卫可消毒鞋底后才可进入室内，处理死猪的工具也消毒后才放入室内，进入室内后需要将死猪栏位再次消毒。处理死猪人员需要洗澡更衣，室外负转运死猪的车辆，转运后也需要消毒。（5）转群过程的消毒：进猪前需要冲洗，进猪的路线在进猪前后需要用火碱溶液消毒。转运小猪前需要在过道铺上一层透明塑料，一层彩色塑料，不但地面要覆盖，两边墙壁至少要覆盖到墙高度的一半。转运后仍需要再用火碱消毒一遍。（6）实验室的消毒：每次检测完样品都要对桌面以及使用过的移液枪用84消毒液擦拭，用过的枪头及试剂盒需要装入自封袋后再扔进垃圾桶里，定期对使用的仪器用喷洒上酒精的纸巾或毛巾进行擦拭。每天进行检测工作前，用84消毒液擦拭桌面仪器移液枪以及冰箱门把手地面。晚上检测工作结束后用卫可水喷洒地面，84消毒液擦拭桌面仪器；将离心管架浸泡到84消毒液中第二天早上再取出并且倒掉垃圾。此外，实验室还需要定期进行采样，以防止实验室污染。

2.2 非洲猪瘟严重期间的采样采样的目的主要是检测异常猪是否患有，使患病猪及时淘汰，防止扩散。当前猪场采用的检测办法为荧光定量，血液、咽喉拭子及环境样均可检测，因此在对猪采样也可选择尾根血或者咽喉拭子，尾根血采样需要注意不要让血液落到地上以防止污染环境，采尾根血容易因猪疼痛而骚动采不到血；咽喉拭子采样需要确保纱布到达咽喉部，对被多天连续采样的猪，很难将纱布送入到咽喉部，有的甚至出现不愿张嘴，此时也可考虑擦拭该栏位的料槽和饮水装置。采样少食的猪时，要考虑该猪是因为饲料过多还是因为异常，要及时调整饲料量。

2.2.1 异常猪采样 喂食时需要观察猪群，采样对象为厌食、少食、分娩的猪以及死亡的仔猪，采样工具为包裹纱布的输精管，将其通入猪咽喉处采样，采样时人员要戴长臂手套，采样过程中注意不要碰到栏杆，若是手臂碰到要更换长臂手套，身体触碰到栏杆要及时更换防护服，采好样后将纱布放入自封袋内，采样结束后要进行分样，分样过程要在卫可水上进行，将自封袋内注入3mL生理盐水，充分揉搓纱布，最后将混有猪唾液生理盐水挤入离心管中，盖紧离心管的盖子。倒入离心管的过程中最好不要洒到地上。分样结束后要用卫可消毒地面。每天都不吃食的猪可隔一天采样一次，如果吃食可以不采。

2.2.2 人员、环境采样 人员采样主要用纱布采样，将纱布放入自封袋中注入5mL生理盐水，取出纱布擦拭头发、头皮、暴露在环境的皮肤、衣服以及衣服上的口袋、鞋底，擦拭完后放自封袋，充分揉搓，将混合液滴入离心管中。环境主要采集休息区环境、产房以及配怀舍环境、栏位，同样是用纱布擦拭后将混合液注入离心管中。

2.3 非洲猪瘟严重期间的检测非洲猪瘟的诊断方法有多种，但荧光定量PCR是猪场最为常用的方法，该法可用于猪感染早期的检测，并且该方法快速、准确、灵敏性高。在进行检测的过程中最重要的一点为防止试剂污染，这要求操作人员在进行检测过程中要细心、认真。样品要放在低温下保存以防失效。在进行DNA纯化过程时加一个样品换一个枪头，若出现回枪，需换枪头处理，防止污染。人员工作过程中一定要穿实验服以及戴手套，手套沾染到样品要及时更换，贴膜的过程一定要将膜贴紧、贴平整，以防止离心过程中漏液或液体跑到其他孔里，导致试剂污染结果不准确。

检测主要采用荧光定量法，首先将样品编号，用移液枪提取300mL加入DNA纯化试剂盒中，放入仪器30min中提取核酸，在超净台中将提取的核酸及阴性对照、阳性对照加入反应液中，在装有混合液的板子上贴上一层膜，然后将其离心15s后，放入仪器中进行扩增，大约1h后可查看结果。出现阳性需要复检并记录CT值。在加入阳性对照过程中，阳性对照的盖子不得接触桌面，最好用手夹住，在加入阳性对照后先更换手套再将其放入机器。出现样品量过少可向其中加入生理盐水，注意生理盐水瓶口不要与离心管接触；液体过于浑浊可采用离心。

3 综合防控措施

3.1 科学的饲养管理科学的饲养管理可猪群的抵抗力，减少猪群患病的风险。科学的饲养管理主要是要做到保证科学饲养保持猪舍内清洁干燥。保证科学饲养要做的固定时间给予猪群饲料、根据每个猪吃食情况调整饲料量，以防止因为料槽中剩余的饲料发霉变质，猪采食后生病，体抗力降低。若料槽中含有过多的水和饲料要及时清理，最好在每次喂食前检查料槽后进行喂食。每次有新来的饲料要先进行检测，检测为阴性再放入料塔，以防止饲料中携带。保持猪舍在适宜的温度下（20℃），产房要配有保温箱，保证小猪生活在25～30℃下。定期对猪舍进行清洁，及时清除猪舍内的粪便和拱到地面上饲料，料槽出现问题要及时维修。定期淘汰长期不吃食及患病不愈的猪。

3.2 加强人员管理猪场应该定期对人员进行防控知识培训，增强人员生物安全意识，落实防控规章，最好有专门生物安全员进行监督，防止出现不遵守生物安全制度的现象，可以设置奖惩制度，对违反制度人员采取罚款等措施。规范生产区人员的操作，可通过生产区人员在采样、消毒过程中拍摄视频的方法来监督，负责人员要及时指出存在的问题，防止出现污染等情况。

3.3 保障水源安全猪场用水的消毒对防控非洲猪瘟也是至关重要的，猪场的水源一般为地下水或附近河水，这些水源一般情况下达不到生物安全标准，因此猪场在用水前需要消毒，一般采取漂白粉进行杀菌消毒，除消毒外也可定期对水源检测，以保障水源的安全。此外在水中添加酸化剂，可以促进水中有益菌的生长，预防猪腹泻病的发生，从而提高猪群的抵抗力，防止非洲猪瘟的发生。

3.4 防止风险动物进入猪场非洲猪瘟病毒可以通过蜱虫传播且蜱虫可寄生在多种动物身上，因此猪场不但要防止蜱虫进入，还要防止其他动物如鸟、蚊蝇、鼠、野猪等的进入。猪场大门与地距离不能超过1cm，必要情况下大门应保持关闭状态防止老鼠的进入；猪场应设置有围墙，且墙上不要有缺口，若发现缺口应立即维修，墙上也不应有爬墙类的植物，以防止野生动物或宠物的进入；猪场内应设置有防鸟网、防虫网，防止鸟类和蚊虫的进入舍内，并且定期进行灭鼠、灭虫的措施。