hs-CRP、IL-6和WBC检测对小儿呼吸道病毒感染的诊断价值

隗晓华 李文斌 高鸿博 王艳飞 曹燕玲 刘振奎

小儿呼吸系统感染是儿科较常见疾病，分为上下呼吸道感染，上呼吸道感染主要由病毒感染导致，占80%左右，少部分患儿为细菌感染或支原体、衣原体等并病原体感染，下呼吸道感染主要是细菌、病毒感染引起[1]。小儿呼吸道病毒感染诊断主要依据为病原体，但病原体检测相对繁琐，检测速度较慢，不利于早期诊断，延误治疗时间。研究证实，炎性因子在小儿呼吸道病毒感染疾病进展中发挥重要作用，超敏C-反应蛋白(hypersensitive C-reactive protein，hs-CRP)是血浆中的一种C-反应蛋白，由肝脏合成，是一种全身性炎性反应急性期的非特异性标志物，对小儿呼吸道病毒感染具有一定诊断价值；白细胞介素-6(Interleukin-6，IL-6)是趋化家族的一种细胞因子，由白细胞(white blood cell，WBC)产生，在WBC间隙发挥作用，当机体发生炎性感染、免疫反应时，IL-6水平显著升高；WBC是一类无色、球形、有核的血细胞，当机体发生感染、炎性时，其水平显著上升[2，3]。本研究通过对我院呼吸道病毒感染患儿行hs-CRP、IL-6、WBC检测，探讨对小儿呼吸道病毒感染的诊断价值，报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象 回顾性分析我院2020年9月至2022年2月收治的50例呼吸道病毒感染患儿为研究对象(病毒感染组)，其中男30例，女20例；年龄5个月～8岁，平均年龄(4.36±0.22)岁;病程2～8 d，平均病程(6.12±0.25)d；另选50例同期健康儿童为对照组，男28例，女22例；年龄6个月～8岁，平均年龄(4.42±0.24)岁。2组儿童基本资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。本研究经医学伦理委员会批准。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：①参照《急慢性咽炎》[4]、《实用小儿呼吸病学》(第2版)[5]呼吸道疾病、支气管、肺部感染等诊断标准，患儿有头痛、发热、咳嗽、咳痰、呼吸困难等症状；② 2组儿童家属知晓并同意本研究。

1.2.2 排除标准：①存在先天性心脏病和(或)严重肝肾等重要脏器疾病者；②存在肺部器质性病变者；③伴凝血功能障碍者；④存在恶性肿瘤性疾病者；⑤免疫功能较正常同龄儿低下或缺陷者；⑥于研究开始2周内进行过抗感染治疗且无法配合静脉采血者。

1.3 方法 取患儿空腹血3 ml，以3 500 r/min离心10 min分离血清。

1.3.1 降钙素原(PCT)检测：采用电化学发光免疫分析仪检测。

1.3.2 血清淀粉样蛋白A(SAA)检测：采用干式荧光免疫分析仪AFS2000A设备检测，试剂盒为南京诺唯赞医疗科技有限公司。

1.3.3 WBC检测：使用电阻抗法检测WBC水平。

1.3.4 hs-CRP检测：采用韩国Boditech Med inc公司生产i-CHROMA Reader免疫荧光分析仪检测。

1.3.5 IL-6检测：取上清，采用上海纪宁IL-6检测试剂盒(酶联免疫法)检测，将试剂盒取出后恢复至室温，设置待测样本、阴性对照、标准品，洗板3次加入100 μl酶标本，在37 ℃温育1 h后弃去液体，甩干，加入洗涤液，静置30 s后弃去液体，反复5次，拍干，加入显色剂A 50 μl，显色剂B 50 μl，混匀后在37 ℃避光显色10 min，加入终止液50 μl，混匀后在450 nm下测定各孔吸光度数值，在白色背景下观察显色情况，阳性为蓝色，阴性为无色。

1.3.6 D二聚体检测：采集的静脉血加入枸橼酸钠抗凝，分离血浆，采用上海初态生物的人D二聚体ELISA试剂盒检测，将试剂盒取出后恢复到室温，设置测样本、阴性对照、标准品孔，样本稀释液40 ml，每孔加100 ml辣根过氧化物酶标记的检测抗原，在37℃温育1 h后弃去液体，甩干，加入洗涤液，静置1 min后弃去液体，反复5次，拍干，每孔加显色剂A 50 ml，显色剂B 50 ml，混匀后在37℃避光显色15 min，加入终止液50 ml，在450 nm下测定各孔吸光度数值，计算浓度。

1.4 观察指标

1.4.1 实验室检测：比较2组儿童hs-CRP、IL-6、D-二聚体、PCT、SAA、WBC水平。

1.4.2 2组一般资料比较，包括性别、年龄、出生方式、居住地、早产史、有无哮喘史、用力肺活量、第1秒用力呼气容积，并采用安徽FGC-A+肺功能测试仪检测用力肺活量、第1秒用力呼气容积。

1.4.3 Logstic多因素分析:影响小儿呼吸道病毒感染的危险因素。

1.4.4 ROC曲线：分析hs-CRP、IL-6、D-二聚体及联合检测小儿呼吸道病毒感染的诊断价值并绘制ROC曲线图。

2 结果

2.1 2组一般资料比较 病毒感染组居住农村、有早产史、哮喘史、吸二手烟、多次使用抗菌药物占比显著高于对照组(P<0.05)。2组间性别比、年龄、出生方式、用力肺活量、第1秒用力呼气容积无差异(P>0.05)。见表1。

表1 2组一般资料比较 n=50，例(%)

2.2 2组儿童hs-CRP、IL-6、D二聚体、PCT、WBC、SAA水平比较 病毒感染组hs-CRP、IL-6、D二聚体、PCT、WBC、SAA水平显著高于对照组(P<0.05)。见表2。

表2 2组儿童hs-CRP、IL-6、D二聚体、PCT、WBC、SAA水平比较

2.3 小儿呼吸道病毒感染的Logstic多因素分析 以小儿呼吸道病毒感染为因变量，以小儿一般资料里存在差异因素和IL-6、D二聚体、PCT、WBC、SAA为自变量进行二元Logstic回归分析，结果显示，hs-CRP、IL-6、WBC水平升高、居住农村、有早产史及哮喘史是小儿呼吸道病毒感染的危险因素(P<0.05)。见表3。

表3 小儿呼吸道病毒感染的logstic多因素分析

2.4 hs-CRP、IL-6、WBC及联合诊断价值分析 hs-CRP、IL-6、WBC及联合诊断小儿呼吸道病毒感染的曲线下面积AUC分别为0.644、0.885、0.617、0.923，联合诊断AUC显著高于单独检测(P<0.05)敏感度分别为92.0%、84.0%、58.0%、94.0%；特异度分别为54.0%、80.0%、74.0%、82.0%。见表4，图1。

图1 hs-CRP、IL-6、WBC及联合诊断小儿呼吸道病毒感染的ROC曲线图

表4 hs-CRP、IL-6、WBC及联合诊断小儿呼吸道病毒感染的效能分析

3 讨论

呼吸系统是一个开放性系统，直接与外界相连，环境、细菌、病毒等均可导致机体全身或呼吸系统局部防御功能降低，引发呼吸系统感染[6]。小儿呼吸道由于气管、支气管发育尚未成熟，相对狭窄，且黏膜血管较丰富，黏液腺分泌不足，黏液形成较少，同时呼吸道纤毛运动、清除能力较差，肺泡面积和数量较少，因而免疫力降低时，易发生呼吸道感染，诱发缺氧，长期进展演化为肺部感染，流行病学研究结果表明，儿童感性疾病发病率占小儿疾病高达40%[7]。肺部感染主要为肺实质和间质感染，由细菌、病毒感染引发，主要以肺炎形式出现，治疗不及时，极有可能引发心力衰竭、败血症等疾病，严重威胁患儿生命安全。

小儿急性上呼吸道感染最为常见，在住院的患儿中，上、下呼吸道感染占所有感染60%以上，多数为肺炎，也是我国<5岁儿童第1位死亡原因[8]。 因此，对小儿呼吸道病毒感染性早期明确诊断，针对性治疗，对改善患儿预后极为重要。hs-CRP是机体受到细菌、病毒等微生物入侵或机体组织受损后，由肝细胞分泌合成的蛋白，可识别侵入体内病原体及损伤细胞磷脂，激活补体系统，清除体内反应原。研究表示，当机体感染时，hs-CRP水平会明显升高，炎性反应结束后，迅速降低，常作为特异性炎性反应标志物[9]。IL-6能加速炎性反应，对组织、器官具有一定损害，机体正常情况下，血液中IL-6含量较低，呼吸道感染后，IL-6水平快速升高，IL-6参与急性期炎性反应，激活炎性细胞，进而参与C-反应蛋白的合成，加速炎性反应[10]。D-二聚体是最简单交联纤维蛋白降解产物，为继发性纤溶特有代谢物，作为凝血常规的重要监测指标，其水平高低可反映机体是否处于高凝状态[11]。杨志梅[12]认为，D-二聚体作为诊断小儿肺部感染性疾病的指标，随着机体炎性反应被抑制，抗凝系统恢复，D-二聚体水平逐渐恢复正常水平，可帮助医师诊断疾病和判断预后。PCT含有116个氨基酸，属于一种降钙素前肽物质，主要由甲状腺分泌而来，健康人体中PCT分泌较少，血清含量较低，一旦出现细菌感染、脓毒症时，PCT水平显著上升，但发生病毒感染或自身免疫性疾病时，其水平升高不显著，因此，常作为临床细菌感染与病毒感染鉴别的重要指标。血常规检查是小儿呼吸道感染疾病的基本检查项目，其中WBC及其各项分类比例为鉴别感染类型的常规指标，但由于个体血液中WBC基础值差异较大，且WBC基础值易受各种因素影响，因此，单独采用WBC用于小儿呼吸道病毒感染的诊断灵敏度和特异度较差，难以提供足够价值信息。SAA为一类经肝脏所产生的急性时相反应蛋白，主要表达于泡沫细胞、肝细胞及脂肪细胞中，正常情况下，在血清中含量极低，当机体发生细菌或病毒感染时，水平显著上升，甚至达到正常水平100倍左右[13]。

本研究结果显示，呼吸道病毒感染患儿hs-CRP、IL-6、D二聚体、PCT、WBC、SAA二聚体水平显著升高，表明感染患儿体内炎性反应加剧。韩菲等[14]研究表示，在小儿呼吸道感染性疾病中，hs-CRP水平较健康儿童高，有利于疾病的早期诊断；梁结玲等[15]研究证实，机体发生细菌感染，原本极低微量的hs-CRP含量会提高数十倍，但被病毒感染时，敏感度较弱，病毒感染患儿水平显著低于细菌感染患儿；霍姝琦[16]研究发现细菌感染患儿IL-6水平显著高于病毒感染患者和健康儿童，IL-6可评估呼吸道感染患儿严重程度，预测患者短期疗效。潘晨等[17]研究表示，感染患儿IL-6水平高于正常健康儿童。宋亚娣等[18]研究发现，感染患儿IL-6水平较健康儿童高。邓建忠等[19]在D二聚体检测小儿肺部感染相关研究中发现，在肺部感染患儿中D二聚体水平快速上升，显著高于健康儿童，认为D二聚体可诊断小儿肺部感染疾病，判断肺部感染疾病类型，为患儿治疗提供指导。主要原因为小儿咽部淋巴组织较成人丰富，气管、支气管腔相对狭窄，软骨更软，缺乏弹性组织，血管丰富，黏液腺分泌不足和纤毛运动差，极易引起感染，分泌物不易被排出，容易出现缺氧情况，导致血管内皮损伤，同时组织生成大量因子，激活凝血系统，使凝血系统遭受损伤，造成凝血功能障碍，引起高凝血症。杨爱国[20]研究发现，肺炎患儿D二聚体水平显著高于健康儿童，主要原因为儿童肺部发育不完全，呼吸道感染后炎性可阻碍机体通气、换气功能，造成机体缺氧。杨德平[21]研究发现，SAA在儿童早期细菌感染、病毒感染患儿体内表达明显升高。孙志刚等研究表明，呼吸道感染患儿早期SAA水平显著升高，提示血清SAA及SAA/CRP水平可辅助诊断感染性疾病。杜春梅等[22]将肝素结合蛋白(HBP)结合PCT应用于小儿呼吸道细菌感染诊断发现，呼吸道细菌感染患儿HBP、PCT显著上升，HBP、PCT截断值分别为13.78 ng/ml、0.13 ng/ml，证实HBP、PCT可应用于小儿呼吸道细菌感染诊断。张宏燕等[23]研究发现，呼吸道细菌感染患儿PCT水平显著升高，但病毒感染患儿无显著变化，主要原因为PCT仅应答细菌、真菌、寄生虫感染，对病毒感染应答较弱。柏居林等[24]研究发现WBC在呼吸道感染患儿体内显著上升。李作洁[25]研究表明，WBC诊断儿童呼吸道病毒感染的AUC为0.537，认为其存在一定价值，但需要辅助其他指标综合判定。以上研究结果均与本研究一致。

本研究结果显示，病毒呼吸道感染患儿中，居住农村、有早产史、哮喘史、吸二手烟、多次使用抗菌药物患儿占比较高，且多因素回归分析发现，居住农村，有早产史、哮喘史是小儿呼吸道病毒感染的危险因素。主要原因为小儿喉反射弱，纤毛运动功能较为缺乏，容易出现呼吸道感染，其中农村儿童生活质量相对较差，微量元素较缺乏，可能存在一些先天性疾病，因此感染风险显著增加。此外，早产儿可能由于特殊呼吸中枢发育不成熟，体内碳酸分解为二氧化碳数量减少，出生后不能有效刺激呼吸中枢，肺泡数量较少，整体呼吸肌发育不全，出声后咳嗽反射比较弱，同时早产儿出生后从母体内携带抗体较低，易出现呼吸道感染。茆俭等[26]研究认为，小儿呼吸道病毒感染一年四季均可发病，微量元素不足、早产史均是小儿呼吸道感染的危险因素。王志丹等[27]研究表示，哮喘与感染关系比较密切，小儿身体抵抗力比较差，哮喘患儿更容易继发呼吸道感染。以上研究均与本研究相似。因此，对于农村早产且具有呼吸道病史的患儿需多加关注，加强健康知识宣教，给予充足营养。

本研究结果显示，当小儿呼吸道病毒感染时hs-CRP、IL-6、WBC水平升高，hs-CRP、IL-6、WBC及联合诊断小儿呼吸道病毒感染的曲线下面积AUC分别为0.644、0.885、0.617、0.923，诊断敏感度分别为92.0%、84.0%、58.0%、94.0%，特异度分别为92.0%、84.0%、58.0%、94.0%，且联合诊断AUC显著增大。表明三者联合检查可弥补单项检查的不足，提高诊断效能。李朝辉等[28]研究表示，SAA联合hs-CRP诊断价值更高，对小儿呼吸道感染性疾病患儿预后具有一定判定价值。本研究未对hs-CRP、IL-6、WBC水平进行动态检测，这些指标对患儿预后有无影响，需进一步研究。

综上所述，在小儿呼吸道病毒感染中，hs-CRP、IL-6、WBC水平呈高表达，且居住农村、有早产史及哮喘史是小儿呼吸道病毒感染的危险因素，hs-CRP、IL-6、WBC联合检查对小儿呼吸道病毒感染的诊断价值较高。