血液形态学分析系统在异型淋巴检验中的应用探讨*

蔡科威，朱圣辉，梁敬姣，杨鹏

（宁波舜宇仪器有限公司，浙江 宁波 315400 ）

在现代临床检验过程中，血常规检验是疾病筛选的重要手段之一。目前医院中对于血常规的检验主要是通过血球仪结合形态学镜检的方式进行［1］，血球仪简单快捷，在常规检查中具有明显优势。但由于无法直观看到细胞，导致在一些异常细胞检查中往往作用有限。形态学镜检一直是第一金标准［2］，但是其效率低下，一些落后地区甚至不镜检和没能力镜检。现在越来越多血液形态学分析设备和血球仪联合应用，两者互补，减少人力同时，增加了诊断准确率［3-4］。

血常规白细胞检查中对于异常细胞检查不容忽视，异型淋巴作为外周血镜检时异常细胞的一种，其异常的出现主要由病毒感染导致，是一种形态变化的非典型性淋巴细胞。其在外周血中检出往往提示有单核细胞增多症［5］，淋巴细胞增值性疾病，病毒感染等，尤其在小儿多见［6］。但由于血球仪方法学的局限性［7］，血球仪并不能完全提示异型淋巴细胞的存在。加上异型淋巴的三种表现型形态学上与其他细胞较相近，导致实际工作中的检验难度相比其他常见白细胞类型较大。本文对比血液形态学分析系统和血球仪扫描结果，以人工镜检为检验标准，探讨血液形态学分析系统在对异型淋巴的检出上的应用价值。

1 资料与方法

1.1 测试对象与人员

选取2022 年6 月至9 月宁波市第一医院收治疑似存在病毒感染的患者96 例，男54 例，女42例。年龄5 个月至75 岁。由两名具有血液形态学检验经验的检验师进行检测分析。

1.2 仪器与试剂

中国宁波舜宇仪器有限公司生产血液形态学分析系统AMS-200；中国宁波舜宇仪器有限公司生产RX50 光学显微镜；日本希森美康血球仪XN-9000。

宁波舜宇仪器有限公司生产显微镜专用镜油，中国珠海贝索生物技术有限公司瑞氏吉姆萨染色液。

1.3 方法

1.3.1 样本准备和人工镜检 对96 例测试对象抽取静脉血，用EDTA 抗凝。对每例样本推制成厚薄均匀的血涂片2 张，晾干后用瑞氏吉姆萨染液进行染色。待干燥后分别由两名检验师计数100个白细胞中的异型淋巴所占比例，形态学判断按照全国临床检验操作规程［8］进行，结果统计平均数。国际阳性镜检标准中提出［9］，正常人可能存在少量反应性淋巴，需以数量≥5%为异型淋巴检测阳性。

1.3.2 血球仪组 血球仪通过半导体激光流式细胞技术以及鞘液电阻抗法对血液中的血细胞进行综合分析［10］，并输出相关白细胞分类和白细胞散点图等有关信息。结果以设备检测提示异型淋巴异常为检测阳性。

1.3.3 血液形态学分析系统组 血液形态学分析系统总体由三部分组成。第一部分为上料模块用于标本的放置与运输，最多同时可以放置200 例标本；第二部分为扫描拍照模块，标本运输至此模块后将会在高倍镜下完成对焦、扫描、细胞图像分割以及数字化图像储存；第三部分为软件分析及阅片模块，基于神经网络结构重参数化技术，将训练阶段的多分支网络结构转换为单路结构，在保持多分支网络高性能优势的同时，加快分析速度最终在电脑显示器上显示最终分类完毕的100个白细胞，操作者对异型淋巴细胞的分类结果进行审核和修改工作。以找到5 个及以上异型淋巴为检测阳性。

1.3.4 对比指标 对比血液形态学分析系统和血球仪在异型淋巴细胞上的阳性检出率。

1.4 统计学方法

采用SPSS 17.0 统计学软件对数据进行分析。计量资料以均数±标准差（）表示，两组配对比较采用t检验；计数资料以百分率（%）表示，比较用χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

在96 例样本中人工镜检确认异型淋巴阳性标本数量为53 例，在阳性标本检测中血液形态学分析系统组诊断阳性数量50 例，血球仪组诊断阳性数量41 例，见表1。人工镜检与血液形态学分析系统比较，差异无统计学意义（P=0.083＞0.05），而人工镜检与血球仪比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表1 各组别异型淋巴的检出情况（例）

表2 统计学分析差异比较结果

3 讨论

从异型淋巴和其他细胞的图像对比中不难发现，异型淋巴在其外观和大小上与其他细胞差距不大，部分表现极其相似，这使得血球仪在分析该部分数据时可能造成错误判断。而形态学的分析作为判断的标准，该检查方式一直是最为普遍接受的方式。形态学结合图像分析的方式从最早的简单图像搜索加上少数细胞分类［11］到现在利用神经网络技术进行几十种细胞识别，其在判断的准确性上一直有较好的表现。但针对于异型淋巴此类在形态学分析上存在一定判断难度的细胞类别，其准确性上需要进一步的探究。

异型淋巴细胞根据其形态学上的差异主要分三种类型，即浆细胞型，单核型以及幼稚型。异型淋巴是特殊类型白细胞，常规检验中操作者先通过血球仪的分类计数和散点图的提示来怀疑是否存在异型淋巴，最终通过显微镜下实际观察和计数完成确认工作。陈梦蕊［12］和王晓鸥等［13］对市面上的一些血球仪的异型淋巴检查情况进行研究，发现血球仪不能完全检查出异型淋巴数量异常的患者，在异型淋巴数目＜10%，且白细胞散点图提示不明显的情况下，可能存在漏检风险。这是因为散点图的表现方式并不能直观的体现该类细胞是否有检出，加上本身数量如果较少更是增加了检出难度。此外异型淋巴无论大小还是外观与其他类别细胞存在较多相似之处（见图1），即使进行了镜检，一些缺少经验的医生并不能很敏锐的进行准确判断。

图1 相似细胞举例

血液形态学分析系统从形态学出发，通过模拟人工镜检的方式并对结果进行数字化集成和表现，很好地弥补了血球仪无法直观观察到细胞外观的痛点，给了判断者更加直观和准确合理的判别方式。

本次研究发现，在异型淋巴的阳性检出率上，血液形态学分析系统的检出率为94.3%（50/53），而血球仪的阳性检出率为77.4%（41/53），血液形态学分析要优于血球仪。在设备原理上血液形态分析系统也模拟了人工镜检的方式，结果表现也更加直观和准确，适用于外周血检查中辅助检查异型淋巴。