中草药组方对鸡传染性支气管炎的作用

郭灵生，蒙 琦

（1.平凉职业技术学院，甘肃平凉 744000；2.甘肃省畜牧兽医研究所，甘肃平凉 744000）

鸡传染性支气管炎是由传染性支气管炎病毒（IBV）引起的一种高度接触性呼吸道传染病，临床上以鸡呼吸困难、咳嗽等症状为主［1］。该病毒主要以破坏免疫系统为主，不仅降低肉鸡和蛋鸡生产性能，群发时还会引起鸡大面积死亡，严重影响养殖户的生产效益，对养殖业造成了较大的经济损失［2］。鸡传染性支气管炎在疫苗预防方面受保护范围局限，在治疗方面西药又易产生耐药性等缺点，亟需以新的途径或药物来替代。以中草药为主的新型抗病药物在疾病防治方面起到了重要作用，其广谱性、低毒低残留和经济实惠等优点得到了越来越多学者的青睐［3］，尤其在抗菌抗病毒方面表现出来的优势有目共睹。

本研究以IBV 为研究对象，根据中草药组方原则进行合理组方，通过体外抗病毒试验和体内细胞因子变化水平筛选出了抗IBV 的中草药，可为后期开发中草药制剂抗鸡传染性支气管炎提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1.1.1 中草药组方、病毒和试验动物

1）中草药组方Ⅰ。板蓝根10 g、连翘8 g、射干10 g、鱼腥草10 g、炒白术8 g、桔梗10 g、黄芪10 g。

2）中草药组方Ⅱ。板蓝根10 g、连翘10 g、射干5 g、鱼腥草10 g、桔梗6 g、杏仁10 g、茯苓8 g。

3）中草药组方Ⅲ。板蓝根10 g、连翘8 g、射干10 g、鱼腥草10 g、马兜铃8 g、炒白术10 g、硼砂3 g。

以上方剂用2 倍蒸馏水浸泡0.5 h 左右，先用大火煮沸后再以小火煎煮约2 h，后用大火将药液浓缩至1 g/mL 置于4 ℃备用。所有中草药均购自平凉市中医院。

1.1.2 病毒 IBV 病毒液由平凉职业技术学院实验室保存，TCID50为10-6.45/0.1 mL。

1.1.3 试验动物 SPF 鸡胚由平凉职业技术学院实验室孵育，饲养至2 周龄。

1.2 方法

1.2.1 中草药组方对鸡感染IBV 的保护作用 将100 羽2 周龄的SPF 鸡随机分成5 组，每组20 羽。分别设定为空白对照组、IBV 病毒对照组、中草药组方Ⅰ组、中草药组方Ⅱ组和中草药组方Ⅲ组。IBV 病毒对照组和中草药组方组对雏鸡滴鼻0.2 mL 病毒液，每日观察发病情况，每组发病数达到10 羽以上开始饮水给药，每羽每次按照1 mL，2 次/d 饮水给药，试验期内饮水和饲料饲喂量相同，从试验第1 天开始记录每组鸡的死亡数量和时间，按照百分率计算分析。

1.2.2 中草药组方对感染IBV 雏鸡IFN-γ、IgG 和IL-2 含量的影响 分别在接毒后第3 天、第6 天、第9 天，每组随机抽取5 羽雏鸡，翅下采血2 mL，2 500 r/min 离心15 min 分离血清，按照IFN-γ、IgG和IL-2 试剂盒操作说明书进行检测，利用酶标仪测血清中IFN-γ、IgG 和IL-2 的吸光度（OD值）。以此计算这3 种细胞因子的质量浓度，用SPSS17.0 软件进行方差分析。

2 结果与分析

2.1 中草药组方对感染IBV 鸡的保护效果

如表1 所示，中草药组存活率均高于IBV 病毒对照组，且中草药组存活率都在60%及以上，3 组中草药间相比，中草药组方Ⅱ组较其他2 组存活率高，为85%，空白对照组鸡存活率为100%。

表1 中草药组方对鸡感染IBV 的保护作用

2.2 中草药组方对感染IBV 鸡γ 干扰素（IFN-γ）含量的影响

由图1 可知，感染IBV 后在试验第3 天，各组间的IFN-γ 含量无显著差异（P＞0.05），在第6 天和第9天，中草药组和空白对照组IFN-γ 含量显著高于IBV 病毒对照组（P＜0.05），且在第9 天IFN-γ 含量高于第6 天，但中草药组间无显著差异（P＞0.05）。

2.3 中草药组方对感染IBV 鸡免疫球蛋白G（IgG）含量的影响

由图2 可知，感染IBV 后于试验第3 天测得鸡血液中IgG 含量，各组间的IgG 含量无显著差异（P＞0.05），在试验第6 天和第9 天，测得中草药组方组和空白对照组IgG 含量显著高于IBV 病毒对照组（P＜0.05），但各组间差异不显著（P＞0.05），在试验第9天，中草药组方Ⅱ组IgG 含量极显著高于IBV 病毒对照组（P＜0.01），且显著高于空白对照组和其他中草药组（P＜0.05）。

图2 中草药组方对感染IBV 鸡免疫球蛋白G（IgG）含量的影响

2.4 中草药组方对感染IBV 鸡白细胞介素2（IL-2）含量的影响

由图3 可知，雏鸡感染IBV 后第3 天和第6 天各组间IL-2 含量无显著差异（P＞0.05），但与IBV 病毒对照组相比，中草药组方组IL-2 含量在逐渐升高。在试验第9 天，中草药组方Ⅱ组IL-2 含量显著高于其他各组（P＜0.05）。

图3 中草药组方对感染IBV 鸡白细胞介素2（IL-2）含量的影响

3 小结与讨论

试验结果表明，所用复方中草药具有明显优势，与IBV 病毒对照组相比，雏鸡最高存活率高达85%，最低存活率也达60%，说明中草药合理组方在一定程度上能杀灭病毒。

IFN-γ 具有广泛的生物学活性，在体液中大量分泌，主要起到抗病毒、抗肿瘤和进行免疫调节等作用，当病毒入侵时能保护正常细胞受到感染，调节体液免疫［4］。本研究发现，中草药组方有持续诱生IFN-γ 的作用，开始试验时，IFN-γ 含量无明显变化，第6 天中草药组IFN-γ 含量明显高于IBV 病毒对照组，说明本研究的中草药复方制剂具有抗病毒作用。

IgG 主要由免疫器官和一些浆细胞合成和分泌，以单体形式存在［5］。当机体发生体液免疫时，免疫球蛋白中的IgG 会大量产生，是血清中含量最高的抗体成分，约占血清总Ig 的75%［6］。IgG 以小分子蛋白大量分布于动物体内，相比于其他免疫球蛋白更容易穿透毛细血管而起到抗病毒感染作用［5］。该试验表明，试验后期中草药组方Ⅱ中IgG 的含量与IBV 病毒对照组、空白对照组差异显著，说明该复方中草药对IgG 有较好的诱生作用。

白细胞介素家族成员较多，而由T 细胞分泌的IL-2 在免疫应答中主要提高机体增强免疫水平，起到抗病毒作用［7］。IBV 在破坏机体免疫系统时，IL-2会在体液中增殖发挥作用。试验发现，在各时期内，与IBV 病毒对照组相比，中草药组和空白对照组IL-2 的含量水平在逐渐上升，且中草药组方Ⅱ组在第9天显著高于IBV 病毒对照组，说明中草药组方Ⅱ组在激发鸡T 细胞发挥细胞免疫方面表现出了很好的作用。

板蓝根、连翘、射干、鱼腥草和桔梗等合理组方能降低鸡传染性支气管炎的死亡率，同时能明显提高鸡血液中的免疫水平，起到抗鸡传染性支气管炎的作用。