生殖免疫抗体检测在女性不孕不育生殖道感染中的应用价值

段红伟,孙丽丽,王晓滇,李丽娟,范红云

不孕不育症致病机制复杂,且与生活习惯、居住环境等因素息息相关,近年研究显示[1],生殖道感染在女性不孕不育症中较为常见,继发性不孕不育妇女生殖道支原体及衣原体感染情况较为严重。近年来,免疫学与不孕不育症的关系受到学术界广泛关注,研究发现,生殖免疫因素能通过排斥精子、精卵结合、胚胎着床、胚胎发育等多种途径,影响生殖道内环境,诱导生殖道感染,从而影响生殖过程[2]。其中抗精子抗体(ASAb)是最常见的抗生殖免疫抗体,ASAb在正常情况下不会在女性免疫系统生成,女性生殖道存在伤口等情况将影响生理屏障功能,精子抗原不能被黏附屏障阻碍时,被大量释放入血,影响精子运动,造成不孕不育症,且有研究指出[3],ASAb表达水平与生殖道解脲支原体(Uu)、沙眼衣原体(Ct)的感染密切相关。抗子宫内膜抗体(EMAb)是一种自身抗体,在子宫内膜异位或内环境失调等因素刺激下,EMAb可大量产生,激活补体系统,并破坏子宫内膜结构,影响子宫内膜腺体功能,诱导不孕不育及生殖道感染[4]。抗卵巢抗体(AOAb)、抗心磷脂抗体(ACAb)也为临床常见的抗生殖免疫抗体,AOAb由机体受到感染、手术等刺激致抗原增多或过度免疫应答产生,可引起卵巢结构及功能损伤,造成不孕不育;而ACAb多由组织炎症、损害及粘连引起,可促进血栓形成,使蜕膜及胎盘血流不畅、血供不足,导致流产,同时二者均能通过影响生殖道微环境介导生殖道感染[5]。本研究回顾性分析151例不孕不育症育龄期女性临床资料,以评估血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb在女性不孕不育症合并生殖道感染诊断中的应用价值,为不孕不育症的临床诊疗提供新思路,现报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2020年3月至2022年12月在郑州陇海医院就诊的151例不孕不育症育龄期女性临床资料。151例不孕不育症者中合并生殖道感染74例(感染组),无生殖道感染62例(未感染组)。感染组年龄21～34岁,平均年龄为(27.41±5.06)岁;身体质量指数(BMI)为18～25 kg/m2,平均BMI为(21.06±2.17)kg/m2;学历为初中或小学7例,高中或中专35例,大专或以上32例。未感染组年龄21～32岁,平均年龄为(26.52±4.63)岁;BMI为18～24 kg/m2,平均BMI为(20.74±2.03)kg/m2;学历为初中或小学4例,高中或中专28例,大专或以上30例。2组年龄、BMI、受教育程度比较,差异无统计学意义(P>0.05)。

1.1.1 纳入标准[6]结婚时间≥2年的育龄期女性;婚后性生活正常且未采取避孕措施者;卵泡发育和排卵周期正常者;生殖道结构正常者;男方泌尿生殖系统正常且精液分析正常者;临床资料完整者。

1.1.2 排除标准 伴内分泌功能紊乱或外周血染色体异常等情况而不适合受孕者;男方或女方合并遗传性疾病家族史者。

1.2 方法

1.2.1 生殖道感染诊断 使用无菌窥阴器充分暴露受检者宫颈,使用无菌棉签去除阴道及宫颈口分泌物,弃去,使用宫颈液采集专用无菌棉拭子,置于宫颈口内1.5～2.0 cm,旋转5圈,稍作停留(10～15 s即可),采集宫颈液标本;使用分离培养法检测支原体,培养基由浅黄色变为浅紫色提示Uu、人型支原体(Mh)阳性,Uu在低倍镜呈棕色小型菌落,Mh菌落较大且呈油煎蛋样;使用实时荧光核酸恒温扩增(试剂盒购自上海仁度生物科技有限公司)检测Ct、淋病奈瑟菌(Ng)感染情况,试剂盒设有阳性对照与阴性对照,直观判断是否存在Ct及Ng感染。

1.2.2 生殖免疫抗体检测 受检者均抽取空腹外周静脉血,使用酶联免疫分析法(美国ABI公司)检测血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平;采用金标法试纸(美国R&D公司)检测ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率。

2 结果

2.1 2组患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率比较 感染组血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率明显高于未感染组(P<0.05),见表1。

表1 2组患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率比较[n(%)]

2.2 2组患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平比较 感染组血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平均高于未感染组(P<0.05),见表2。

表2 2组患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb水平比较

2.3 血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb对不孕不育症合并生殖道感染的诊断效能分析 经ROC曲线分析,发现ASAb、EMAb、AOAb、ACAb诊断不孕不育症合并生殖道感染的AUC值分别为0.972、0.945、0.968、0.891(P<0.05),见表3、图1(目次后)。

表3 血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb对不孕不育症合并生殖道感染的诊断效能分析

2.4 不同病原感染的不孕不育症患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb检测情况 Uu、Mh、Ct、Ng单一感染及混合感染者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率比较,差异均无统计学意义(P>0.05),见表4。

表4 不同病原感染的不孕不育症患者血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb检测情况[n(%)]

3 讨论

据文献报道[7],我国已婚夫妇中不孕不育率可达10%～15%,不孕不育不仅增加夫妇身心压力,也影响婚姻和谐,并在一定程度上威胁家庭生活稳定性。因此,分析不孕不育症相关影响因素,及时予以针对性治疗,有其必要性。近年来,免疫因素参与不孕不育过程已得到证实,部分学者认为[8-9],免疫失调不仅是导致女性不孕不育的重要因素,也能使生殖道感染风险增加,促进不孕不育的进程。故检测生殖免疫抗体在女性不孕不育症诊疗中具有重要作用。对此,本研究就血清ASAb、EMAb、AOAb、ACAb在不孕不育症合并生殖道感染诊断中的应用价值展开分析,取得较好效果。

女性在生理期、人工流产吸宫术等阴道创伤手术,或在生殖道炎性水平较高状态下进行性行为,可刺激机体产生ASAb,不仅影响生殖道自我防御系统,还促进生殖道巨噬细胞吞噬精子、损伤精子膜、溶解精细胞,导致女性的不孕不育[10-11]。郁兆存等[12]还发现,ASAb与Uu感染发生、发展有关,这可能是诱发男性不育的原因。提示ASAb可能与生殖道感染及不孕不育机制密切相关。本研究结果也显示,感染组血清ASAb阳性率及血清含量明显高于未感染组,且血清ASAb对不孕不育症合并生殖道感染具有较高诊断效能。提示生殖道感染可影响女性自身免疫,刺激ASAb表达升高,可共同介导育龄期女性不孕不育的发生。另外,EMAb主要作用于子宫内膜,影响早期受精卵的输送及着床,易造成流产性不育,且生殖道感染可刺激EMAb的分泌及产生,EMAb又可通过刺激子宫内膜免疫反应,形成局部病理变化,加速感染进程,二者形成恶性循环破坏生殖道健康[13-14]。而本研究中,感染组血清EMAb阳性率及血清含量明显高于未感染组,且血清EMAb在不孕不育症合并生殖道感染中诊断效能较高,表明EMAb在生殖道感染及不孕不育中发挥重要作用。既往研究发现[15],AOAb含量在卵巢早衰及早闭经、感染、炎症中含量显著升高,通过阻碍胚胎细胞分裂、影响雌孕激素的分泌、代谢等多种途径,使女性不孕不育。本研究结果还发现,感染组血清AOAb阳性率及其在血清含量明显高于未感染组,其血清含量在不孕不育症合并生殖道感染中诊断效能较高。说明AOAb可通过影响卵巢生殖内分泌功能导致女性不孕不育,借助其评估患者生殖道感染情况,对指导临床诊疗有利。病毒、支原体感染及自身免疫性疾病等因素均能导致ACAb表达升高,可影响前列环素的表达而促进血栓形成,并调控滋养层细胞功能,使子宫的供血及供氧减少,导致不孕不育[16-17]。本研究中,感染组血清ACAb阳性率及血清含量明显高于未感染组,ROC曲线提示血清ACAb对判断不孕不育症合并生殖道感染有重要作用。这也表明,ACAb不仅能通过影响子宫供血及供氧,引起不孕不育,还能辅助评估生殖道感染的发生,指导临床治疗。因此,ASAb、EMAb、AOAb、ACAb与不孕不育合并生殖道感染的发生、发展密切相关,临床可将其纳入诊疗指标。

女性生殖道感染以支原体、衣原体(如Uu、Mh、Ct、Ng)感染常见,且易出现混合感染,不同病原感染可能对机体免疫功能影响不同[18-19]。朱丽娟等[20]发现,女性不孕不育合并Uu、Mh、Ct感染时ASAb、EMAb抗体阳性率明显升高。本研究对不同病原感染者生殖免疫抗体阳性率比较,发现不同病原感染者间ASAb、EMAb、AOAb、ACAb阳性率比较并无显著差异,与上述学者的报道有所不同。考虑该结果一方面与不同病原感染均能造成生殖免疫抗体的过度表达,其影响程度可能极其相近;另一方面,本研究样本量不多且为单中心研究,缺乏代表性,可能造成研究结果偏倚。因此,不同病原感染者与生殖免疫抗体表达的关联性,还需后续联合其他医疗机构进行大样本量多中心前瞻性研究。