EV-A71疫苗接种后手足口病流行及临床特点

罗鹏燕 王华萍 赵仕勇 祁正红

手足口病仍是我国发病率最高、死亡例数最多的丙类传染病，严重影响儿童健康［1］。手足口病可由20多种肠道病毒引发，其中EV-71 是引起重症患儿死亡的优势病原［2-3］。2015 年由我国自主研制的EV-A71 灭活疫苗（EV-A71 疫苗）在国内上市，为防控EV-A71感染引起的手足口病提供新的方法［4］。杭州市2016 年7 月开始使用EV-A 71 疫苗［5］。本文回顾性分析2018-2021 年EV-A71 疫苗接种史的手足口病流行特点和临床特征。

1 资料与方法

1.1 临床资料 收集2018 年1 月至2021 年12 月杭州市儿童医院688 例肠道病毒感染手足口病患儿的临床资料，根据《手足口病诊疗指南2018 年版》的临床分类标准［6］。有EV-A71 疫苗接种史手足口病共47 例。

1.2 方法（1）标本采集及资料收集：患儿入院当天由专职医护人员用采集棉签，适度用力拭抹咽后壁或两侧扁桃体部位，迅速将棉签放入采集管中，置于-20℃冰箱保存。所有标本均在24 h 内完成实验室检测。同时收集相关的临床资料。（2）荧光定量PCR 法检测：病毒核酸提取：取咽拭子标本上清液200 μL 于1.5 mL离心管中，用荧光定量PCR 法检测肠道病毒通用型核酸，当肠道病毒通用型核酸、EV-A71 病毒核酸检测阳性，CA16 病毒核酸检测阴性；且肠道病毒通用型核酸检测的病毒载量和EV71病毒核酸检测的病毒载量相当时，则可确定为单纯的EV-A71 病毒感染。当肠道病毒通用型核酸检测阳性。对实验室确诊为非EV-A71、CA16 的其他肠道病毒感染患儿，通过手足口病肠道病毒CA6 和CA10 核酸双通道检测。（3）血清抗体检测方法 ：入院24 h 内采集患儿静脉血2 mL，置无菌采血管中，静脉血自凝后分离，ELISA 方法检测患儿血清EVA71 和CA16 IgM 抗体。采用捕获法ELISA，用抗人IgM（抗u 链）与样品种的IgM 抗体结合，然后加入抗原试剂与酶标试剂进行测定。

1.3 统计学方法 采用SPSS19.0 统计软件。计数资料用检验，计量资料用t检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 住院手足口病患儿流行特点 见表1-2。

表1 各类肠道病毒阳性患者性别分析［n（%）］

表2 各类肠道病毒阳性患者的发病年龄段分析［n（%）］

1.2 接种EV-A71 疫苗后手足口病临床特点 688 例患儿中有疫苗接种史手足口病47 例，其中男28 例，女19 例；年龄8 个月～4 岁。＜1 岁5 例，1～3 岁40 例，3～4 岁1 例。接种1 次EV-A71 疫苗11 例，接种2 次EV-A71 疫苗36 例。临床表现：47 例均发热，口、咽、手、足和臀部出疹分别47 例、36 例、33 例、32 例；颜面、颈部 四肢、躯干、肘部等其他部位出皮疹25例。相关神经症状13 例（惊厥11 例，惊跳2 例），CVA6 7 例，CV-A16 5 例，其他型1 例。实验辅助检查：WBC＜4×109/L 1 例，4～15×109/L 35 例，＞15×109/L 11例，血 清PCT＜0.05μg/L 1 例，0.05～0.5 μg/L 33 例，＞0.5～2 μg/L 12 例，＞2 μg/L 1 例。血清CRP＜10 mg/L 26 例，10～30 mg/L 13 例，＞30 mg/L 8 例。8 例头部CT均正常。6 例脑脊液检查：细胞数升高1 例120×109/L，淋巴细胞（L）80%，其他正常；蛋白升高5 例，糖和氯化物均正常。病毒核酸和血清IgM 抗体检测：疫苗后手足口病47 例，CV-A6 31 例，CV-A16 9 例，其他型7例。无EV-A71 感染。血清EV71 抗体IgM 阳性14 例，其中阳性3 例，弱阳性11 例，接种1 次EV-A71 疫苗6 例，接种2 次EV-A71 疫苗8 例，接种与发病时间最长12 个月。9 例CV-A16 感染者血清EV-A71 IgM阳性6 例（3 例阳性，3 例弱阳性）。血清CV-A16 抗体IgM 阳性5 例，血清EV-A71 和 CV-A16 IgM 抗体双阳性3 例。

3 讨论

EV-A71 从2008 年开始广泛流行，手足口病的优势病原可能每间隔4 年左右会出现较大变化，一般为2～3年，呈隔年高发，双数年份流行增强的特点［7］，CVA6、CV-A10 和CA16 可能循环流行，引起重视。但重症和死亡患儿病原以EV-71 为主［8］。近年来，EV-A71 相关的手足口病大幅度下降，得益于EV-A71 疫苗推广，同时手足口病病原学发生较大的变化，近几年CV-A6、CV-A10 等逐渐增多［9］。临床研究显示，疫苗具有良好的免疫原性和保护效力［10-11］。

本资料显示，688 例患儿绝大多数为非EV-A71，仅7 例EV-A71，而有EV-A71 疫苗接种史后手足口病47 例，31 例CV-A6，9 例CV-A16，其他型7 例。浙江省手足口病轻症患儿中，EV-A71 所占比例呈较为明显的下降趋势，其他肠道病毒呈上升趋势［12］。表明EVA71 型灭活疫苗接种是非常有效的，另外与循环流行有一定关系。47 例EV-A71 疫苗接种史后手足口病患儿血清EV71 抗体IgM 阳性14 例，占21.2%，6 例接种1次EV-A71 疫苗，8 例接种2 次EV-A71 疫苗，接种与发病时间最长12 个月。EV71 不同基因型和亚型具有交叉保护作用，而对CV-A16 感染手足口病和其他肠道病毒感染手足口病无保护效力［13-14］。另外，9 例CV-A16感染者血清EV-A71 IgM 阳性6 例，EV-A71 和CA16基因水平同源性为77%，EV-A71 IgM 和CA16-IgM 假阳性率分别为31.1%和27.5%［15］，表明EV71-IgM 和CV-A16 IgM 会产生明显交叉反应。另外，EV-A71 和CV-A16 感染产生EV-A71 IgM 和CV-A16 IgM 持续时间较长，因此，EV71-IgM 和CV-A16IgM 检测阳性难以区别是近期曾经感染还是急性期感染，还应考虑疫苗因素，对可疑手足口病要综合判断还需结合流行病学、EV-A71疫苗史和肠道病毒核酸检测。本资料显示，EVA71 疫苗接种后EV-A71 相关的手足口病显著降低，表明EV-A71疫苗对EV-A71引起的手足口病具有较强的保护性免疫，但对其他血清型无交叉保护作用［16］。

总之，有效预防EV-A71 感染需要全面接种EVA71 疫苗，特别是＜5 岁儿童，但对其他肠道病毒感染预防有限。