影响肉羊胚胎移植妊娠率的因素分析及改进措施

吴中东

（江苏省徐州市睢宁县农业农村局 江苏徐州 221200）

胚胎移植技术是在外源激素（孕激素、前列腺素等）的作用下使优秀的母羊能够实现超数排卵，然后从母羊子宫内将处于发育早期的胚胎取出并在体外环境中进行处理后移植到生理状态相同的受体母羊体内，从而使胚胎在受体母羊中发育成新个体并分娩，评价此技术好坏的指标为胚胎移植后的妊娠率。由于此技术涉及的过程和步骤较多较为复杂，故胚胎移植后的妊娠率易受到各种因素的影响。因此本文总结了可能影响肉羊胚胎移植妊娠率的原因并提出了相关改进措施，希望广大同行在进行操作时能够规避，提高妊娠率，增加经济效益，进一步拓宽肉羊养殖中胚胎移植的应用。

1 影响胚胎移植妊娠率的因素

1.1 胚胎因素

1）供体羊。取出的胚胎质量的好坏直接影响了移植后的妊娠率，因此供体羊是保证移植后有较高妊娠率的前提和基础。首先，要选择适合的供体羊，一般选择健康、生理状态良好、有正常发情周期、体态均匀、具有稳定遗传性能的母羊，并且母羊的年龄在2～5岁最为合适。若供体母羊质量较差，则会导致生产的胚胎较差，可能存在的死胎、畸形胎较多。然后母羊的发情鉴定以及人工授精技术也会影响胚胎的质量，要通过公羊试情的方式准确把握母羊发情时间，发情过早或者过晚均会导致产生的胚胎受到影响；人工授精的次数也是影响妊娠率的重要因素，一般情况下在确认发情后进行第一次的输精，间隔12 h 再进行一次，直至供体母羊不再有发情表现为止（3～4 次即可）。若未及时进行适时发情或者适时输精，则可能会导致受精困难、受精率较低或者出现受精后胚胎退化等问题，从而导致胚胎的质量降低。

2）胚胎的处理。胚胎的采集和保存对于胚胎的质量至关重要。采集胚胎时，要进行消毒尽量保证达到无菌的环境，包括手术器具、冲卵液、剃毛后的羊皮肤等，工作人员也要进行消毒并穿戴防护服，若未进行彻底的消毒则可能会因胚胎污染而导致胚胎的死亡甚至供体母羊的感染死亡；并在预热板上对冲卵液进行预热，若未进行预热则可能会由于冷应激造成胚胎的死亡。在胚胎进行保存时，若是鲜胚移植，则尽量在取胚后的2 h 内完成移植，避免造成胚胎质量下降；若需要进行冻胚且保存时间较长时，则需要2 h 更换一次保存液，且保存温度缓慢下降至20～25 ℃即可。

1.2 受体因素

1）受体羊的选择。受体羊为胚胎的生长发育提供营养，因此受体羊的选择是胚胎移植成功的基础。若选择年龄较大的母羊或者产单胎的肉羊品种则可能会导致胚胎移植后的妊娠率较低，因此应该考虑体型外貌、泌乳能力、体质、繁殖性能等作为受体羊的选择依据。此外，供体羊和受体羊的生理状态、同期化程度也是影响移植妊娠率的重要因素，若两者的生殖系统、发情时间不同步，则会导致妊娠率低，而当同步发情的时间差在12 h 以内时妊娠率较高[1]。

2）受体羊的饲养管理。受体羊营养水平的好坏是造成胚胎移植后成活率的关键因素。若受体羊过肥、过瘦均会造成妊娠率的下降，因此一定要做好饲养管理工作。首先，要保证受体羊营养的全面和均衡，合理搭配使用各种饲料原料（蛋白质饲料、能量饲料、粗饲料、矿物质饲料、维生素饲料等），一旦确定饲料配方后，不要轻易更换；然后要做好同期发情工作前的驱虫、免疫工作，若在移植后再随意使用驱虫药、抗生素类药物、疫苗等，则极易造成胚胎的畸形和死亡。最后，要做好受体羊术后的护理饲养工作，使用必要的预防感染的药物，及时观察羊只的状态（包括采食情况、精神状态、粪便排泄、伤口恢复等），若发现异常而未及时治疗时也会造成流产、死胎等，此外还要注意营养的供应（适当补充维生素和矿物质，尤其是提供充足的胡萝卜）、饲养密度等，避免因打撞而造成流产，降低移植后的妊娠率[2]。

1.3 技术因素

1）移植部位。移植部位的选择是影响胚胎移植后妊娠率的重要环节之一。不同生殖器官的生理发育状态不同，如输卵管、卵巢、子宫等器官均一般按照不同的生理程序（发情、排卵、受精、妊娠等）发生着不同的变化，从而导致其内部环境也存在一定的差异，且这种差异随时间的推移而逐渐加大。所以移植部位不同时会导致胚胎所处的生理环境不同，影响到胚胎移植后成活率。有试验研究发现，当所选择的胚胎是处于2 细胞时则移植到受体的部位较浅，当选择的胚胎是处于4、8 细胞时则移植到受体的部位较深，在选择移植部位的深浅时可以根据黄体的成熟程度以及胚胎的胚龄进行确定。

2）技术技巧。手术操作者的专业素质、操作时的熟练程度一定会对胚胎的成活率造成影响。当手术操作者操作不规范、动作拖沓、胚胎在体外停留时间较长、被污染的可能性更大时，则会导致胚胎移植后的妊娠率较低。当手术操作者较为熟练时则移植妊娠率更高[3]。

1.4 环境因素

1）胚胎移植季节的选择。由于羊属于季节性发情的动物，因此在一定的季节中才会发情并妊娠。一般处于9—12 月份的深秋和初冬是肉羊进行胚胎移植的最佳时间段，此时进行操作后的妊娠率较高。而若选择春季为胚胎移植的时期，则会由于此时的羊只处于休情期导致较低的移植妊娠率。

2）温度的影响。温度过高过低均会对肉羊的生殖生理过程产生影响，当温度过高时会由于甲状腺素的分泌减少而产生影响，并且高温导致供受体的生殖机能被改变，最终导致处于着床时期的胚胎衰弱甚至死亡，若高温时间过长则会增加新生羔羊的死亡率。当温度过低时，此时由于抑制了羊只的中枢神经系统，神经的传导性障碍从而使供受体母羊的代谢率、反应能力均下降，最终导致胚胎的生长发育、生活力等受到影响。

3）手术环境的影响。包括手术前的消毒卫生以及操作时的温度。若手术室未进行打扫以及消毒，灰尘比较多，存在的有毒有害物质比较多，则被感染的风险较大从而使胚胎受到伤害，尤其是与羊只有接触的手术设备和器械（冲卵管、吸管、拨卵针等），若这些被污染则严重时会造成胚胎和供受体母羊的死亡。手术操作时的温度也很重要，冷热变化幅度过大会对胚胎的生存造成较大的影响，一般控制在20～25 ℃范围内即可[4]。

2 改进措施

2.1 提高胚胎的质量

提高胚胎的质量主要包括选择优良的供体母羊、确定发情的最佳时间以及做好胚胎的采集和保存工作。首先，选择供体母羊时一般按照“强健的体魄、良好的外形、良好的繁殖机能、处于最佳繁殖年龄（2～5 岁）”的原则进行筛选；然后把握最佳的发情和受精时间，确定最佳发情的条件为“有大量的黏液存在于阴道口、食欲不振”，确定发情之后每间隔12 h 进行一次输精直至不再发情为止，防止只进行一次输精；最后要做好胚胎的采集和保存，采集时要在提前进行消毒的专门的手术室中进行，并且保证所使用的手术器械等均通过了高温灭菌和消毒，要将手术部位的被毛剔除并用酒精、碘酒等消毒，以“无菌”为采集胚胎的最高水准；在胚胎保存时，要控制好保存的温度，一般为20～25 ℃，且必须每间隔2 h 更换一次胚胎保存液[5]。

2.2 供受体大环境一致

供受体的大环境一致主要包括自然环境、营养饲料和牧草、日常饲养管理方式等均一致。对于自然环境一致，主要强调供受体母羊生活在同一场区，所处场区的温度、湿度、光照等一致，这样能够保证供受体母羊的新陈代谢、生长发育、激素水平等相同，为胚胎的采集和移植提供相同的大环境。对于营养饲料和牧草的一致，主要强调供受体能够达到要求的体况，一般在供受体移植这段时间要求膘情处于中上等水平，且饲料营养在一个平稳上升的阶段，这样能够保证胚胎有充足的营养满足自身的生长发育。对于日常饲养管理方式的一致，主要强调饲养方式一般为舍饲+适当的放牧或者完全舍饲，这样能够将供受体羊完全分开饲养，避免之间的相互打斗争食，也能使供受体羊在相同的饲养方式下得到同样的锻炼，保证供受体之间的生理状态相同或者相似[6]。

2.3 加强环境控制

主要体现在无菌操作、移植季节的确定、移植温度的控制三个方面。首先，一定要对参与的人员、用具、手术室等进行严格的灭菌和消毒，为胚胎提供一个无菌的环境。然后要根据羊只的生理特点、本地区的气候变化等确定移植的季节，一般秋季为最佳移植时期；最后要控制移植时手术室的温度，一般在20～25 ℃之间，避免温度变化过大影响胚胎质量。

3 小结

作为肉羊快速繁殖的技术手段之一，胚胎移植技术逐渐被广泛应用在生产实践中。在操作过程中易受到多种因素的影响，可能会导致移植后的妊娠率较低，因此一定要逐渐改进条件提高妊娠率，使胚胎移植技术在肉羊的育种中发挥更大的作用。■