外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α对初治活动性肺结核老年患者化疗疗效的评估价值*

刘 会,高江彦,霍 琳,张晓光,张会晓,张 焕,付洪义,王显雷,安贺娟,王 勇,刘 锐,陈素丽,李卫红

河北省胸科医院:1.感染性疾病科;2.肿瘤科;3.全质办;4.医务处;5.结核科,河北石家庄 050041

肺结核是较为常见的慢性传染病,主要是由结核分枝杆菌侵袭机体所致,而我国是肺结核高负担国家之一,该病可引起多种并发症,严重威胁患者身心健康[1]。多数患者感染后无明显临床症状或处于潜伏期,但部分患者感染结核分枝杆菌后可发展为活动性肺结核,处于高龄的患者往往伴有身体器官功能衰退,若延误治疗时机,可影响预后[2-3]。故早期诊断肺结核是降低病死率、改善预后的关键。机体免疫系统在肺结核发生、发展中扮演着重要角色,免疫功能紊乱是诱发该病的重要机制[4],有研究报道,血清可溶性白细胞介素2受体(sIL-2R)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、CD4+淋巴细胞百分比/CD8+淋巴细胞百分比比值(下称CD4+/CD8+)水平变化与肺结核疾病进展有关,而且与患者病情程度、预后关系密切[5-7],但关于其联合检测用于初治活动性肺结核老年患者化疗疗效的评估鲜有报道。故本研究拟探讨CD4+/CD8+、sIL-2R、TNF-α对初治活动性肺结核老年患者化疗疗效的评估价值,旨在为临床工作提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2019年12月至2022年12月本院收治102例初治活动性肺结核老年患者纳入研究作为观察组,其中女43例、男59例,年龄60～79岁、平均(69.71±3.11)岁,体重指数19.2～28.3 kg/m2、平均(22.69±1.89)kg/m2,45例有吸烟史,51例有饮酒史。纳入标准:符合《中国结核病病理学诊断专家共识》诊断标准[8],痰涂片细菌培养结果呈阳性,经胸片发现阳性病灶;年龄≥60岁;为初治活动性肺结核患者;无肺结核治疗史。排除标准:有其他呼吸系统疾病;有其他免疫性疾病;有恶性肿瘤;处于结核潜伏期;心、肝、肾有器质性病变;有其他传染性疾病;近3个月内接受过激素和免疫调节剂治疗;有活动性出血;有精神疾病或意识障碍。另选取年龄≥60岁的102例同期于本院体检的健康者作为对照组,其中女47例、男55例,年龄61～76岁,平均(68.92±2.56)岁,体重指数18.9～27.5 kg/m2、平均(22.47±1.68)kg/m2,40例有吸烟史,49例有饮酒史。两组一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05),具有可比性。纳入研究者均对本研究知情同意并签署知情同意书。本研究经本院医学伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1治疗方法 采用2HRZE/4HR抗结核方案治疗,异烟肼片(西南药业股份有限公司,国药准字H50020124,0.1 g)口服,0.3 g/d;乙胺丁醇胶囊(金陵药业股份有限公司南京金陵制药厂,国药准字H32021640,0.25 g)口服,0.75 g/d;吡嗪酰胺片(成都锦华药业有限责任公司,国药准字H51020877,0.25 g)口服,0.75 g/d;利福平(成都通德药业有限公司,国药准字H51021244,0.15 g)0.45 g/d;持续治疗6个月。

1.2.2疗效评价及分组 治疗1个月、治疗6个月评估临床疗效[9],显效:空洞愈合明显,X线显示病灶吸收明显,痰液细菌培养转阴;有效:X线检查显示病灶吸收良好,痰液细菌培养转阴;无效:X线检查显示病灶无变化甚至扩大,痰液细菌培养为阳性。根据治疗6个月的疗效,将患者分为显效组、有效组和无效组。

1.2.3sIL-2R、TNF-α、CD4+/CD8+的检测 收集观察组治疗前、治疗1个月、治疗6个月及对照组体检当天空腹静脉血,以3 000 r/min离心5 min,使用双抗体夹心法检测sIL-2R、TNF-α水平,sIL-2R试剂盒(YS02240P)、TNF-α试剂盒(YS-T10122)购自上海雅吉生物科技有限公司。用抗凝管取静脉血,使用美国BD公司FACCalibure型流式细胞仪检测CD4+、CD8+淋巴细胞百分比并计算CD4+/CD8+,CD4抗体(ab133616)、CD8抗体(ab217344)购自英国Abcam公司。

1.3观察指标 (1)比较两组sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平。(2)分析观察组sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α间的相关性。(3)比较观察组治疗前、治疗1个月、治疗6个月时不同疗效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平。(4)分析sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平与疗效的相关性。(5)分析治疗1个月、6个月时,外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α单项及联合检测对老年患者化疗疗效评估的价值。

2 结 果

2.1观察组治疗前与对照组sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比较 观察组治疗前外周血sIL-2R、TNF-α水平高于对照组,CD4+/CD8+低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 观察组治疗前与对照组sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比较

2.2sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α间的相关性 初治活动性肺结核老年患者外周血sIL-2R、TNF-α与CD4+/CD8+均呈负相关(r=-0.806、-0.723,P<0.05),sIL-2R与TNF-α呈正相关(r=0.701,P<0.05)。见图1。

图1 sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α间的相关性分析

2.3不同疗效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比较 不同疗效患者治疗前外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。相较于治疗前,治疗1个月、治疗6个月显效、有效组外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平均明显改善(P<0.05),无效组外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平无明显变化(P>0.05)。治疗1个月、6个月时,显效、有效组外周血sIL-2R、TNF-α水平均低于无效患者,CD4+/CD8+均高于无效患者,差异均有统计学意义(P<0.05);显效组外周血sIL-2R、TNF-α水平低于有效组,CD4+/CD8+高于有效组(P<0.05)。见表2。

表2 不同疗效患者sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平

2.4sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α水平与疗效的相关性 Spearman相关性分析 治疗1个月和6个月时,初治活动性肺结核老年患者外周血sIL-2R、TNF-α水平均与疗效呈负相关(P<0.05),而CD4+/CD8+与疗效呈正相关(P<0.05),见图2。

2.5sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α对初治活动性肺结核老年患者化疗疗效的评估价值 选取治疗1个月、6个月外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α作为ROC曲线源数据,将显效与有效患者作为阳性,无效患者作为阴性,绘制治疗1个月、6个月时外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α评估疗效的ROC曲线,治疗6个月时外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α用于评估疗效的曲线下面积(AUC)均高于治疗1个月(P<0.05)。进一步分析显示,治疗1个月、6个月时外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α联合用于评估疗效的AUC分别为0.880、0.932,明显大于各时间点单项指标用于评估的AUC(P<0.05),而且治疗6个月时外周血sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α联合评估的AUC高于治疗1个月时(P<0.05),见图3、表4。

注:左图为治疗1个月时的指标用于评估;右图为治疗6个月时的指标用于评估。

表4 sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α对初治活动性肺结核老年患者化疗疗效的评估价值

3 讨 论

结核病的免疫反应较为复杂,在结核病发生、发展过程中发挥着重要作用[10]。结核分枝杆菌感染机体后可产生有菌免疫应答,首先经巨噬细胞吞噬,而巨噬细胞、单核细胞可聚集在病灶周围,以增强免疫细胞功能杀灭结核分枝杆菌,但同时激活的淋巴细胞易发生变态反应,刺激细胞释放多种细胞因子,导致炎症反应加剧,加重疾病进展[11-13]。可见,免疫激活、炎症反应在机体抵抗结核分枝杆菌感染过程中至关重要,故检测有关细胞因子水平有助于了解患者病情和评估疗效[14]。

本研究结果显示,细胞因子之间存在相互影响,在肺结核免疫学发病机制中具有重要作用。T淋巴细胞和巨噬细胞被结核分枝杆菌激活后,活化的T淋巴细胞和巨噬细胞可释放TNF-α、多种白细胞介素,而这些因子聚集后又可激活其他炎症细胞,造成细胞因子相互作用级联反应,可协同促进疾病进展[15]。白细胞介素-2(IL-2)由T淋巴细胞分泌。在多种细胞表面有可与IL-2结合的IL-2R,主要有sIL-2R、膜结合型IL-2R(mIL-2R)两种受体,而sIL-2R是由免疫活性细胞膜上的mIL-2R脱落进入液体形成,可与mIL-2R并结合IL-2,以延长IL-2在血液中的半衰期,进而参与T淋巴细胞免疫应答过程[16-17]。但也有研究认为,sIL-2R还可与T淋巴细胞周围IL-2结合,造成其生理活性丧失,可加速细胞凋亡、抑制机体免疫反应,导致辅助性T细胞(Th)1/Th2平衡失调,造成机体防御感染能力降低[18]。TNF-α主要由活化单核巨噬细胞分泌,也可由T淋巴细胞分泌,能促进巨噬细胞活化和炎症细胞聚集,低水平TNF-α可调节机体免疫反应以达到抗感染效果,高水平TNF-α可刺激其他细胞因子分泌,诱导体内炎症反应[19]。有研究显示,活动性肺结核患者支气管肺泡灌洗液中sIL-2R、TNF-α水平增高且与患者活动度、空洞形成密切相关[20]。本研究结果发现,观察组sIL-2R、TNF-α水平高于对照组且患者sIL-2R与TNF-α水平呈正相关,这与刘曦等[20]的研究结果相似,提示高水平sIL-2R、TNF-α可参与初治活动性肺结核老年患者疾病进展。分析原因:结核分枝杆菌侵袭机体后,导致肺组织损伤,可激活T淋巴细胞和巨噬细胞,促进sIL-2R、TNF-α分泌进入患者血液中,加重疾病发展。CD4+T淋巴细胞百分比通常可以作为反映机体免疫力的指标,一般情况下,其数值越大表示免疫力越好,当机体免疫系统被破坏后,CD4+T淋巴细胞百分比会降低。CD8+与CD4+T淋巴细胞具有协同作用,可诱导细胞凋亡或杀伤结核分枝杆菌[21]。本研究结果显示,观察组CD4+/CD8+低于对照组,sIL-2R、TNF-α与CD4+/CD8+呈负相关。由于老年患者免疫功能低下,结核分枝杆菌入侵机体后可进一步降低患者免疫功能,导致CD4+/CD8+降低,机体对病原菌杀伤能力减弱,导致炎症反应过度激活,诱导肺组织损伤加重。

2HRZE/4HR是治疗肺结核一线化疗方案,该方案可有效杀灭结核分枝杆菌,破坏病原菌细胞壁,以达到抗菌目的[22],该方案治疗肺结核疗效明显,可减轻患者病情[23-24]。本研究中的患者治疗1个月、治疗6个月后,显效患者sIL-2R、TNF-α水平低于有效患者,后者低于无效患者;显效患者CD4+/CD8+高于有效患者,后者高于无效患者。相关性分析显示,sIL-2R、TNF-α、CD4+/CD8+与患者疗效密切相关,说明老年患者经治疗后可消灭部分病原菌,抑制炎症反应过度激活释放sIL-2R、TNF-α,提升机体免疫功能,提高CD4+/CD8+,有助于提高临床疗效。ROC曲线分析显示,治疗1个月、6个月时sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α联合评估的AUC明显较各时间点单项指标大,而且治疗6个月时各指标联合评估的AUC大于治疗1个月时,表明sIL-2R、CD4+/CD8+、TNF-α联合评估老年患者化疗疗效具有一定价值。

综上所述,初治活动性肺结核老年患者sIL-2R、TNF-α呈高水平,CD4+/CD8+较低,这3项指标与疗效密切相关,以上指标联合检测用于评估患者化疗疗效具有一定参考价值。