５２例乙型肝炎患者血清５羟色胺变化分析

殷海燕　王合群　周雍军　石贵福

【摘要】 目的 本研究检测5-TH在慢性HBV感染者血清的水平，分析其与ALT、HBV-DNA的相关性。方法 收集2008年2月至10月就诊于本院的慢性HBV感染者及健康志愿者共62例，检测其5-TH的含量。结果 慢性乙型肝炎组为5-TH的水平高于正常对照组，结果有显著性差异（P<0.05）。HBV DNA、5-TH和ALT三者之间相关性分析：5-TH与HBV DNA呈负相关；5-TH与ALT之间成正相关。结论5-TH也许可以作为一个新指标与ALT共同评价慢性HBV感染者。

【关键词】 乙型肝炎;5羟色胺;免疫

本研究检验健康人及慢性HBV感染者血清中5-TH的水平，观察其与ALT、HBV-DNA等临床常用指标的相关性，以了解机体免疫功能，探索准确全面地评价慢性HBV感染者免疫功能的方案及在抗病毒治疗中的应用前景。以期能对抗病毒治疗前免疫功能的评价及抗病毒治疗有所帮助。

1 资料与方法

1.1 研究对象 2008年2月~10月期间本院消化内科就诊的患者52例，男35例，女17例，年龄22~68岁，平均年龄（45.3±17.6）岁，均为慢性乙型肝炎患者。健康志愿者10例，男7例，女3例，年龄20~59岁，平均（36.1±14.5）岁，对位对照组。诊断和临床分型符合2005年中华医学会肝病学及感染病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》。纳入标准：年龄18~80，性别不限；乙肝五项中HBsAg为阳性，其它项不限；HBV DNA为阳性；半年内未用过免疫调节剂。排除标准：合并除乙肝外其它各型肝炎病毒感染；存在肝炎病毒以外其它病毒、细菌、真菌感；有非感染性炎症；患有自身免疫性疾病。

1.2 标本采集与方法 5-HT样本的制备：于清晨醒后平卧30 min，取血5 m，l置于含5%EDTA-Na20. 1 ml的聚丙烯塑料管中，混匀，500 r/min离心10 min，取血浆2 ml10 000 r/min离心30 min，去除上清液，剩下沉淀，加入1 ml稀释液，混匀，取20μl测量血小板值，剩余液体10 000 r/min离心20 min，去除稀释液，加入0. 8 ml重蒸水，混匀，立即放-40℃冰箱保存。

5-HT含量测定：将样本于-40℃和4℃反复冻融2次，取200μl液体，加入10μl高氯酸，混匀， 10 000 r/min离心20 min，取上清液150μ，l加入内标1 ng/μlDHBA30μ，l取100μl进样。Water's双泵，电化学检测器检测分析。其余血样用于HBV DNA、ALT、乙肝五项等指标的检测。

1.3 统计学处理 实验数据用均数±标准差(x±sD)表示，P<0.05为差异有统计学意义。各指标间相关关系采用直线相关分析。所有数据均运用SPSS(11.5)统计软件处理。

2 结果

2.1 5羟色胺两组情况 对照组为（161.45±31.3）ng/ml，慢性乙型肝炎组为（219.15±55.57）ng/ml，水平高于正常对照组，两组比较均有显著性差异（P<0.05）。

2.2 慢性乙型肝炎组HBV DNA、5羟色胺和ALT三者之间相关性分析 5-TH与HBV-DNA呈负相关（r=-0.769，P<0.05），5-TH与ALT之间成正相关（r=0.724，P<0.05），ALT与HBV-DNA呈负相关（r=-0.705，P<0.05）。

3 讨论

HBV感染已经成为一个全球性健康问题，对人类的健康和生命造成了严重危害。但并非所有被感染者的健康都会受到损害。受病毒和宿主免疫功能等因素影响，HBV感染后可出现不同的结局或临床类型，宿主的免疫功能是决定HBV感染后病情发展和转归的重要因素。以5-TH为代表的细胞因子，可增强细胞免疫应答^［1］。为了解慢性HBV感染者的免疫功能，张英剑等检测了105例慢性乙型肝炎患者5-TH的水平，结果与正常对照组相比水平均显著升高，本实验检测了5-TH的水平结果显示在慢性HBV感染者中5-TH水平较正常对照组高，该结果与与张英剑等的结论一致。当没有致病性的细菌、病毒等有害微生物侵犯人体时，机体的免疫系统处于相对静息状态。T细胞、B细胞和吞噬细胞等免疫细胞及其分泌的细胞因子的数量都处于一个较低的水平。当有害微生物作用于人体免疫系统被激活后，上述免疫细胞分泌的细胞因子也随之增多。对于HBV等病毒感染来说，5-TH型细胞因子增多使机体的免疫功能增强，才有利于病毒的清除而使机体恢复健康^［2］。

5-TH是执行非细胞溶解机制的主要细胞因子，同时具有免疫调节和直接抑制病毒复制的双重作用：一方面，5-TH是Th1型细胞因子中的一员，有助于Th0向Th1分化，进而促进CTL的增殖、分化、成熟。因此可以促进细胞介导的免疫应答，有利于病毒的清除；另一方面，5-TH可以通过清除病毒的衣壳颗粒及其内含有的复制性病毒基因组、使病毒RNA失稳等途径发挥直接抑制HBV复制的作用^［3］。为了探讨5-TH在慢性乙型肝炎患者的水平及临床意义，我们观察了5-TH、HBV DNA和ALT之间的相关性。结果在慢性乙型肝炎组，5-TH和ALT都与HBV DNA呈负相关，5-TH与ALT之间呈正相关关系。根据以上结果推测在慢性乙型肝炎组，5-TH通过非细胞溶解机制抑制了HBV的复制，而溶细胞机制并未起明显的作用^［4］。5-TH可能较ALT更适合于评价该组患者的免疫功能。慢性乙型肝炎组中两种机制都发挥了作用，并且两机制的抗病毒作用强度之间呈正相关关系。5-TH也许可以作为一个新指标与ALT共同评价慢性乙型肝炎患者的免疫状态。但是否有临床价值还有待进一步证实。

参考文献

［1］ Mosmann TR,Cherwinski H,Bond MW,et al.Two ypes of murine helper T cell clone. I. Definition according to profiles of lymphokine activities and secreted pro teins.J Immunol, 1986, 136(7):2348-2357.

［2］ Nakamura T,Lee RK,Nam SY,et al.Roles of IL-4 and IFN-gamma in stabilizing the T helper cell type 1 and 2 phenotype.J Immunol,1997,158(6):2648-2653.

［3］ 姜荣龙,卢桥生,骆抗先,等.慢性乙型肝炎病毒感染者外周血T辅助细胞1、2型因子的水平.中华传染病杂志,2000，18（1）：26-28.

［4］ Penna A,Del PG,Cavalli A,et al.Predominant T-helper 1 cytokine profile of hepatitis B virus nucleocapsid-specific T cells in acute self-limited hepatitis B.Hepatology,1997,25(4):1022-1027.